黄酮类化合物与布洛芬前药联合递送的全面评估：提升抗炎和抗癌活性

《Journal of Drug Delivery Science and Technology》：Comprehensive Evaluation of Flavonoid Co-Delivery with an Ibuprofen Prodrug for Enhanced Anti-Inflammatory and Anticancer Activities

纳米药物靶向Siglec-1调控肿瘤免疫微环境，协同ATRA与DOX增强抗肿瘤免疫应答及直接杀伤肿瘤细胞。

　　这项研究聚焦于肿瘤免疫抑制微环境（TME）中的关键细胞——肿瘤相关巨噬细胞（TAMs），并提出了一种创新的联合治疗策略。TAMs在TME中占据主导地位，通过向M2促肿瘤表型的极化和随后的功能重编程，对免疫抑制起到重要作用。而当前的免疫治疗面临诸多挑战，特别是TAMs所介导的免疫逃逸和治疗抵抗问题，使得许多抗肿瘤药物难以发挥应有的疗效。因此，如何有效靶向并调控TAMs，成为提升肿瘤免疫治疗效果的关键。

研究人员开发了一种基于唾液酸（SA）修饰的纳米药物系统，包括ATRA-SN和DOX-SL。这些药物能够特异性地结合TAMs表面的Siglec-1受体，从而实现对TAMs的精准靶向。Siglec-1作为TAMs上的关键受体，不仅参与病原体识别，还在免疫逃逸中发挥重要作用。当TAMs异常激活Siglec-1时，会促进免疫抑制微环境的形成，进一步阻碍免疫治疗的效果。例如，高度唾液酸化的肿瘤细胞表面能够与Siglec-1结合，激活抑制性信号通路，使免疫细胞无法有效识别和攻击肿瘤细胞。此外，SA糖链-Siglec信号的失调还会导致TAMs向M2表型极化，抑制CD8+ T细胞的功能，从而增强免疫检查点抑制剂的耐药性。

为了克服传统化疗药物对TAMs的非特异性作用，研究人员采用了一种新的纳米药物设计方法。这种方法利用了ATRA和DOX的协同作用，同时结合唾液酸修饰技术，提高药物的靶向性和治疗效果。ATRA是一种重要的免疫调节剂，能够通过调控TAMs的功能，减轻其免疫抑制作用，并激活其他免疫细胞。而DOX作为一种经典的蒽环类化疗药物，具有强烈的细胞毒性和广泛的抗肿瘤活性。研究表明，ATRA和DOX的联合使用能够显著增强抗肿瘤效果，不仅提高肿瘤动物的化疗敏感性，还能有效抑制肿瘤生长、降低药物毒性，并延长实验动物的生存期。

在药物设计方面，研究人员采用了一种新型的磷脂复合纳米颗粒（PCNs）和DOX脂质体（DOX-SL）相结合的策略。通过将ATRA与蛋磷脂酰甘油（EPG）结合，构建了具有肿瘤靶向性的纳米药物载体，解决了ATRA水溶性差的问题。同时，将DOX包裹在脂质体中，使其能够在肿瘤微环境中实现有效的释放。这种药物系统不仅具有高度的特异性，还表现出良好的协同效应，能够显著改善肿瘤免疫抑制微环境，提升抗肿瘤免疫反应。

在实验研究中，研究人员发现，ATRA-SN能够有效减少TAMs在肿瘤部位的浸润，同时降低其对免疫系统的抑制作用。与单独使用ATRA相比，ATRA-SN在结合低剂量DOX（3 mg）的情况下，表现出更强的协同效应。这种协同效应通过Jin公式中的Q值进行评估，显示出显著的“疗效增强与毒性降低”的效果。治疗结果显示，ATRA-SN能够几乎完全清除肿瘤中的TAMs，显著提高CD8+ T细胞在肿瘤内的浸润和激活水平，并促使肿瘤细胞脱落。在治疗后的6个月内，未观察到肿瘤复发的迹象。

此外，ATRA-SN还增强了DOX-SL的免疫原性细胞死亡（ICD）效应，阻断了TAMs的招募，并建立了“免疫激活+直接杀伤”的双重机制。这种联合治疗方案不仅减轻了DOX-SL对免疫系统的损伤，还维持了胸腺功能，改善了生活质量，并通过持续激活CD8+ T细胞，有可能建立长期的抗肿瘤免疫反应。这为肿瘤治疗提供了一种全新的联合治疗策略。

在材料方面，研究使用了高纯度的ATRA（>98%）、细胞培养试剂（RPMI 1640培养基、胰蛋白酶、PBS缓冲液）、CCK-8检测试剂盒以及近红外染料DiD（1,1'-二十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰花青，4-氯苯磺酸盐）。此外，DOX盐酸盐（>99%纯度）来源于北京华峰联博科技有限公司。脂质成分包括氢化大豆磷脂（HSPC，≥90%）等，均用于构建纳米药物载体。

在药物表征方面，研究对ATRA PCNs和DOX-SL的粒径、多分散系数（PDI）、Zeta电位、细胞摄取率（CE）和药物释放率（LE）进行了详细分析。动态光散射（DLS）结果显示，ATRA-N和ATRA-SN的粒径分别为65.4 ± 3.1 nm和61.7 ± 3.8 nm，具有较窄的粒径分布。Zeta电位的负值表明这些纳米颗粒具有阴离子表面特性，有助于其在TME中的稳定性和靶向性。透射电子显微镜（TEM）图像进一步确认了ATRA负载的磷脂复合纳米颗粒呈球形结构，表明其形态良好。这些表征结果为后续的体外和体内实验提供了重要的基础。

在结论部分，研究强调了SA-CH作为基础材料在构建新型ATRA脂质复合纳米颗粒和DOX脂质体中的重要性。这些药物不仅能够有效靶向TAMs，还能够减轻化疗药物对免疫系统的损伤。通过与DOX脂质体的协同作用，联合治疗方案表现出强大的抗肿瘤效果。定量分析表明，这种治疗策略在提升抗肿瘤免疫反应和抑制肿瘤生长方面具有显著优势。同时，研究还指出，该联合治疗方案在改善生活质量、维持胸腺功能和建立长期抗肿瘤免疫反应方面也展现出良好前景。

总的来说，这项研究为肿瘤免疫治疗提供了一种创新的联合治疗策略。通过结合唾液酸修饰技术与ATRA和DOX的协同作用，研究人员成功构建了一种具有高度靶向性和治疗效果的纳米药物系统。该系统不仅能够有效清除TAMs，还能增强CD8+ T细胞的免疫反应，从而改善肿瘤免疫抑制微环境。这些研究成果为未来的肿瘤治疗提供了新的思路和方法，具有重要的临床应用前景。