从EBUS-TBNA上清液中提取DNA和RNA以用于非小细胞肺癌的分子谱分析的可行性

《Pulmonology》：Feasibility of DNA and RNA preservation from EBUS-TBNA supernatant for molecular profiling in non-small cell lung cancer

非小细胞肺癌患者EBUS-TBNA上清相与细胞沉淀的分子分型可行性研究显示，上清相DNA（29.9 ng/μL）和RNA（52.12 ng/μL）浓度显著高于细胞沉淀（9.58 ng/μL和13.6 ng/μL），且检测到2例额外 actionable突变，总体一致性87%。

　　在肺癌的诊断与治疗过程中，分子水平的检测对于精准医疗具有重要意义。非小细胞肺癌（NSCLC）作为最常见的肺癌类型，其分子特征的识别直接影响到靶向治疗和免疫治疗的选择。传统上，医生在进行支气管内超声引导经支气管针吸活检（EBUS-TBNA）后，通常只关注细胞沉淀物（Cp）进行分子分析，而将上清液（Sp）视为无用物质直接丢弃。然而，随着对肿瘤细胞游离DNA（ctDNA）研究的深入，人们开始意识到Sp可能含有丰富的肿瘤相关分子信息，为NSCLC的分子分析提供了新的可能性。

本研究旨在探讨从EBUS-TBNA样本的Sp中提取DNA和RNA是否能够为NSCLC提供可靠且足够的分子分析数据。研究团队选取了15名接受EBUS-TBNA并需进行分子检测的晚期NSCLC患者，分析了Sp与Cp在DNA和RNA浓度上的差异，以及两者在分子特征上的匹配度。结果显示，Sp中的DNA和RNA浓度显著高于Cp，这表明Sp在分子分析中具有更高的可行性。此外，Sp检测到的突变数量略多于Cp，其中包含两个额外的可操作性突变，进一步支持Sp作为分子分析的补充或替代来源。

这一发现对于临床实践具有重要价值。在晚期NSCLC患者中，获取足够的组织样本进行分子分析有时面临困难，而Sp的使用则为这一问题提供了新的解决方案。通过Sp进行分子分析，不仅能够避免重复取样，还能缩短检测周期，提高诊断效率。更重要的是，Sp的使用不会影响原有的临床工作流程，无需额外调整样本处理方式，这在实际操作中具有显著优势。

从分子生物学角度来看，Sp中的DNA和RNA含量较高，说明在EBUS-TBNA过程中，肿瘤细胞释放的游离DNA可能存在于液体环境中。这一现象与液体活检的概念相吻合，即通过血液、尿液等非组织样本获取肿瘤的分子信息。然而，与传统的液体活检不同，Sp的获取基于直接的临床操作，能够提供更准确的肿瘤来源信息，减少误判的可能性。此外，Sp的分子分析结果与Cp之间表现出较高的一致性，但在某些情况下也存在差异，这提示Sp可能捕捉到Cp未能识别的分子特征，为临床提供更全面的信息。

在实际操作中，EBUS-TBNA样本的Sp处理相对简单，只需通过离心、洗涤等步骤即可提取DNA和RNA。研究团队采用的缓冲甲醛保存方式，使得Sp中的分子物质得以稳定保存，不影响后续的分子检测。这一方法的可行性在本研究中得到了验证，与之前需要调整处理流程的研究相比，Sp的使用更加便捷，也更符合临床常规操作。因此，Sp的分子分析不仅能够提高检测的效率，还能在一定程度上优化资源利用，降低医疗成本。

此外，本研究还强调了Sp在肿瘤异质性研究中的潜力。肿瘤异质性是影响治疗效果的重要因素，而Sp中的分子信息可能反映出肿瘤的多样性。通过Sp进行分子分析，能够更全面地了解肿瘤的基因组特征，为个体化治疗提供依据。这一研究结果与当前关于液体活检和肿瘤相关分子分析的文献相一致，进一步支持了Sp在NSCLC分子检测中的应用前景。

尽管本研究的样本量较小，但其结果为Sp在临床中的应用提供了初步证据。未来的研究需要进一步扩大样本量，以验证Sp在不同患者群体中的适用性。同时，还需要探讨存储时间、样本处理技术等因素对Sp中DNA和RNA质量的影响，以确保其在临床实践中的稳定性与可靠性。随着分子检测技术的不断进步，Sp的使用有望成为NSCLC分子分析的重要补充手段，为精准医疗提供更有力的支持。

从临床角度来看，EBUS-TBNA是一种微创且高效的诊断方法，广泛应用于NSCLC的分期和诊断过程中。在传统流程中，Cp的使用主要依赖于组织样本的完整性，而Sp的处理则相对简单，能够避免因组织样本不足而导致的检测失败。因此，Sp的使用不仅能够提高检测的成功率，还能在一定程度上改善患者的诊疗体验。特别是在晚期NSCLC患者中，快速获取分子信息对于制定治疗方案至关重要，而Sp的使用能够为这一目标提供额外的支持。

在分子分析方面，Sp的使用还能够提高检测的多样性。例如，在某些患者中，Sp检测到了Cp未能识别的突变，这表明Sp可能捕捉到肿瘤的某些独特特征。这些特征在传统的组织样本分析中可能被忽略，从而影响治疗方案的选择。因此，Sp的使用不仅能够提高检测的全面性，还能为临床提供更多的决策依据。此外，Sp的分子分析结果在一定程度上与Cp一致，说明其能够作为Cp的可靠补充，提高诊断的准确性。

综上所述，EBUS-TBNA样本的Sp在分子分析中具有较高的可行性和可靠性。其DNA和RNA浓度显著高于Cp，且能够检测到更多的分子特征，特别是在可操作性突变方面。这一研究结果为Sp在NSCLC分子检测中的应用提供了重要支持，同时也为未来的临床研究和实践提供了新的方向。随着技术的不断进步和临床经验的积累，Sp的使用有望成为NSCLC分子分析的重要组成部分，为精准医疗的发展做出贡献。