原发性醛固酮增多症：突变型KCNJ5钾通道的小分子拮抗剂

《Hypertension》：Primary Aldosteronism: Small Molecule Antagonists of Mutant KCNJ5 Potassium Channels

研究KCNJ5基因突变引发醛固酮增多症，通过虚拟筛选发现化合物C81可特异性拮抗突变型钾通道，显著降低细胞内CYP11B2 mRNA水平和醛固酮分泌，对野生型无效。

　　

摘要

背景：

KCNJ5（钾内向整流通道亚家族J成员5）基因的突变会驱动某些产生醛固酮的腺瘤以及III型家族性高醛固酮血症中的醛固酮过度分泌。我们的目标是识别能够特异性拮抗突变型KCNJ5通道的小分子化合物。

方法：

通过对超过600万种小分子进行虚拟筛选，我们找到了可能与KCNJ5通道结合的化合物。在人类肾上腺皮质细胞（HAC15）中，评估了其中108种候选化合物的作用，这些细胞中可诱导表达野生型或突变型的KCNJ5。评估内容包括细胞存活率、流式细胞术、基因表达以及通过液相色谱-串联质谱法对肾上腺类固醇的定量分析。

结果：

通过评估这些化合物缓解由突变型KCNJ5过度表达引起的肾上腺细胞死亡的能力，我们找到了能够拮抗突变型KCNJ5功能的化合物。一种名为化合物81（C81）的螺吡喹啉类化合物在单层和球形HAC15细胞培养中均有效缓解了由KCNJ5 L168R引起的细胞死亡。与未处理细胞相比，C81处理使由KCNJ5 L168R、G151R或T158A表达诱导的CYP11B2（醛固酮合成酶）mRNA水平降低了69%至85%。C81还使表达KCNJ5 L168R的细胞中的醛固酮分泌减少了65%，并使18-氧皮质醇和18-羟基皮质醇的产量分别减少了78%和90%。然而，C81对表达野生型KCNJ5的细胞中的类固醇分泌没有显著影响。

结论：

C81作为一种小分子拮抗剂，显示出在针对III型家族性高醛固酮血症或KCNJ5突变型醛固酮生成腺瘤中的病理性醛固酮分泌方面的潜力。这些发现为基于基因型的原发性醛固酮血症诊断和靶向治疗提供了新的途径，有助于实现个性化患者护理。