Corin受miR-19b-1-5p的调控，从而抑制Ang II诱导的心房颤动

《Heart Rhythm》：Corin is regulated by miR-19b-1-5p to inhibit Ang II-induced atrial fibrillation

房颤（AF）的研究发现，Corin蛋白敲低会加剧Ang II诱导的电和结构重塑，导致心脏纤维化和AF进展，而miR-19b-1-5p负调控Corin表达，共同参与AF发生机制。

　　

赵一昌|龚月|冯振宇|李阳|李春凯|王倩倩|黄凤兰|苏彦晓|刘金秋|谢云鹏|陈菲菲

中国大连医科大学第一附属医院心内科

摘要

背景

心房颤动（AF）是全球最常见的心律失常，导致死亡率和发病率增加。临床试验表明Corin在AF中起重要作用，但其具体机制尚不清楚。

目的

本研究旨在通过探讨Corin蛋白和miR-19b-1-5p在AF发病机制中的作用，来研究其分子机制。

方法

本研究利用Ang II诱导的心房颤动小鼠模型，评估Corin和miR-19b-1-5p对心房重构的影响。采用分子分析、组织染色和基因表达谱分析等技术来评估Corin和miR-19b-1-5p在AF发展中的作用。

结果

研究显示，敲低Corin会加剧Ang II诱导的心房电重构和结构重构，从而导致心房纤维化和AF进展。敲低Corin后，Ang II诱导的心房电重构和结构重构更加严重，表现为心房体积增大、AF发生率升高、纤维化程度增加以及氧化应激水平升高。此外，miR-19b-1-5p被确定为Corin mRNA表达的负调控因子，在Ang II诱导的AF模型中影响心房重构。

结论

研究结果表明，miR-19b-1-5p和Corin为理解AF的分子机制提供了重要线索。针对这些分子可能为未来AF的治疗策略提供潜在方向。

引言

心房颤动（AF）是全球最常见的心律失常，导致死亡率和发病率增加。据估计，中国约有0.65%至0.74%的人口受到AF的影响。由于其复杂的分子机制，目前AF的治疗效果并不理想。遗传因素、心房组织的电重构、结构重构和神经重构、炎症以及纤维化等因素被认为在AF的发展中起作用。

心房钠尿肽（ANP）是一种心脏钠尿肽，具有多种生理作用，参与多种病理生理过程，包括高血压、心力衰竭和AF⁴。心肌细胞释放的内源性ANP作为旁分泌因子，可抑制胶原合成，从而可能减轻AF引起的心脏重构⁵。它在减少AF患者的心房体积/压力和缓解心肌应变方面起着关键的代偿作用⁶。ANP还通过缩短离体人房心肌细胞的动作电位持续时间来调节心脏电生理特性⁷，这是AF的一个特征性表现^8,9。

研究表明，生物活性ANP是由前心房钠尿肽（pro-ANP）通过Corin转化而来的，Corin是一种主要在心肌细胞中表达的II型跨膜丝氨酸蛋白酶^10,11。Corin在心肌纤维化过程中起着关键调节作用^12,13，并调节盐水平衡、血压和心脏功能¹⁴, ¹⁵, ¹⁶。最新研究表明，Corin可能在心血管疾病中发挥重要作用，包括心力衰竭、高血压、扩张型心肌病和冠心病¹⁷, ¹⁸, ¹⁹, ²⁰, ²¹。鉴于ANP在AF中的作用以及Corin作为ANP转化酶的身份，我们推测Corin可能与AF有关，并对其在心房重构中的作用进行了研究。研究发现，AF患者血浆中的Corin水平较高，血浆Corin水平与左心房直径或PR间期呈正相关²²。基线时血浆Corin水平升高与导管消融后AF复发率增加显著相关²³。Corin 3'非翻译区（3'UTR）中的rs3749585^T变异与AF显著负相关²⁴。然而，Corin与AF在体外和体内的关系以及调控Corin的上游分子仍不清楚。

微小RNA（miRNAs）是小型、内源性的非编码RNA分子，通常由约18-22个核苷酸组成。它们结合到信使RNA（mRNAs）的3'UTR上，通过抑制mRNA翻译或切割目标mRNA来介导转录后基因沉默²⁵。本研究发现miR-19b-1-5p可能调节Corin的mRNA水平。已有报道表明，外泌体中的miR-19b-1-5p在体外和体内均能抑制膀胱癌的恶性行为²⁶。miR-19b-1-5p可能是急性冠状动脉综合征患者阿司匹林耐药的合适标志物²⁷。然而，miR-19b-1-5p与Corin轴是否调节AF尚不清楚。在本研究中，我们将探讨Corin是否调节Ang II诱导的AF，miR-19b-1-5p是否调节Corin的表达，以及miR-19b-1-5p-Corin轴是否调节AF。

实验动物

从辽宁长盛生物技术有限公司购买了健康的野生型雄性C57BL/6J小鼠（6-8周龄）。小鼠生活在12小时光照/黑暗周期环境中，可自由进食（Sniff）和饮用自来水。每组小鼠（AAV9-shConA（shCorin对照组）、AAV9-shConB（shM-19b对照组））通过尾静脉注射100 μL浓度为10¹² vg/ml的腺相关病毒9型（AAV9）。

Corin敲低会加剧Ang II诱导的电重构

尾静脉注射AAV9-cTNT-shCorin两周后，继续注射Ang II三周。我们首先检测了小鼠各组织中Corin的敲低情况。qPCR结果显示，与对照组相比，心脏组织中的Corin显著下调，而肝脏、肾脏和肺组织中的Corin表达没有显著变化（图1A）。通过检测发现，Ang II和TAC心肌重构模型小鼠的血浆中存在Corin的分泌

讨论

心房纤维化是AF的重要机制²⁸。反应性间质纤维化会分离心肌束，而修复性纤维化则替代死亡的心肌细胞，从而干扰电传导的连续性并减慢传导速度。成纤维细胞可以与心肌细胞形成电耦合，当其数量增加时，会促进折返形成和/或异位电活动。AF本身也会促进心房解剖重构

伦理批准和参与同意

所有实验程序均符合美国国立卫生研究院关于实验动物护理和使用的指南，并得到了大连医科大学动物护理和使用委员会的批准。

发表同意

无。

数据和材料的可用性

与本研究相关的数据可向通讯作者提出合理请求后获得。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

资助

本研究得到了国家自然科学基金（项目编号81700301和82070380）、辽宁省教育厅科技项目（项目编号LZ2020058）、大连医学重点专科“攀峰计划”科研项目（项目编号2022DF016）、辽宁振兴人才计划（项目编号XLYC2203195）、辽宁省自然科学基金（项目编号2024-MS-160）以及基础研究项目的支持

作者贡献

赵一昌：数据管理、实验设计、数据分析、可视化、初稿撰写、正式分析。龚月：数据管理、实验设计、项目管理、可视化、初稿撰写。冯振宇：数据管理、实验设计、项目管理、可视化、初稿撰写、正式分析。李阳：数据管理、实验设计、项目管理、可视化。李春凯：数据管理、实验设计、项目管理、可视化。