使用FMOC-Cl衍生化方法开发并验证了一种用于测定菜籽油中草甘膦和AMPA残留物的超高效液相色谱-质谱/质谱（UHPLC-MS/MS）方法

《Journal of Food Composition and Analysis》：Development and Validation of a UHPLC-MS/MS Method for Quantifying Glyphosate and AMPA Residues in Canola Oilseeds using FMOC-Cl Derivatization

草甘膦及代谢物AMPA在向日葵油籽中的UHPLC-MS/MS检测方法开发与验证，采用FMOC-Cl衍生化技术提高灵敏度，LOD为0.0009 mg/kg（草甘膦）和0.0004 mg/kg（AMPA），方法符合国际残留标准，分析伊朗两地样本显示种子与果壳残留差异显著。

　　该研究聚焦于开发并验证一种高灵敏度的超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）方法，结合9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC-Cl）衍生化技术，用于测定油菜籽中的草甘膦及其主要代谢产物氨基甲基膦酸（AMPA）残留。油菜籽作为一种重要的全球作物，其富含ω-3脂肪酸和低饱和脂肪含量，是人类营养和畜牧业饲料的重要来源。然而，其生产受到寄生性杂草如列当属植物的威胁，这些杂草会消耗宿主植物根部的关键养分，显著降低产量和品质。草甘膦作为一种广谱除草剂，被广泛应用于油菜种植以有效控制杂草。然而，由于草甘膦及其代谢产物具有极性高、缺乏天然色谱基团等特性，导致其在复杂的脂质基质中检测困难。因此，开发一种适用于油菜籽等高脂肪基质的高效检测方法具有重要意义。

研究团队通过实验优化了衍生化过程中的溶剂选择，最终确定使用水与乙腈的混合溶剂（10:90, v/v）作为最佳反应介质，以提高检测灵敏度和重现性。该方法通过采用矩阵匹配校准技术，有效减少了基质效应，提高了检测的准确性。实验结果显示，该方法具有优异的线性关系，R2值分别为0.9997（草甘膦）和0.9996（AMPA），表明方法的稳定性与可靠性。检测限（LOD）分别为0.0009 mg/kg（草甘膦）和0.0004 mg/kg（AMPA），定量限（LOQ）分别为0.0031 mg/kg和0.0014 mg/kg，显示出方法的高灵敏度。回收率分别为83.09%（草甘膦）和82.28%（AMPA），进一步验证了方法的准确性与精密度。

研究还分析了来自伊朗德兹福尔和克尔曼沙赫地区的实际样品，发现克尔曼沙赫地区的油菜籽中草甘膦和AMPA残留量高于德兹福尔地区，而德兹福尔地区的谷壳残留量更高。这一结果反映了不同地区农业实践和环境因素对除草剂残留的影响。例如，克尔曼沙赫可能因农业活动的持续性和环境条件，导致草甘膦的降解速率较低，从而在油菜籽中积累更多残留。而德兹福尔地区的谷壳可能因物理结构和暴露于喷雾漂移，导致草甘膦和AMPA的吸收与保留更加显著。此外，研究还分析了从油菜籽中提取的食用油样本，发现草甘膦在油中几乎检测不到，而AMPA的残留量较低，这表明草甘膦不易在油脂中富集。

研究团队还对方法的分析性能进行了系统评估，包括回收率、精密度、检测限和定量限等关键指标。通过使用Python进行数据处理与可视化，结合统计分析工具如NumPy、SciPy、Matplotlib和Seaborn，确保了实验数据的科学性与可重复性。研究发现，方法在不同浓度水平下均表现出良好的重现性，内标法和重复性评估均符合国际标准，如欧洲联盟（EU）的SANTE/11312/2021 v2指导文件以及Codex Alimentarius原则。

此外，研究探讨了FMOC-Cl衍生化在油菜籽等高脂肪基质中的应用价值。相比于传统的非衍生化方法，FMOC-Cl衍生化能够显著提高草甘膦和AMPA的检测灵敏度，同时减少基质干扰，提高色谱分离效果。这种方法在环境和食品基质中的应用已被广泛验证，但在油菜籽等脂质含量高的植物基质中尚属首次。研究团队通过对比不同衍生化介质的效果，选择了水/乙腈混合溶剂作为最佳反应体系，从而提高了方法的适用性与可靠性。

研究的结论表明，该方法能够满足国际监管标准，为食品安全监测和农药残留分析提供了可靠的工具。方法在实际样品中的应用验证了其在复杂基质中的有效性，同时揭示了不同地区农业实践对农药残留水平的影响。研究还强调了未来研究方向，包括扩展该方法至其他食品基质以及进一步探讨影响农药残留的因素。通过这种方式，该研究不仅提升了农药残留检测技术的水平，也为保障食品安全和符合国际监管要求提供了科学依据。