《BMC Veterinary Research》:Isolation and characterization of Salmonella enterica serovars from poultry in Egypt: a comprehensive genetic analysis of ESBLs, MCR, integron and other resistance genes
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为破解禽源沙门氏菌(Salmonella enterica)耐药基因扩散难题,作者对埃及450份样品展开耐药表型-基因型联合分析,首次报道S. Jerusalem与S. Colorado等罕见血清型携带blaTEM、blaCTX-M、mcr-1及intI1的XDR菌株,警示其在“One Health”框架下的暴发潜能。
在埃及,家禽业年产140万吨鸡肉和130亿枚鸡蛋,却长期被沙门氏菌这一“隐形盗贼”困扰。该菌可潜伏于饲料、饮水与禽舍缝隙,令鸡群出现黄绿色稀粪、肝脾肿大,却常无症状带菌,最终随鸡肉走上餐桌,全球每年因此引发13亿人次感染。更棘手的是,农场为促生长或治病滥用抗菌药,把禽舍变成了耐药基因“演武场”——β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC、金属酶(MBLs)乃至“最后底牌”黏菌素(colistin)耐药基因mcr-1陆续登场。面对耐药率攀升却缺乏血清型与基因全景数据的尴尬,Mona Salem等人在《BMC Veterinary Research》发表研究,系统扫描埃及肉鸡源沙门氏菌的“身份—耐药—基因”三维图谱,为阻断人兽共患病原的扩散提供关键情报。
作者于2024年2–4月自曼苏拉等地收集450份临床健康、发病及刚死亡白羽与Sasso肉鸡(1–50日龄)的泄殖腔拭子、卵黄囊与肝等内脏,经BPW/RV增菌、XLD/MacConkey分离,结合革兰染色、生化与invA基因PCR,确诊29株沙门氏菌,总体分离率6.44%。随后采用Kauffmann–White血清玻片凝集、微量肉汤稀释(BMD)测定黏菌素MIC,并用CLSI 2024纸片扩散判定22种药物敏感性;最后以PCR与测序筛查ESBL、AmpC、MBL、mcr-1至mcr-9及Ⅰ类整合子intI1等基因,结合χ2与Spearman分析耐药基因共现规律。
结果
1. 流行率与分子鉴定
29株全部invA阳性,病禽分离率最高(8%),69%源于内脏,提示发病阶段菌载量高、易播散。
2. 血清型分布
鉴定出8种血清型,S. Kentucky(34.5%)与S. Derby(20.7%)占主导,且首次在埃及禽源报道S. Colorado(6.9%)与S. Jerusalem(3.5%),后者曾在欧洲有机豆粕相关疫情中出现,暗示进口饲料或祖代鸡群引入新谱系。
3. 耐药表型
所有菌株对头孢西丁、头孢吡肟、头孢他啶、萘啶酸、红霉素和磷霉素100%耐药;对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南的敏感率分别为37.9%、65.5%、96.6%。75.9%菌株呈广泛耐药(XDR),仅对1–2类药敏感;多重耐药指数(MAR)0.6–0.9,远超0.2的高风险阈值,表明农场抗菌药压力巨大。
4. 黏菌素耐药
BMD测得8株(27.6%)MIC >2 mg/L,均被判定耐药,提示“最后防线”已出现缺口。
5. 耐药基因谱
blaTEM检出率82.8%,blaOXA-10、blaSHV、blaCTX-M各约24–28%,blaCMY-2与blaOXA-2分别占10.3%与3.4%,未检到blaVEB-1及任何碳青霉烯酶基因;mcr-1阳性率10.3%,其余mcr亚型为零;Ⅰ类整合子intI1高达96.6%。基因共现分析显示blaCTX-M与mcr-1、blaCMY-2呈强相关(ρ≥0.60),提示其可能共存于可接合质粒,在β-内酰胺与黏菌素双重选择下加速固定。
6. 系统发育
invA、blaTEM、blaCTX-M、mcr-1与intI1序列与全球人源、猪源和禽源沙门氏菌参考株同源性100%,证实耐药基因跨国、跨宿主广泛传播。
结论与讨论
研究首次揭示埃及肉鸡同时藏匿罕见血清型与“全明星”耐药基因:S. Jerusalem携带blaTEM-blaSHV-blaCTX-M-mcr-1-intI1,S. Colorado亦呈XDR,且耐药表型与基因型分布不受血清型限制,表明水平转移比克隆扩散更关键。高频率intI1为多重耐药盒式捕获提供“分子脚手架”,而mcr-1与ESBL共定位意味着即便停用黏菌素,共选择仍可维持其流行。27.6%黏菌素耐药率与96.6%整合子阳性率均高于既往埃及报道,提示耐药态势仍在恶化。作者强调,若这些XDR菌株沿食物链侵入人群,将导致治疗选择受限、住院时间延长与死亡率上升,对儿童、老人及免疫低下者尤为危险。为此,必须立即启动国家层面“One Health”监测,对饲料、祖代鸡与零售肉进行全基因组追踪;在农场端推行处方制、休药期与生物安全清单,严禁把黏菌素、磷霉素等“人用底牌”当常规预防药;同时保留美罗培南等碳青霉烯类作为人类最后选项,并加快研发快速检测盒与疫苗,从源头阻断沙门氏菌的“埃及之路”。