CRISPR-Cas9筛选技术揭示了胰腺癌中对KRAS抑制剂具有抗性的机制 开放获取（Open Access）

《Cancer Research》：CRISPR-Cas9 Screening Identifies Resistance Mechanisms to KRAS Inhibition in Pancreatic Cancer Open Access

KRAS抑制剂联合EGFR靶向治疗可协同抑制ERK反弹，克服KRASQ61H突变胰腺癌的耐药机制，筛选到CK2、p110α/γ、YAP等关键调控基因。

　　

摘要

针对多种KRAS突变的KRAS抑制剂（KRASi）已进入胰腺癌的临床试验阶段。尽管初步临床结果显示出积极的效果，但由于内在或获得性耐药性的存在，大多数患者仍会出现病情复发。因此，联合治疗对于提升KRAS靶向疗法的疗效至关重要。为了进一步探讨KRASi耐药性的遗传机制，我们在KRASG12D、KRASG12C、KRASG12R和KRASQ61H突变型胰腺癌（PDAC）细胞系中使用了六种KRASi，进行了CRISPR-Cas9功能丧失筛选，以识别影响KRAS抑制敏感性的基因。筛选结果中发现的几个关键基因包括EGFR、CK2、p110α、p110γ和YAP，这些基因的作用通过将它们与KRASi联合使用得到了验证。与其它KRAS突变亚型相比，KRASQ61H突变型PDAC细胞系在生存过程中对KRAS的依赖性较低。此外，在KRASQ61H突变型PDAC细胞系以及EGFR活性较高的细胞系中，EGFR抑制剂厄洛替尼与RAS（激活状态）多靶点抑制剂RMC-7977联用后，能够通过抑制ERK的反弹活性而增强治疗效果。尽管ERK活性降低，但KRASi耐药的细胞系仍然表现出对ERK/MAPK通路的持续依赖性。这些发现有助于深入理解KRASi的内在和获得性耐药机制，并揭示了可用于胰腺癌患者KRASi联合治疗的治疗靶点。