胡椒碱通过抑制免疫检查点CD47来增强对胰腺癌的免疫力

《Phytotherapy Research》：Piperine Inhibits the Immune Checkpoint CD47 to Enhance Immunity Against Pancreatic Cancer

胰腺癌免疫治疗研究：胡椒碱通过抑制CD47增强抗肿瘤免疫。体外实验显示胡椒碱抑制Panc02和PANC-1细胞增殖迁移并诱导凋亡，体内实验证实其抑制皮下及原位移植瘤生长转移。机制研究表明胡椒碱下调CD47表达，增强巨噬细胞吞噬肿瘤细胞能力和CD8+ T细胞激活水平，为胰腺癌免疫治疗提供新策略。

　　

摘要

胰腺癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，发病隐匿且转移迅速。大多数患者在确诊时已处于晚期，死亡率非常高。近年来，免疫疗法已成为治疗胰腺癌的一种有前景的方法。一些研究表明，胡椒碱具有抑制胰腺癌的潜力，但其在体内对肿瘤进展和肿瘤免疫中的作用仍不明确。本研究探讨了胡椒碱对胰腺癌免疫的影响及其机制。通过CCK-8、平板菌落形成实验、CFSE染色、伤口愈合实验、Transwell实验和流式细胞术检测了胡椒碱对胰腺癌Panc02和PANC-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响。通过构建小鼠皮下和原位胰腺癌模型，并利用活体动物成像和流式细胞术，研究了胡椒碱对胰腺癌生长、转移和免疫微环境的影响。通过网络药理学和RNA-seq分析了胡椒碱与胰腺癌之间的相互作用靶点，并确定了免疫细胞变化的关键基因。通过免疫组化、流式细胞术、qRT-PCR和Western blot研究了胡椒碱对胰腺癌组织和细胞中CD47的具体作用。将肿瘤细胞与腹膜/骨髓来源的巨噬细胞或CD8⁺ T细胞共培养，以探讨其细胞机制，并通过免疫荧光、磁珠分选和流式细胞术检测巨噬细胞的吞噬作用及CD8⁺ T细胞的活化情况。体外实验表明，胡椒碱能够抑制胰腺癌细胞系Panc02和PANC-1的增殖和迁移，并诱导其凋亡。体内实验显示，胡椒碱可抑制小鼠皮下和原位胰腺肿瘤的生长和转移。在免疫微环境中，胡椒碱显著增加了肿瘤和脾脏中巨噬细胞（尤其是M1型巨噬细胞）以及CD8⁺ T细胞的比例。此外，胡椒碱降低了胰腺癌细胞中CD47的mRNA和蛋白质表达水平，从而增强了巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用，并提高了CD8⁺ T细胞的活化程度。我们的研究结果表明，胡椒碱通过阻断免疫检查点CD47来增强胰腺癌的免疫抑制作用。因此，胡椒碱有望为胰腺癌的免疫治疗提供新的途径。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突。

数据可用性声明

作者保证，本研究的所有原始数据可应要求向第一作者或通讯作者获取。