降低足细胞损伤相关的NFAT-uPAR信号通路，能够发挥当归-芍药-三棱组合（Danggui-Shaoyao-San）在改善肾病综合征患者蛋白尿方面的作用

《Journal of Ethnopharmacology》：Reducing the NFAT-uPAR signal of podocyte injury exerts the effect of Danggui-Shaoyao-San in improving proteinuria in nephrotic syndrome

中药复方Danggui-Shaoyao-San（DSS）通过调节NFAT-uPAR信号通路减轻足细胞损伤，改善肾病综合征蛋白尿。

　　Danggui-Shaoyao-San（DSS）是一种源自汉代经典医学著作《金匮要略》的中药方剂，被广泛用于促进血液循环和利尿。在现代医学中，DSS已被证实对改善肾功能、缓解蛋白尿以及治疗肾病综合征（NS）具有显著效果。本研究旨在探讨DSS在减轻NS中足细胞损伤和改善蛋白尿方面的具体机制，为DSS的临床应用提供理论支持和实验依据。

肾病综合征是一种由肾小球疾病引发的常见临床病症，其主要特征包括显著的蛋白尿、水肿、低白蛋白血症和高脂血症，通常被称为“三高一低”。这些症状构成了NS的病理基础，其发生率在老年人、年轻人以及孕妇中呈现上升趋势。根据相关研究，NS的病理机制与肾小球滤过屏障（GFB）的功能完整性密切相关，而足细胞的结构和功能异常是导致NS发生和进展的关键因素。足细胞作为GFB的重要组成部分，其损伤会导致滤过屏障的通透性异常，从而引发蛋白尿。因此，理解足细胞损伤的机制对于NS的治疗至关重要。

近年来，中药在肾脏疾病治疗中的潜力得到了广泛认可。DSS作为经典中药方剂，其应用范围不仅限于治疗“妊娠或月经期间腹痛、肝肾亏虚”等传统病症，还被进一步发展用于治疗“疏通血脉、消除肿块、化解痰湿”等现代疾病。现代临床研究发现，DSS在治疗NS方面具有良好的疗效，例如能够有效改善患者的水肿、疲劳、腰膝酸软等症状，其作用机制涉及健脾利尿、养血柔肝、调节体内环境以及增强免疫功能。此外，DSS还能通过降低与肾功能相关的指标和尿蛋白排泄，延缓NS的进展，同时调节脂代谢，降低动脉粥样硬化的风险，进一步保护肾脏。

为了系统评估DSS对足细胞的保护作用及其潜在的分子机制，本研究采用了一种由阿霉素（ADR）诱导的NS大鼠模型，以及足细胞损伤的体外模型。通过这些模型，我们观察到DSS能够显著减少24小时尿蛋白排泄，改善血清生化指标，减轻病理损伤，并有效修复足细胞结构的完整性。此外，DSS还能够恢复足细胞中关键蛋白如synaptopodin和nephrin的表达水平，抑制NFATc1的核转位，并降低uPAR和integrin αvβ3的表达，从而阻断足细胞损伤相关的信号通路。

在体外实验中，我们利用1μM的ADR诱导人肾小球足细胞（HGPCs）损伤，并通过DSS含有的血清进行干预。结果显示，DSS能够显著改善足细胞的损伤情况，恢复其正常功能。通过ELISA、Western blot和免疫荧光等方法，我们进一步检测了DSS在体内外对NFATc1、uPAR和integrin αvβ3等关键蛋白的表达和活性影响。研究发现，DSS对这些蛋白的调节作用与NFAT抑制剂11R-VIVIT类似，表明其可能通过抑制NFAT-uPAR信号通路来减轻NS中的蛋白尿。

在中药理论中，NS属于“水肿”范畴，其发病机制与肝肾两虚、血瘀密切相关。DSS通过其多种成分的协同作用，能够有效调节肝肾功能，促进血液循环，改善水肿。此外，DSS还能够调节体内环境，增强免疫功能，从而对NS的治疗起到综合效果。这些作用机制不仅与传统医学理论相吻合，也在现代科学实验中得到了验证。

在本研究中，我们采用了多种现代技术手段，包括网络药理学分析、分子对接验证、高效液相色谱（HPLC）和超高效液相色谱-四极杆-时间分辨飞行质谱（UPLC-Q/TOF-MS）用于DSS提取物的质量控制。通过这些技术，我们不仅能够识别DSS中的潜在活性成分，还能筛选出与NS相关的关键靶点，从而揭示DSS的作用机制。网络药理学分析显示，DSS含有34种潜在活性成分，这些成分能够靶向NS相关的重要蛋白，如NFATc1、uPAR和integrin αvβ3。分子对接研究进一步验证了这些成分与靶点之间的相互作用，为DSS的药理作用提供了分子层面的解释。

此外，我们还通过实验方法验证了DSS对足细胞损伤的保护作用。在体外模型中，我们使用ADR诱导足细胞损伤，并通过DSS含有的血清进行干预。结果显示，DSS能够显著改善足细胞的损伤情况，恢复其正常功能。通过Western blot和免疫荧光等方法，我们进一步检测了DSS对足细胞中关键蛋白的表达和活性影响，发现其能够有效恢复synaptopodin和nephrin的表达水平，抑制NFATc1的核转位，并降低uPAR和integrin αvβ3的表达，从而阻断足细胞损伤相关的信号通路。这些结果表明，DSS可能通过调节NFAT-uPAR信号通路来减轻NS中的蛋白尿。

在临床应用中，DSS已被广泛用于治疗NS。例如，DSS能够有效改善患者的水肿、疲劳、腰膝酸软等症状，其作用机制涉及健脾利尿、养血柔肝、调节体内环境以及增强免疫功能。此外，DSS还能通过降低与肾功能相关的指标和尿蛋白排泄，延缓NS的进展，同时调节脂代谢，降低动脉粥样硬化的风险，进一步保护肾脏。这些临床效果不仅得到了传统医学的支持，也在现代科学实验中得到了验证。

综上所述，DSS作为一种经典中药方剂，其在治疗NS中的作用机制可能与调节NFAT-uPAR信号通路密切相关。通过抑制这一信号通路，DSS能够有效减轻足细胞损伤，改善蛋白尿，从而对NS的治疗起到积极作用。本研究的结果为DSS的临床应用提供了新的理论支持和实验依据，也为进一步研究中药在肾脏疾病治疗中的作用提供了参考。