建立并鉴定用于B组链球菌检测的基因组DNA参考物质

《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》：Establishment and characterization of a genomic DNA reference material for Group B Streptococcus detection

Group B Streptococcus (GBS)检测中DNA参考材料（RM）的开发与验证对提升诊断准确性至关重要。本研究基于ATCC 13813菌株提取DNA，通过数字PCR建立（7.53±0.48）×103 copies/μL的RM标准值，多中心验证显示其稳定性优异。临床测试发现三款商业试剂盒均未达到宣称的检测下限，易引发假阴性导致误诊，验证了RM在评估试剂盒性能中的关键作用。

　　

摘要

B组链球菌（GBS）是导致孕产妇和新生儿发病率及死亡率的主要原因之一。尽管像核酸扩增测试这样的分子检测方法被广泛用于GBS的检测，但其准确性依赖于可靠的参考标准。我们利用从参考菌株ATCC? 13813?中提取的基因组DNA开发了一种GBS的DNA参考物质（RM）。该RM通过液滴数字PCR技术进行了定量分析，显示出优异的均匀性和稳定性。通过多中心合作研究确定的RM的认证值为\(\left(7.53\;\pm\;0.48\right)\;\times\;10^3\;\mathrm{拷贝}/\mu L\)，其中不确定性表示扩展不确定性。我们进一步使用该RM评估了三种商用GBS检测试剂盒的分析性能，但没有任何一种试剂盒能够始终达到其宣称的检测限，这种差异可能导致假阴性结果以及随后的误诊或不当治疗。临床验证证实了这种GBS DNA RM在临床应用中的稳定性和适用性。该GBS DNA RM的建立为验证商用诊断试剂盒和平台提供了可靠的工具，从而提高了GBS核酸检测的准确性和可靠性。

图形摘要

B组链球菌（GBS）是导致孕产妇和新生儿发病率及死亡率的主要原因之一。尽管像核酸扩增测试这样的分子检测方法被广泛用于GBS的检测，但其准确性依赖于可靠的参考标准。我们利用从参考菌株ATCC? 13813?中提取的基因组DNA开发了一种GBS的DNA参考物质（RM）。该RM通过液滴数字PCR技术进行了定量分析，显示出优异的均匀性和稳定性。通过多中心合作研究确定的RM的认证值为\(\left(7.53\;\pm\;0.48\right)\;\times\;10^3\;\mathrm{拷贝}/\mu L\)，其中不确定性表示扩展不确定性。我们进一步使用该RM评估了三种商用GBS检测试剂盒的分析性能，但没有任何一种试剂盒能够始终达到其宣称的检测限，这种差异可能导致假阴性结果以及随后的误诊或不当治疗。临床验证证实了这种GBS DNA RM在临床应用中的稳定性和适用性。该GBS DNA RM的建立为验证商用诊断试剂盒和平台提供了可靠的工具，从而提高了GBS核酸检测的准确性和可靠性。

图形摘要