祛瘀生新方通过重塑胆汁酸介导的巨噬细胞极化治疗溃疡ative colitis的作用机制研究

《BMC Complementary Medicine and Therapies》：QuYuShengXin formula reshapes bile-acid-mediated macrophage polarization in the treatment of ulcerative colitis

本研究针对溃疡性结肠炎(UC)临床治疗瓶颈，探讨了祛瘀生新方(QYSX)通过调控胆汁酸(BA)代谢重编程巨噬细胞极化的新机制。研究发现QYSX能显著恢复DSS诱导的UC小鼠粪便中石胆酸(LCA)和脱氧胆酸(DCA)水平，通过激活TGR5受体抑制NF-κB信号通路，进而纠正M1/M2巨噬细胞失衡，为中药复方治疗炎症性肠病提供了创新性科学依据。

　　

在全球范围内，溃疡性结肠炎(UC)的发病率呈现持续上升趋势，特别是在新兴工业化国家，这种慢性炎症性肠病给医疗系统和患者生活质量带来日益加重的负担。当前主流治疗方案如美沙拉嗪、糖皮质激素和生物制剂等，虽然能够在一定程度上控制症状，但存在胃肠道刺激、免疫抑制、药物不耐受和治疗费用高昂等局限性。面对这些挑战，传统中药(TCM)以其多成分、多靶点的治疗特点，为UC患者提供了新的治疗选择。

在这背景下，祛瘀生新方(QYSX)作为一种中药复方，在临床实践中显示出对轻中度UC患者腹泻、脓血便、腹痛和里急后重等症状的改善作用。前期研究表明，QYSX能够重新配置粪便胆汁酸(BA)谱并恢复M2/M1巨噬细胞平衡，然而它们之间的相互作用机制尚不明确。因此，研究人员在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型中，深入探索了QYSX调节BA代谢和巨噬细胞极化的具体作用机制。

研究人员采用了一系列关键技术方法开展本研究：通过DSS诱导建立小鼠UC模型评估QYSX疗效；利用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术定量分析39种粪便BA；采用流式细胞术检测腹腔巨噬细胞M1(CD11b⁺F4/80⁺CD86⁺)和M2(CD11b⁺F4/80⁺CD206⁺)表型；通过蛋白质印迹(Western blot)和实时定量PCR(qPCR)检测TGR5、NF-κB p65及炎症因子表达；使用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TNF-α和LPS水平；并开展组织病理学分析评估结肠损伤程度。

3.1 QYSX显著缓解DSS诱导的UC小鼠症状

研究显示，与对照组相比，模型组小鼠出现体重下降、精神萎靡、食欲减退、毛色暗淡以及稀便、脓血便等症状，疾病活动指数(DAI)评分显著升高。而QYSX和美沙拉嗪治疗均能显著增加小鼠体重，改善精神状态，减少肠道异常，降低DAI评分。

3.3 QYSX改善DSS诱导的UC小鼠结肠病理

组织学分析表明，模型组结肠组织出现严重的病理改变，包括结肠黏膜坏死脱落、溃疡延伸至肌层，黏膜下层弥漫性炎性细胞广泛浸润，杯状细胞明显变形。QYSX和美沙拉嗪均能有效减轻结肠组织损伤，减少炎性细胞浸润，降低病理评分。AB-PAS染色进一步显示，QYSX能显著缓解DSS引起的小鼠黏膜厚度和杯状细胞数量减少。

结肠长度比较发现，模型组结肠长度显著缩短(P<0.01)，而QYSX和美沙拉嗪治疗能显著增加结肠长度(P<0.01)。

3.4 QYSX平衡炎症因子和TGR5水平

ELISA结果显示，DSS诱导的模型小鼠血清TNF-α和LPS水平显著升高(P<0.01)，QYSX和美沙拉嗪能显著下调这些因子的表达水平。Western blot和qPCR分析表明，模型组结肠中IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65的表达显著上调(P<0.05或P<0.01)，而TGR5表达显著下调(P<0.01)。QYSX治疗能有效降低促炎因子表达，同时上调TGR5表达。

3.5 QYSX逆转粪便BA结构和浓度

BA代谢分析显示，模型组中去氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA)等次级胆汁酸浓度显著降低，而QYSX能逆转这些变化，显著提高LCA和DCA浓度。美沙拉嗪对这些BA浓度无显著影响。

3.6 QYSX平衡巨噬细胞极化

流式细胞术分析表明，模型组小鼠腹腔巨噬细胞中M1型巨噬细胞表达显著上调(P<0.01)，QYSX和美沙拉嗪均能显著降低M1型巨噬细胞比例(P<0.05)。各组间M2型巨噬细胞表达无显著差异，但QYSX能显著提高M2/M1巨噬细胞比率。

本研究通过多维度实验证实，QYSX通过恢复生理性粪便BA谱，特别是提升LCA和DCA水平，激活TGR5受体，进而抑制NF-κB信号通路，降低LPS和TNF-α水平，最终抑制M1型巨噬细胞的过度活化，恢复M2/M1平衡。这一机制阐释了QYSX治疗UC的多靶点作用特点，为中药复方在调节肠道免疫稳态方面的应用提供了科学依据，也为UC的治疗策略开发了新的思路。

研究的局限性在于未设置不同剂量组来考察量效关系，未来研究将纳入多剂量组以优化治疗方案。总体而言，该研究不仅揭示了QYSX治疗UC的新机制，也为胆汁酸-免疫互作网络在炎症性肠病中的作用提供了新的见解，对推动中药现代化和国际化具有重要意义。