系统性硬化症患者皮肤和皮下脂肪组织中的免疫细胞组成

《JDDG: Journal der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft》：Immune cells composition in the skin and subcutaneous adipose tissue of patients with systemic sclerosis

系统性硬化症（SSc）患者皮肤和皮下脂肪免疫细胞组成及与临床特征关联性研究。采用光谱流式细胞术分析SSc患者及健康对照者外周血、皮损及非皮损皮肤和皮下脂肪免疫细胞亚群。结果显示：低mRSS患者皮肤中cDC1、moDC和ThGM-CSF细胞增多，皮下脂肪Th22细胞减少，NK细胞减少；肺纤维化患者外周血CD8+ T细胞增多，NK细胞减少；抗Scl-70阳性患者皮肤CD8+效应T细胞增多，抗CENP阳性患者皮肤ThGM-CSF细胞增多。研究揭示了不同临床阶段及抗体亚型下免疫微环境的异质性。

　　系统性硬化症（Systemic Sclerosis，SSc）是一种罕见的、慢性进行性的自身免疫性疾病，其特征是皮肤和/或内部器官的纤维化。该疾病主要表现为皮肤变厚、硬化，以及可能影响肺部、胃肠道等器官的进行性损伤。SSc可分为两种主要亚型：局限性皮肤系统性硬化症（limited cutaneous SSc，lcSSc）和弥漫性皮肤系统性硬化症（diffuse cutaneous SSc，dcSSc）。尽管这两种亚型在病理机制上存在共性，但dcSSc通常表现出更严重的疾病进展和更高的内脏器官受累风险，尤其是肺部纤维化。因此，深入了解SSc中免疫细胞的组成及其在不同组织中的变化，对于揭示疾病机制和寻找潜在治疗靶点具有重要意义。

本研究旨在通过同时分析血液、皮肤和皮下脂肪组织中的免疫细胞组成，全面探讨SSc患者的免疫细胞变化及其与临床表现之间的关系。近年来的研究表明，皮下脂肪组织在系统性炎症和纤维化过程中可能发挥关键作用，但针对皮肤和脂肪组织中免疫细胞的详细分析仍然有限。因此，这项研究不仅关注血液中的免疫细胞变化，还深入探讨了皮肤和脂肪组织中的免疫细胞组成，以期更全面地理解SSc的免疫机制。

在研究方法上，采用了谱流式细胞术（spectral flow cytometry）对主要免疫细胞亚群进行分析。该技术能够提供高分辨率的免疫细胞表型数据，有助于识别不同组织中免疫细胞的细微变化。通过这一方法，研究团队能够系统性地比较SSc患者与健康对照组在不同组织中的免疫细胞组成差异，并进一步探讨这些差异如何与疾病进展、皮肤纤维化程度以及肺部受累情况相关联。研究假设，免疫细胞的异常分布和功能可能在SSc的皮肤纤维化中起关键作用，而更广泛的免疫变化则可能与疾病向肺部等内脏器官的进展相关。

在患者队列方面，研究纳入了13名SSc患者和13名健康对照者。SSc患者的中位年龄为59岁（范围48-79岁），其中9名为女性。患者根据皮肤纤维化程度（通过改良的Rodnan皮肤评分，mRSS）分为轻度和重度组，分别对应较低和较高的mRSS值。此外，还对患者的临床表现进行了详细记录，包括皮肤钙化、数字溃疡、吞咽困难、肺部纤维化、肺动脉高压（PAH）等。研究结果显示，不同临床特征的患者在免疫细胞组成上表现出显著差异，例如肺部纤维化的患者在血液中表现出NK细胞减少和CD8+ T细胞增加，而皮肤纤维化程度较低的患者则在皮肤和皮下脂肪组织中表现出不同的免疫细胞变化。

在免疫细胞分析方面，研究团队发现SSc患者在皮肤和皮下脂肪组织中存在多种免疫细胞的异常变化。例如，轻度皮肤纤维化的患者在皮肤中显示出cDC1（常规型I型树突状细胞）和moDC（单核细胞来源的树突状细胞）的显著增加，这可能与Th1和Th17免疫反应的激活有关。同时，这些患者在皮下脂肪组织中表现出Th22细胞的减少，而Th22细胞在皮肤修复和抗炎过程中具有重要作用，其减少可能促进局部炎症和纤维化的发展。此外，研究还发现，在皮肤纤维化程度较低的患者中，NK细胞的终端亚群减少，这可能进一步加剧系统性炎症反应。

对于肺部受累的患者，研究结果显示，血液中的免疫细胞变化更为显著。肺部纤维化的患者表现出NK细胞的系统性减少，而CD8+效应T细胞则显著增加。这种变化表明，在SSc的晚期阶段，适应性免疫系统的激活可能成为驱动疾病进展的关键因素。同时，肺功能下降的患者（如FVC < 70%）在血液中也表现出T细胞数量的增加，特别是CD8+初始T细胞的增加和CD8+效应记忆T细胞的减少。这些变化可能反映了免疫系统在应对肺部纤维化时的动态调整。此外，研究还发现，肺功能下降的患者在皮肤中表现出CD8+中央记忆T细胞的减少，这可能进一步支持免疫细胞在不同组织间的相互作用对疾病进展的影响。

研究还探讨了SSc特异性自身抗体（如anti-Scl-70、CENP和anti-RNA聚合酶III）与免疫细胞组成之间的关系。例如，anti-Scl-70阳性的患者在皮肤中表现出CD8+效应T细胞的增加，这可能与更严重的皮肤和内脏纤维化相关。相反，CENP阳性的患者则表现出ThGM-CSF细胞的增加，而ThGM-CSF细胞通常与较轻的疾病表现相关，如lcSSc。这些结果表明，不同的自身抗体可能在不同程度上影响免疫细胞的组成，进而影响疾病的临床表现和进展速度。

本研究的发现不仅揭示了SSc患者在不同组织中的免疫细胞变化，还强调了这些变化与疾病进展之间的潜在联系。例如，轻度皮肤纤维化的患者表现出免疫细胞的局部募集和激活，这可能成为疾病发展的早期信号；而肺部受累的患者则表现出更广泛的免疫系统变化，这可能反映了疾病从局部到全身的演变过程。此外，研究还指出，某些免疫细胞（如NK细胞和Th22细胞）可能在抑制纤维化过程中发挥关键作用，它们的减少可能促进炎症和纤维化的发生。

尽管研究结果提供了重要的见解，但该研究仍存在一定的局限性。首先，样本量较小，这可能影响结果的普遍适用性。其次，患者与健康对照组在性别和年龄上的匹配度不足，这可能引入一定的偏倚。此外，研究未对单核细胞亚群进行详细分析，也未评估药物对免疫细胞组成的影响，这在一定程度上限制了结论的全面性。最后，由于研究设计的原因，无法提供绝对的细胞计数，仅能提供相对值，这也可能影响对细胞数量变化的准确解读。

综上所述，本研究通过系统性分析SSc患者在不同组织中的免疫细胞组成，揭示了免疫细胞在疾病进展和组织纤维化中的潜在作用。研究结果表明，不同的免疫细胞亚群可能在不同的疾病阶段和组织部位中发挥不同的功能，这为理解SSc的免疫机制提供了新的视角。未来的研究需要进一步扩大样本量，优化实验设计，并结合功能性和分子层面的分析，以更全面地揭示免疫细胞在SSc发病机制中的具体作用。此外，研究还强调了考虑自身抗体状态和免疫细胞组成对疾病进程的综合分析的重要性，这可能为个性化治疗策略的制定提供依据。