新型DNAH17剪接位点突变导致AAA6结构域缺失，从而引发伴有MMAF的弱精子症

《Reproductive Sciences》：Novel DNAH17 Splice-Site Mutations Truncating the AAA6 Domain Cause Asthenozoospermia with MMAF

DNAH17基因剪接位点变异导致精子尾部畸形与活动力下降的机制研究。通过WES和Sanger测序鉴定2个新剪接位点变异，生物信息学预测显示剪接受体位破坏，minigene实验证实外显子72缺失及frameshift突变，导致AAA6结构域截断。该研究揭示剪接变异通过破坏AAA6结构域的新致病机制，强调剪接位点分析在男性不育症诊断中的重要性。

　　

摘要

为了研究DNAH17中剪接位点变异的致病性，并分析它们对精子形态和运动能力的影响，我们采用了全外显子测序（WES）和Sanger测序技术来识别和验证候选变异。使用varSEAK和MobiDetails对剪接缺陷进行了计算预测。功能验证是在HEK293T细胞中通过微型基因剪接实验进行的。突变蛋白的结构建模使用了AlphaFold3软件，并通过PyMOL进行可视化。在一名患有弱精症（asthenozoospermia）和精子鞭毛多处形态异常（MMAF）的受试者中，发现了两个新的剪接位点变异（DNAH17：c.11677?+?5G?>?T/c.11677?+?5G?>?A）。生物信息学工具预测这些变异破坏了经典的供体剪接位点（MaxEntScan评分降低：G?>?A时为54.2%，G?>?T时为39.5%；SpliceAI供体丢失评分＞0.8）。微型基因实验确认了外显子72的跳跃，导致了一个移码突变（p.Asn3844Lysfs*13），从而截断了AAA6结构域。本研究通过证明破坏AAA6结构域的剪接位点变异是导致弱精症和MMAF的新致病机制，扩展了与DNAH17相关的男性不育的突变谱系。这些发现强调了将剪接位点分析整合到男性不育的遗传诊断中的必要性。