用牙龈间充质干细胞条件培养基预处理的巨噬细胞移植作为促进实验性牙周炎大鼠牙周组织再生的潜在细胞疗法

《Cell Biology International》：Transplantation of Macrophages Pretreated With Gingival Mesenchymal Stem Cell Conditioned Medium as a Potential Cell Therapy for Promoting Periodontal Tissue Regeneration in Rats With Experimental Periodontitis

牙周炎由牙菌斑与多种危险因素相互作用引发牙周组织病理性流失，传统治疗方法控制炎症和促进组织再生效果不足。本研究通过移植经牙龈间充质干细胞 conditioned medium (GMSCs-CM) 预处理的巨噬细胞，探讨其在鼠类实验性牙周炎模型中控制炎症和促进组织再生中的作用。体外实验显示GMSCs-CM处理巨噬细胞显著上调Arg-1、CD206及IL-10 mRNA表达，下调TNF-α和IL-6表达。体内实验证实该处理组新形成的牙槽骨高度显著高于其他组，免疫组化显示CD163和iNOS表达上调，TNF-α和IL-6表达下调，但IL-10表达在未处理组最高。这些结果支持GMSCs-CM预处理巨噬细胞移植可能通过有效调控局部炎症促进牙周组织再生的假设。

　　

摘要

牙周炎是由牙菌斑与多种风险因素相互作用引起的，导致牙周组织发生病理性损伤。然而，传统的牙周炎治疗方法在控制炎症和促进牙周组织再生方面效果有限。本研究试图探讨通过将经牙龈间充质干细胞条件培养基（GMSCs-CM）预处理的巨噬细胞移植到患有实验性牙周炎的大鼠牙周缺损部位，是否能够有助于炎症控制及牙周组织再生。GMSCs-CM是从GMSCs的培养基中提取并浓缩得到的；Dulbecco's Modified Eagle Medium（DMEM）也被浓缩作为对照条件培养基（C-CM）。在体外实验中，THP-1来源的巨噬细胞分别用C-CM和GMSCs-CM进行处理。提取总RNA后进行实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）分析，以检测Arg-1、CD206、IL-10、TNF-α和IL-6的mRNA表达水平。在体内实验中，我们在患有实验性牙周炎的大鼠第一磨牙周围制造了40个牙周缺损部位，并分别给予四种处理方式：PBS、C-CM处理的巨噬细胞、未经处理的巨噬细胞以及GMSCs-CM处理的巨噬细胞。随后对样本进行石蜡切片处理，进行HE染色、改良Masson染色以及TNF-α、IL-6、IL-10、CD163和iNOS的免疫组化染色。研究结果表明：在体外实验中，GMSCs-CM处理的巨噬细胞中IL-10和CD206的mRNA表达显著上调，而TNF-α和IL-6的mRNA表达显著下调；在大鼠体内实验中，GMSCs-CM处理组的新生牙槽骨高度显著高于其他三组。此外，GMSCs-CM处理组的CD163和iNOS免疫组化表达显著增加，而IL-6和TNF-α的表达显著降低；不过IL-10在未经处理的巨噬细胞组中的表达最高。这些结果支持我们的假设：GMSCs-CM处理的巨噬细胞通过有效调控局部炎症，具有促进牙周组织再生的潜力。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突。

数据可用性声明

本研究中使用和/或分析的数据集已包含在本文中，或可根据合理请求向通讯作者获取。