儿童呼吸道病原体检测新突破：唾液样本替代鼻咽拭子的诊断准确性研究

《Journal of the Pediatric Infectious Diseases Society》：Detection of Respiratory Pathogens in Saliva and Mouthwash Samples in Children

本研究针对儿童呼吸道感染诊断中鼻咽拭子(NPS)采样侵入性强的问题，开展了唾液与漱口水样本对比NPS的多重PCR检测研究。结果显示唾液样本对流感病毒(86-88%)和肺炎支原体(93%)检测灵敏度高，且99%儿童更倾向无创采样方式，为儿童呼吸道病原体检测提供了更友好的替代方案。

　　

当孩子出现发烧咳嗽症状时，前往医院急诊室往往意味着要经历令人不适的鼻咽拭子采样过程。这种传统的呼吸道病原体检测方式虽然准确，但其侵入性特点常导致儿童哭闹抗拒，给临床工作带来挑战。寻找一种既准确又友好的替代采样方法，成为儿科呼吸道感染诊疗领域亟待解决的问题。

在《Journal of the Pediatric Infectious Diseases Society》最新发表的一项研究中，由Ville Lindholm和Terhi Ruuska-Loewald领衔的研究团队开展了一项创新性探索。他们比较了唾液和漱口水样本与常规鼻咽拭子在检测儿童呼吸道病原体方面的表现，旨在为儿童呼吸道感染诊断提供更为人性化的解决方案。

呼吸道感染是儿童最常见的就医原因之一，快速准确地识别病原体对合理使用抗生素和抗病毒药物至关重要。多重PCR(聚合酶链反应)技术的出现使同时检测多种病原体成为可能，特别是在流感病毒、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)和百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)等有针对性治疗方案的病原体检测方面具有重要临床价值。然而，鼻咽拭子采样的不适感限制了其在儿童中的广泛应用。

疫情期间，唾液样本成功用于SARS-CoV-2检测的经验启发了研究人员：能否将这种无创方法扩展到更多呼吸道病原体的检测中？尽管此前有小规模研究尝试回答这一问题，但样本量有限且结果不一致。因此，芬兰奥卢大学医院的研究团队设计了这项前瞻性诊断研究，纳入了302名2-16岁的急性呼吸道感染患儿，系统性比较三种采样方式的优劣。

研究采用的关键技术方法包括：前瞻性诊断研究设计，招募302名2-16岁急性呼吸道感染患儿形成样本队列；并行采集鼻咽拭子(NPS)、唾液(使用PAXgene唾液收集器)和漱口水(0.9%生理盐水)三种样本；使用QIAstat-Dx Respiratory SARS-CoV-2 Panel多重PCR面板同时检测19种病毒/亚型和4种细菌；采用视觉模拟评分(VAS)评估采样便利性和患儿偏好。

研究人群与样本特征显示，302名参与者(平均年龄9.7岁，50%为男性)中，40%有基础疾病，54%接受了抗菌治疗，49%需要住院。共获取850份样本，其中89%的参与者同时拥有NPS和唾液检测结果，82%的参与者三种样本结果齐全。

病原体检出情况方面，73%的参与者至少检出一种呼吸道病原体，其中单一感染占多数(181例)，共感染(2-4种病原体)占12%。鼻咽拭子中最常见的病原体为 rhinovirus/enterovirus(29%)、肺炎支原体(15%)和流感病毒(11%)。值得注意的是，肺炎支原体在唾液(22%)和漱口水(20%)中的检出率甚至高于NPS(15%)。

唾液样本诊断准确性分析显示，对肺炎支原体的灵敏度达93%(95% CI, 82-99%)，特异性为92%；对流感A型和B型病毒的灵敏度分别为86%和88%。对rhinovirus/enterovirus的灵敏度为71%，呼吸道合胞病毒为83%。

漱口水样本诊断准确性方面，对肺炎支原体的灵敏度为90%，但对大多数病毒的灵敏度较低(rhinovirus/enterovirus仅为48%)，表明其总体性能不及唾液样本。

CT(Cycle Threshold)值比较发现，大多数病毒病原体在NPS样本中的CT值较低(提示病原体载量较高)，而肺炎支原体在唾液样本中的CT值显著低于NPS样本(P=0.049)，这为唾液样本对该病原体的高灵敏度提供了生物学解释。

采样便利性与患儿偏好结果显示，漱口水采样最快(中位时间0.3分钟)，但唾液样本最受儿童欢迎：59%的参与者选择唾液作为首选采样方式，40%选择漱口水，仅1.2%偏好NPS。视觉模拟评分(VAS)证实唾液采样被儿童认为是最便利的方法。

研究结论与讨论部分强调，唾液样本对具有靶向治疗意义的病原体(如流感病毒和肺炎支原体)表现出高灵敏度，且深受儿童欢迎，可作为NPS的可靠替代品。本研究是首个充分证明唾液样本对肺炎支原体检测具有高灵敏度的研究，这与口咽部可能是该病原体主要富集部位的理论相符。尽管唾液采样时间(中位5分钟)长于NPS，但87%的儿童能在10分钟内完成采样，临床可行性良好。

研究的局限性包括结果仅适用于能配合提供唾液样本的儿童，且未评估最小有效唾液量。此外，以NPS作为金标准可能低估某些病原体(如肺炎支原体)的真实灵敏度。

这项研究为儿童呼吸道感染诊断提供了重要实践指导：在流感病毒和肺炎支原体检测方面，唾液样本这一无创方法可替代传统鼻咽拭子，显著提升儿童就医体验，同时保证诊断准确性。未来研究方向可探索优化唾液采样流程，并验证其在更年幼儿童中的适用性。