淋巴瓣形成的调控有助于促进淋巴液排出，从而减少动脉粥样硬化斑块的形成：瓜娄-泻白方抗动脉粥样硬化的新机制

《Journal of Ethnopharmacology》：The regulation of lymphatic valve formation promotes lymphatic drainage to reduce atherosclerotic plaques: A novel mechanism of anti-atherosclerosis by Gualou-Xiebai

动脉粥样硬化（AS）小鼠模型中，瓜蒌-细辛（GLXB）通过靶向VEGFR3促进淋巴管内皮细胞（LECs）增殖迁移，形成淋巴瓣并维持淋巴引流功能，改善血管病变。机制研究显示GLXB活性成分槲皮素和山柰酚-3-O-β-芸香糖苷可调节VEGFR3介导的淋巴瓣形成，抑制血清IL-1β、IL-18及ox-LDL表达。

　　这项研究围绕着一种传统中药组合——“瓜蒌薤白”（GLXB）在治疗动脉粥样硬化（AS）中的作用机制展开。研究团队包括来自安徽中医药大学药学院的多位学者，他们在实验中探索了GLXB是否通过调节淋巴引流功能和淋巴瓣膜的形成来缓解AS的病变。通过一系列实验方法，包括超声成像、组织切片分析、细胞实验等，研究者发现GLXB能够促进淋巴引流，改善血管病变，并且其作用与VEGFR3这一关键靶点密切相关。此外，研究还揭示了GLXB中的关键活性成分，如芦丁和山奈酚-3-O-β-芦丁苷，可能通过作用于VEGFR3来发挥保护淋巴内皮细胞的作用，从而减轻AS的发展。

动脉粥样硬化是一种慢性血管疾病，其特点是动脉壁内脂质、炎症细胞以及其他大分子物质的异常沉积，导致血管腔狭窄和血流受限。在这一过程中，动脉外膜中的淋巴系统发挥着重要作用，其通过淋巴瓣膜结构帮助清除进入动脉壁的有害物质，维持血管壁的完整性。传统研究主要关注动脉内膜的病变机制，而忽视了外膜在疾病发展中的作用。然而，越来越多的研究表明，外膜中的淋巴系统不仅参与清除有害物质，还在维持外膜微环境的稳定方面具有关键意义。淋巴引流功能的障碍会导致大分子物质和炎症细胞突破淋巴内皮屏障，最终在动脉壁内发生病理沉积，引发血管病变。因此，保护淋巴内皮细胞和促进淋巴瓣膜的形成对于维持淋巴引流功能至关重要。

VEGFR3在淋巴内皮细胞（LECs）中扮演着重要角色，是淋巴瓣膜形成的关键靶点。研究表明，VEGFR3的激活能够促进淋巴瓣膜的发育，维持正常的淋巴引流功能，而其抑制则可能导致淋巴引流功能障碍，引发淋巴水肿。因此，VEGFR3被视为一种有潜力的靶点，用于调控淋巴瓣膜的形成和淋巴引流功能。尽管VEGFC-VEGFR3信号通路在淋巴管生成中的作用已经被广泛研究，但其在调控动脉外膜淋巴瓣膜形成以及后续影响淋巴引流功能方面的具体机制仍不明确。

本研究通过建立淋巴引流阻断的小鼠模型，评估了GLXB在改善AS血管病变中的作用。研究者发现，GLXB能够促进动脉外膜中的淋巴引流，改善血管病变，并且这一作用与淋巴瓣膜的形成密切相关。进一步的实验表明，GLXB能够促进LECs的增殖和迁移，同时上调与淋巴瓣膜形成相关的多种标志物的表达。这说明GLXB可能通过作用于VEGFR3这一靶点，促进LECs的发育，从而维持正常的淋巴引流功能，减轻AS的发展。此外，研究还发现GLXB中的关键活性成分，如芦丁和山奈酚-3-O-β-芦丁苷，可能通过作用于VEGFR3来发挥保护LECs的作用，促进淋巴瓣膜的形成。

在实验方法上，研究者采用了一系列先进的技术手段。首先，通过多普勒超声成像验证了AS病变的存在，确认了模型的成功建立。随后，利用HE染色和形态学摄影评估了斑块面积的变化，进一步验证了GLXB在减轻斑块形成中的作用。为了研究淋巴引流功能的障碍对AS的影响，研究者对小鼠的双侧颈总动脉进行了结扎，阻断了主动脉的淋巴引流，建立了淋巴引流阻断模型。在该模型中，研究者利用近红外双区成像和Evans蓝染色检测了淋巴管收缩频率和渗漏情况，评估了淋巴引流功能的变化。此外，通过免疫荧光分析检测了与淋巴瓣膜形成相关的特定生物标志物的表达，以评估淋巴瓣膜的形成情况。

在体外实验中，研究者建立了氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的LECs损伤模型，评估了GLXB对LECs功能的影响。通过抑制VEGFR3，研究者进一步验证了其是否为GLXB促进LECs发育和维持淋巴引流功能的关键靶点。此外，研究还探索了GLXB中的潜在活性成分，如芦丁和山奈酚-3-O-β-芦丁苷，是否能够通过作用于VEGFR3来改善LECs的损伤。

本研究的发现为理解GLXB在治疗AS中的作用机制提供了新的视角。通过从淋巴引流和淋巴瓣膜形成的角度出发，研究揭示了GLXB如何通过促进LECs的发育和维持淋巴引流功能来改善AS的病变。这不仅为传统中药在现代医学中的应用提供了科学依据，也为开发新的治疗策略奠定了基础。此外，研究还强调了VEGFR3在调控淋巴瓣膜形成和淋巴引流功能中的关键作用，表明其可能是GLXB治疗AS的重要靶点。

在实验中，研究者还发现，GLXB能够上调高密度脂蛋白（HDL）水平，促进巨噬细胞中的胆固醇流出，并调节AS小鼠的逆胆固醇转运（RCT）过程。这些发现进一步支持了GLXB在改善AS中的作用可能与淋巴系统密切相关。HDL在AS斑块中的作用已被广泛研究，其能够帮助清除脂质，促进淋巴系统对这些脂质的引流。因此，GLXB可能通过增强HDL水平和促进RCT过程，间接改善淋巴引流功能，从而减轻AS的发展。

研究团队还通过实验验证了GLXB的药效。例如，在超声生物显微镜下观察到，模型组小鼠的主动脉弓和颈动脉腔明显变窄，最大血流速度下降，表明存在斑块，AS模型成功建立。而在GLXB干预后，主动脉弓的斑块面积明显减少，这进一步证明了GLXB在减轻AS斑块形成中的作用。此外，通过免疫荧光分析发现，GLXB能够促进与淋巴瓣膜形成相关的特定生物标志物的表达，表明其在促进淋巴瓣膜形成方面具有积极作用。

从临床角度来看，GLXB作为一种传统中药组合，长期以来被用于治疗“胸痹”（胸痛）等心血管疾病。其主要成分包括瓜蒌和薤白，具有清热解毒、活血化瘀、止痛等功效。现代药理研究也表明，GLXB具有抗炎和降脂的作用，能够多方面抑制AS的发病机制。这些发现不仅支持了GLXB在治疗AS中的临床应用，也为其科学机制提供了理论依据。

研究团队在实验中使用的试剂和化学物质包括来自北京同仁堂公司的瓜蒌和薤白，以及来自杭州默沙东制药公司的辛伐他汀（SIM）片。此外，VEGFR3抑制剂MAZ51、ox-LDL、以及针对IL-1β、IL-18、PROX1和LYVE-1的初级抗体等实验材料均来自可靠的供应商。这些试剂的高质量和稳定性为实验的准确性和可重复性提供了保障。

研究还指出，某些参考文献未被引用，这可能是因为它们与本研究的主题关联较弱，或者研究者认为这些文献的内容已足够详尽，无需额外引用。同时，研究团队声明没有利益冲突，表明其研究结果的客观性和科学性。研究的资助来自国家自然科学基金和安徽省高校自然科学研究项目，这表明该研究具有较高的科学价值和实际意义。

综上所述，这项研究通过系统的实验方法和深入的机制分析，揭示了GLXB在治疗AS中的作用可能与淋巴系统密切相关。研究发现，GLXB能够促进LECs的增殖和迁移，同时上调与淋巴瓣膜形成相关的多种标志物的表达，这可能与VEGFR3这一关键靶点有关。此外，GLXB中的活性成分如芦丁和山奈酚-3-O-β-芦丁苷可能通过作用于VEGFR3来改善LECs的损伤，促进淋巴瓣膜的形成，从而维持淋巴引流功能，减轻AS的发展。这些发现不仅为传统中药在现代医学中的应用提供了科学依据，也为未来开发针对AS的新型治疗方法奠定了基础。