异基因干细胞移植患者使用0.1%环孢素A外用乳剂后一年内泪液蛋白质组学的改变

《Transplant Immunology》：One-Year Tear Proteomic Alterations with Topical Cyclosporine-A 0.1% Emulsion in Patients with Allogeneic Stem Cell Transplant

本研究探讨了环孢素A眼药水预防角膜移植后GVHD的效果，通过蛋白质组学分析发现差异蛋白与免疫和代谢通路相关，临床改善显著。

　　

刘畅|王欣月|万嘉洁|李伊莎贝尔·辛宇|叶晴琳|何阿洛伊修斯|Hein Than|金祥杰|黄英基|林弗朗西斯卡·洛林·魏英英|周磊|刘宇驰|汤路易斯|林丽

新加坡眼科研究所眼表研究小组

摘要

背景

眼移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后常见的并发症。长期使用环孢素A（CsA）对泪液蛋白质组学影响的预防作用及其潜在机制仍不清楚。

目的

研究接受每日局部使用0.1%环孢素A阳离子乳剂治疗的allo-HSCT患者的泪液蛋白质组学变化，并探讨泪液蛋白质组学与临床表型之间的关系。

方法

这项纵向干预研究共纳入24名参与者，从移植前3-5周开始至移植后12个月持续使用0.1%环孢素A眼药水。在移植前、移植时以及移植后3个月、6个月和12个月进行眼表临床检查并采集泪液样本。根据结膜T细胞分析结果，将患者分为反应组（R组）和非反应组（NR组）。采用液相色谱-串联质谱技术进行泪液蛋白质组学分析，并采用数据独立采集方法进行分析，随后进行线性混合模型回归分析。

结果

本研究共鉴定出2570种泪液蛋白质。移植前，R组和NR组在AGT、HRG和SERPIND1的表达上存在显著差异（所有P<0.05）。移植后，COL6A1、RAB11B和APOA2在R组和NR组之间的表达也存在显著差异（所有P<0.05）。通过WGCNA分析，这些蛋白质被归为6个模块，分别与免疫反应、中性粒细胞胞外陷阱形成以及糖胺聚糖的生物合成和代谢相关。这些模块与眼部临床表现（包括Schirmer试验值、泪液渗透压和结膜发红）存在显著相关性（所有P<0.05）。

结论

使用0.1%环孢素A阳离子乳剂进行预防性治疗可能通过调节免疫炎症相关蛋白及其通路，从而防止allo-HSCT后的眼GVHD发生。

章节摘录

引言

眼移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后常见的并发症，约40-60%的受者会出现该疾病，通常表现为严重的干眼症（DED）^1,2。如果不加以治疗，眼表严重的炎症和纤维化可能导致角膜病变、血管化、溃疡甚至视力丧失³，严重影响患者的生活质量⁴。

研究设计与研究对象

这项开放标签、单臂干预研究在新加坡国家眼科中心（SNEC）与新加坡综合医院（SGH）血液科合作进行。研究对象为2019年11月至2021年9月在SGH血液科接受allo-HSCT的患者。排除标准包括：（1）年龄小于13岁；（2）存在可能干扰研究结果的其他眼部或系统性疾病；（3）非本地居民。

患者人口统计学特征

本研究纳入的13名患者的人口统计学特征和临床评估结果已详细记录¹¹。总体而言，除一名患者在移植前已有中央角膜染色外，所有患者在研究期间均未出现明显的眼部症状。

泪液蛋白质组学分析

本研究共定量分析了2570种蛋白质。PLS-DA分析显示NR组和R组之间的泪液蛋白质组学特征存在显著差异（Q²

讨论

在这项前瞻性研究中，我们分析了接受每日局部使用0.1%环孢素A乳剂治疗的allo-HSCT患者的泪液蛋白质组学特征，随访时间为1年。在治疗期间，NR组和R组之间有多种蛋白质的表达存在显著差异，如AGT、HRG、SERPIND1、COL6A1、RAB11B、XRCC6、PFKFB4、COL6A1、GNG12、APOA2和GATAD1。这些蛋白质与免疫炎症反应、代谢过程以及糖胺聚糖的生物合成有关。

资金支持

本研究的人力支持来自国家医学研究委员会的临床科学家奖励计划（项目编号：MOH-CSASI23jan-0001和MOH-CSAINV24jul-0005）。

利益冲突声明

作者声明不存在需要披露的利益冲突。

致谢

本研究由Santen Pharmaceutical Asia Pte. Ltd.赞助。赞助方未参与研究的设计或实施。LZ感谢香港特别行政区政府创新及科技署的InnoHK计划以及香港理工大学的资助（项目编号：P0043882）。