高信噪比高频“跷跷板”悬臂梁突破高速原子力显微成像瓶颈

《Nature Communications》:A high signal-to-noise ratio and high-frequency seesaw cantilever for high-speed atomic force microscopy

【字体: 时间:2025年11月22日 来源:Nature Communications 15.7

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  为破解微型悬臂梁在高速原子力显微镜(HS-AFM)中“越做越小、信号越弱”的死结,作者以聚焦离子束(FIB)雕刻出“跷跷板”结构,将激光反射板与扭转铰链机械功能解耦,实现~3倍灵敏度提升与MHz级共振频率,首次在溶液中以5帧/秒解析膜联蛋白V(A5)三聚体旋转,为活体单分子动态观测提供新利器。

  
当原子力显微镜(AFM)的“探针”被越做越短、越做越薄以追逐更高成像速度时,它却陷入一个尴尬境地:悬臂梁(cantilever)缩小带来高共振频率,但反射激光的面积骤减,光杠杆信号弱、噪声高,最终拖慢反馈速度,使“高速”名存实亡。自2010年起,7 μm长、2 μm宽、80 nm厚的“极限”短梁再未被突破,微型化似乎撞上天花板。
为打破这一僵局,Linlin Li、Atsushi Miyagi与Simon Scheuring把目光转向儿童游乐场——跷跷板。他们设想:若让“板”只负责反射激光,而让“铰链”单独承担机械扭转,就能把两大功能解耦,各自优化。于是,一种全新的“跷跷板悬臂梁”(seesaw cantilever, SSC)诞生:一块刚性反射板通过两条纳米扭转铰链固定在基座,板面可以做大以保证光信号,铰链可以做得又细又长以降低刚度;板绕铰链做纯扭转摆动,而非传统梁的弯曲变形。
研究人员利用聚焦离子束(FIB)在大尺寸氮化硅梁上“雕刻”出倒置Π形沟槽,留下1 μm×1 μm到2 μm×0.2 μm不等的铰链,再于板端外延生长~2.5 μm高电子束沉积(EBD)针尖,制成一系列矩形、方形、窄矩形、椭圆、圆形板面的SSC原型。有限元分析(FEA)显示,第一阶振型为绕铰链的刚性摆动,共振频率公式f=(1/2π)√(K/M)中,刚度K仅由铰链尺寸决定,等效质量M≈(m+m)/3,理论值1–10 MHz。
实验在空气与缓冲液中采集热噪声功率谱(PSD),证实:铰链越窄、越薄、越长,频率越低;同一SSC在液体中频率约为空气的一半,Q值仅1.5–3,满足HS-AFM快速响应需求。力-距离曲线标定显示,10 μm×5 μm矩形SSC(SSC-R)灵敏度达~3倍于7 μm×2 μm商用超短梁(USC-F1.2-k0.15),5 μm×5 μm方形SSC(SSC-S)因角位移更大,灵敏度再提升;2 nm幅值下信噪比(SNR)全面优于商用梁。
作者选用最软SSC(SSC-R-L1-W02-T04,铰链1 μm×0.2 μm×0.4 μm,刚度~0.5 N/m)对三种生物样本进行HS-AFM成像:
  • 在支持脂质双层(SLB)上,1帧/秒即可分辨A5分子p6晶格,5帧/秒实时捕获晶格中心三聚体旋转;
  • 在天然紫膜上,清晰记录细菌视紫红质(bR)三聚体排列;
  • 在云母表面,DNA折纸三角形边长~120 nm轮廓分明。
结果首次证明,SSC可在溶液中以低力(<100 pN)、小振幅(<1 nm)实现亚分子级高速成像,而同等刚度传统梁因信号弱无法稳定反馈。
关键技术方法:聚焦离子束(FIB)微加工、电子束沉积(EBD)针尖生长、有限元分析(FEA)模态模拟、热噪声功率谱(PSD)标定、简单谐振子(SHO)刚度校准、高速原子力显微镜(HS-AFM)振幅调制成像。
研究结果
  • 概念与架构:SSC通过扭转铰链实现激光反射板与机械元件解耦,突破微型梁信号-力学权衡。
  • 弹簧常数:推导出K=8Gβa b/(L·L),铰链越细越长,梁越软。
  • 共振频率:理论-实验吻合,频率随铰链尺寸可调,1–10 MHz范围。
  • 实验评估:热噪声峰位、Q值、阻尼行为均符合预测,灵敏度提升~3倍。
  • 不同板面设计:窄矩形、椭圆、圆形板因质量-阻尼减小,频率再提高1.2–1.5倍。
  • HS-AFM成像:在溶液中以1–5帧/秒获得A5晶格缺陷、bR三聚体、DNA折纸高分辨动态图像。
结论与讨论:SSC架构把“光学反射”与“力学扭转”拆成两条独立设计维度,一举解决小型悬臂梁“信号弱-难加工”的死结;更高的角灵敏度使AFM可在更低力、更小振幅下稳定成像,为活体膜蛋白、DNA纳米结构等柔软样本的毫秒级动态观测铺平道路。未来通过批量FIB或微纳加工,可低成本制造系列化SSC,推动HS-AFM在神经突触、离子通道、药物-膜互作等生命科学前沿领域广泛应用。论文发表于《Nature Communications》。
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