Peiminine 调节实验性自身免疫性肝炎中 T 细胞相关的基因表达和炎症活性

《Cellular Immunology》：Peiminine modulates T cell-associated gene expression and inflammatory activity in experimental autoimmune hepatitis

自身免疫性肝炎（AIH）是一种由T细胞介导的免疫失衡引发的慢性肝损伤，现有治疗存在复发率高、副作用大等问题。本研究发现中药成分peiminine可显著改善AIH小鼠的肝组织病理学，抑制Th1/Th17细胞活化并增强FOXP3+ Treg细胞功能，其效果与标准药物泼尼松龙相当，且能降低促炎细胞因子水平。

　　本研究由一组伊朗医学科学领域的研究人员共同完成，旨在探讨一种天然化合物——肽迷宁（peiminine）在实验性自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis, AIH）模型中的治疗效果。研究团队包括Amin Azizan、Mohamadali Abyazi、Seyed Kiarash Aghayan、Majid Mirzaei Nodooshan、Akbar Ghorbani Alvanegh以及Hadi Esmaeili Gouvarchin Ghaleh，他们分别来自应用病毒学研究中心、生物医学技术研究所以及巴吉亚塔拉赫大学医学院。研究聚焦于AIH这一慢性炎症性肝病，该病主要由免疫系统错误攻击肝细胞引起，并且由于调节性T细胞（Treg）功能不足，导致免疫反应失衡。

AIH是一种免疫介导的肝脏炎症性疾病，若不加以治疗，可能逐渐发展为肝硬化，最终导致肝功能衰竭。该病可以影响所有年龄段、种族和地理区域的人群，且在女性中尤为常见，尤其是在儿童和成人患者中，分别占60%-76%和71%-95%的比例。全球范围内，AIH的年发病率约为每10万人中有1.37例，而患病率则约为每10万人中有17.44例。近年来，AIH的发病率呈上升趋势，这进一步凸显了探索更安全、更有效的治疗策略的重要性。

在AIH的发病机制中，T细胞介导的免疫反应紊乱起着关键作用。调节性T细胞（Tregs）在患者体内数量和功能均受到损害，其增殖能力低于健康个体。在疾病初期，这些Tregs无法有效抑制CD8+ T细胞的增殖以及IL-4的分泌，这表明免疫系统失衡可能从早期就开始影响疾病进程。然而，在药物诱导的缓解期，Tregs的功能可以得到一定程度的恢复，这强调了免疫抑制治疗在重新建立Treg功能中的作用。此外，Tregs可以由CD4+CD25?效应性T细胞新生成，这为提高功能性Tregs提供了潜在的治疗策略。研究发现，AIH患者中Treg水平下降，而Th1和Th17细胞的数量和功能则增加，这表明免疫反应的失衡是AIH免疫病理学的一个显著特征。

目前，AIH的治疗主要依赖于糖皮质激素，随后使用非甾体免疫抑制剂进行长期维持治疗。根据美国肝病研究协会（AASLD）2019年的指南，一线治疗通常包括泼尼松（prednisolone）或布地奈德（budesonide），这些药物可以单独使用或联合使用硫唑嘌呤（azathioprine）进行治疗，后者是一种能够减少糖皮质激素使用量的免疫调节剂。然而，长期使用糖皮质激素可能会导致一系列严重的副作用，如骨质疏松、糖尿病、高血压以及感染风险的增加。此外，部分患者对标准的免疫抑制治疗方案反应不佳，或者在停药后频繁复发，这进一步说明了现有治疗策略的局限性。

因此，迫切需要寻找能够调节异常免疫反应而不引起过度免疫抑制的新治疗方案。近年来，越来越多的研究关注于利用植物来源的生物活性化合物作为免疫介导疾病的辅助或替代治疗策略，这反映了自然疗法在疾病治疗中的发展趋势。肽迷宁是一种从番红花属（Fritillaria）植物鳞茎中提取的天然甾体生物碱，已显示出在多种实验模型中的强大抗炎、抗氧化和免疫调节作用，包括肺纤维化和急性肺损伤等疾病。机制研究表明，肽迷宁能够抑制促炎性细胞因子的释放，减轻氧化应激，并通过调节关键的信号通路（如NF-κB、STAT和MAPK等）影响T细胞的分化。

考虑到AIH的发病过程中涉及氧化应激和T细胞失衡，研究团队提出了假设：肽迷宁的使用可能通过减轻氧化性肝损伤并恢复Th1/Th17/Treg的平衡来改善AIH。在本研究中，研究人员在小鼠模型中评估了肽迷宁的治疗效果，并将其与泼尼松进行了比较，后者是目前的标准治疗药物。

实验采用的是雄性C57BL/6小鼠，年龄为6-8周，体重在20-30克之间。这些小鼠由伊朗巴斯德研究所提供，实验过程中每个小鼠都被单独饲养于通风良好的笼子中，环境条件受到严格控制，包括温度（25±1℃）、湿度和12小时的昼夜循环。实验期间，小鼠可自由获取标准实验室饲料和饮用水。所有实验操作均经过巴吉亚塔拉赫大学医学院的伦理审查委员会批准，并遵循相关研究指南。

在实验设计中，研究人员通过Concanavalin A（ConA）诱导小鼠模型中的AIH。ConA是一种能够激活T细胞并引发免疫反应的植物凝集素，常用于建立实验性自身免疫性肝炎的模型。通过这一方法，研究人员成功诱导了小鼠的AIH，并随后评估了肽迷宁和泼尼松对疾病的影响。研究结果显示，未治疗的AIH对照组中，血清中的ALT、AST和ALP水平显著升高。泼尼松治疗能够显著降低这些酶的水平，与对照组相比，其效果具有统计学意义。同样，肽迷宁的两种剂量（A和B）也显示出对这些酶的显著降低作用，且效果在不同剂量之间有所差异。

此外，研究人员还评估了肽迷宁对肝脏组织病理学的影响。结果显示，肽迷宁能够显著减轻界面性肝炎（interface hepatitis），减少炎性细胞浸润，并改善肝小叶结构。定量组织学评分进一步确认了肽迷宁在较高剂量下对肝脏的保护作用，其效果与泼尼松相当。在分子层面，肽迷宁能够提高FOXP3的表达，同时抑制Tbx21和RORc的表达，这表明其可能有助于恢复Treg/Th1/Th17的平衡。这些结果与促炎性细胞因子表达的减少以及肝功能指标的改善相一致。

研究团队还讨论了肽迷宁在AIH治疗中的潜在机制。在AIH的发病过程中，T细胞的异常激活和失衡是导致肝损伤的重要因素。而肽迷宁的抗炎和免疫调节作用可能通过多种途径发挥作用，包括抑制促炎性细胞因子的释放、减轻氧化应激以及调节T细胞分化。这些作用可能共同促进肝脏的修复和功能恢复。此外，肽迷宁的抗氧化特性可能在减少肝脏损伤中发挥重要作用，这与AIH的病理特征密切相关。

研究的结论指出，肽迷宁表现出良好的免疫调节和抗氧化作用，可能有助于对抗AIH的关键病理过程。通过抑制促炎性Th1/Th17反应、增强Treg相关调节以及减少氧化应激，肽迷宁显示出调节多种肝损伤驱动因素的潜力。这为肽迷宁作为AIH的辅助或替代治疗方案提供了初步的证据。

然而，研究团队也指出了本研究的一些局限性。首先，本研究的随访时间相对较短，因此需要进一步的长期纵向实验来评估肽迷宁的治疗效果是否能够持续。其次，AIH的发病机制涉及多种T细胞亚群，包括不同的功能性和表型特征，因此需要更深入的研究来全面评估肽迷宁的作用。此外，尽管本研究在小鼠模型中验证了肽迷宁的治疗效果，但其在人体中的疗效仍需进一步的临床研究来验证。

本研究在报告标准方面遵循了相关规范，确保了研究结果的全面性和透明性。所有研究数据均经过严谨的记录和分析，以支持研究结论的可靠性。同时，研究团队声明他们没有已知的与本研究相关的竞争性利益，确保了研究的客观性和公正性。此外，研究得到了伊朗卫生与医学教育部的研究与技术副总监的支持，这为研究的顺利进行提供了必要的资源和条件。

综上所述，本研究通过实验验证了肽迷宁在治疗AIH中的潜在作用，为其作为新型治疗药物提供了初步的证据。尽管仍需进一步的临床研究来验证其在人体中的疗效，但肽迷宁的免疫调节和抗氧化特性使其成为一种值得探索的治疗候选药物。此外，本研究的结果也为其他自身免疫性疾病的治疗提供了新的思路，强调了天然化合物在免疫调节中的重要价值。未来的研究可以进一步探讨肽迷宁的作用机制，以及其在不同疾病模型中的应用潜力，从而推动其在临床实践中的转化。