基于液相色谱-质谱联用技术客观验证Alport综合征患儿血管紧张素转换酶抑制剂的高依从性研究

《Pediatric Nephrology》：High adherence to angiotensin-converting enzyme inhibitor in children and adolescents with Alport syndrome: objective verification using liquid chromatography-mass spectrometry

本研究针对Alport综合征(AS)患儿血管紧张素转换酶抑制剂(ACEi)服药依从性难以客观评估的问题，开发了液相色谱-质谱联用(LCMS)检测方法，通过对EARLY PRO-TECT Alport临床试验中58例患儿106份尿液样本的分析，发现ACEi依从率高达96%(首次)和95%(二次测量)，为儿童慢性肾脏病(CKD)药物治疗管理提供了重要循证依据。

　　

在儿童肾脏健康领域，肾衰竭(KF)始终是威胁患儿生命健康的重要挑战。Alport综合征(AS)作为儿童遗传性肾衰竭的主要病因，其病理机制源于IV型胶原缺陷导致的肾小球基底膜结构异常。这种遗传性肾病不仅引发持续性血尿和蛋白尿，更会逐步进展至终末期肾病，同时伴发进行性听力下降和眼部病变。尽管血管紧张素转换酶抑制剂(ACEi)已被证实能有效延缓AS患儿的肾功能恶化，但药物治疗效果很大程度上取决于患者的长期用药依从性。

传统依从性评估多依赖患者自述，存在明显主观偏差。特别是在儿科慢性肾脏病(CKD)领域，长期服药需求、疾病早期无症状特点以及复杂治疗方案都使依从性管理面临严峻挑战。为客观评估AS患儿的ACEi服药情况，研究团队开展了一项创新性研究，成果发表于《Pediatric Nephrology》。

研究团队建立了自动化液相色谱-质谱联用(LCMS)检测方法，对参与EARLY PRO-TECT Alport临床试验的58例AS患儿进行尿液样本分析。该队列平均年龄9.8±4.3岁，平均估算肾小球滤过率(eGFR)为130±32 mL/min/1.73 m²，81%为X连锁遗传模式。研究人员在入组后1.5年(V1)和3年(V2)两个时间点收集尿液样本，通过检测Ramipril及其活性代谢物Ramiprilat的浓度水平，客观验证近期服药情况。

研究方法关键技术

研究采用验证良好的LCMS方法，定量检测尿液中Ramipril和Ramiprilat浓度，定量下限(LLOQ)分别为1μg/L和10μg/L。样本来自EARLY PRO-TECT Alport临床试验队列，包含13例阴性对照（安慰剂组）。通过色谱分离和质谱检测，结合肌酐标准化处理，确保结果可靠性。

Demographics and clinical characteristics

研究纳入的58例患儿中，98%为男性，基线时34%处于AS 0期（尿白蛋白/肌酐比<30 mg/g），43%为AS I期（30-300 mg/g），22%为AS II期（>300 mg/g）。84%的患儿在首次依从性测量时已接受肾素-血管紧张素系统抑制剂(RASi)治疗，平均治疗时长36±29个月。88%的患儿有AS家族史，48%有肾衰竭家族史，这些因素可能影响治疗依从性。

Adherence measurement

106份尿液样本分析显示，在浓度高于定量下限的样本中，Ramipril平均浓度为46.1±63.1μg/L，Ramiprilat为609.9±623.6μg/L。首次测量时，49例接受ACEi治疗的患儿中，47例(96%)确认近期服药；二次测量时，44例中42例(95%)显示依从。所有13份阴性对照样本均被正确识别，验证了检测方法的可靠性。

进一步分析发现，有疾病进展的患儿依从率为90%(18/20)，无进展组为100%(29/29)。有肾衰竭家族史的患儿依从率为91%(21/23)，无家族史组为100%(26/26)。41例有两次测量数据的患儿中，95.1%显示一致的依从性分类。

研究结论与意义

本研究首次通过客观检测方法证实AS患儿在临床试验环境下对ACEi治疗具有极高依从性(95%-96%)，显著高于既往文献报告的儿童慢性肾脏病自述依从率(74%-96%)。这一发现可能归因于每日一次给药方案的简便性、家族史带来的疾病认知以及临床试验提供的全面教育支持。

研究建立的LCMS检测方法为临床提供了客观验证服药依从性的可靠工具，特别适用于治疗效果不佳时的依从性评估。尽管该方法成本较高，但在关键临床决策场景中具有重要应用价值。

值得注意的是，即使在最大耐受剂量(6 mg/m²)下，EARLY PRO-TECT Alport试验中未观察到ACEi对血压的显著降低作用。结合本研究证实的高依从性，提示Ramipril的肾脏保护作用可能部分独立于降压机制，为理解ACEi的作用机制提供了新视角。

研究局限性包括样本主要来自男性患儿、缺乏给药时间信息以及临床试验环境与常规临床实践的差异。然而，这一高质量证据为将儿童纳入临床试验提供了有力支持，推动儿科肾脏病治疗证据的发展。

本研究通过创新性的客观检测方法，证实了AS患儿在严格临床试验环境下对ACEi治疗的高度依从性，为优化儿童慢性肾脏病管理策略提供了重要科学依据。