BH3模拟物和双重PI3K/mTOR抑制剂可减轻三阴性乳腺癌对吉西他滨的耐药性

《Medical Oncology》：BH3 mimetic and dual PI3K/mTOR inhibitor attenuates gemcitabine resistance in triple-negative breast cancer

本研究通过联合ABT-737与NVP-BEZ235，证实其协同克服三阴性乳腺癌细胞对顺铂耐药性的机制，涉及细胞周期阻滞、Bcl-2蛋白降解及hENT1/Mcl-1基因调控。

　　

摘要

三阴性乳腺癌（Triple-Negative Breast Cancer, TNBC）可能会对吉西他滨产生耐药性，克服这种耐药性对于有效治疗至关重要。在癌细胞中，抗凋亡的Bcl-2家族蛋白通常会上调，从而干扰细胞凋亡过程。ABT-737能够与Bcl-2和Bcl-xL结合以促进细胞凋亡，但对Mcl-1蛋白没有作用。NVP-BEZ235是一种PI3K-mTOR双重抑制剂，它可以抑制细胞增殖，提高细胞对化疗药物的敏感性，并克服耐药性。本研究展示了ABT-737和NVP-BEZ235在克服吉西他滨耐药性的三阴性乳腺癌（MDA-MB-231^GEMR）细胞系中的协同作用。MDA-MB-231^GEMR细胞系是通过持续使用吉西他滨建立起来的，其耐药性通过细胞增殖和qPCR分析得到验证。使用Resazurin细胞活力测定法评估了ABT-737、NVP-BEZ235及其联合用药对MDA-MB-231^GEMR细胞的毒性，结果显示联合用药的指数值为0.794。对于MDA-MB-231^GEMR细胞系，有效剂量为5μM的ABT-737和0.1μM的NVP-BEZ235，在72小时时具有显著效果。联合治疗显著降低了MDA-MB-231^GEMR和MDA-MB-231细胞系的迁移能力和克隆形成能力。这两种药物的联合使用在MDA-MB-231^GEMR细胞系中诱导了细胞周期在Sub-G0期的停滞。基因表达分析显示Mcl-1基因表达显著增加，而Bcl-2基因表达减少。此外，hENT1基因表达水平也上调，表明可能存在耐药性的逆转。Western blot分析显示Bcl-2蛋白的表达水平低于对照组。利用GEPIA进行的计算机模拟分析揭示了hENT1与Mcl-1和Bcl-2之间的关联。这些发现表明ABT-737和NVP-BEZ235能够抑制MDA-MB-231^GEMR细胞系的生长，并为进一步研究逆转TNBC的耐药性提供了潜在依据。