不同温度与储存时间对犬红细胞渗透脆性影响的研究

《BMC Veterinary Research》：The effect on canine erythrocyte osmotic fragility under different temperature variations and storage times

本研究针对犬全血(Whole Blood, WB)在储存运输过程中温度波动导致红细胞(RBC)膜完整性受损的问题，通过红细胞渗透脆性(Erythrocyte Osmotic Fragility, EOF)测试，系统评估了CPDA-1抗凝剂保存下不同温度(1-35°C)和储存时间(0-35天)对犬红细胞质量的影响。结果表明：25°C以上高温会显著增加红细胞渗透脆性，而1-10°C范围内温度波动不影响红细胞稳定性。研究为犬血库标准化储存运输条件提供了重要实验依据。

　　

在兽医临床实践中，输血治疗已成为挽救危重动物生命的重要手段。然而，血液制品的质量保障始终是输血医学领域的核心挑战。特别是在血液储存和运输过程中，温度波动可能导致红细胞膜完整性受损，进而影响输血效果。目前，人医血库通常将1-6°C作为血液制品的标准储存温度，但对于犬全血在真实环境下的稳定性研究仍较为缺乏。

为此，国立屏东科技大学兽医学系的蔡宜伦、Davrald Webbe-Allen和李文山团队在《BMC Veterinary Research》上发表了一项深入研究，通过红细胞渗透脆性(Erythrocyte Osmatic Fragility, EOF)测试，系统评估了不同温度和储存时间对CPDA-1抗凝剂保存的犬全血质量的影响。

研究人员采用EOF这一经典实验方法，通过测定红细胞在不同浓度氯化钠溶液中的溶血程度，定量评估红细胞膜的机械强度。该研究设计了严谨的实验方案：从15只健康犬捐赠者采集250mL全血，使用CPDA-1抗凝剂保存，并将血液分装成15个片段，在4°C下储存35天。在储存期的第0、28和35天，分别将样本在1、4、10、25和35°C下孵育24小时后进行EOF分析。

关键技术方法包括：严格筛选健康犬献血者，确保血液质量；使用CPDA-1抗凝剂进行标准全血采集；建立多时间点(0/28/35天)和多温度(1/4/10/25/35°C)的储存实验体系；通过标准EOF测试测定平均细胞脆性(Mean Corpuscular Fragility, MCF)；采用统计学方法分析温度和时间对红细胞脆性的影响。

温度相关差异的MCF

研究发现，在储存初期(第0天)，35°C高温孵育已使EOF曲线右移，表明红细胞脆性增加。到第28天时，1-10°C储存的样本显示出增强的渗透抵抗力，而25°C和35°C条件下则出现显著脆性增加。特别值得注意的是，第35天时，25°C和35°C条件下的MCF值显著高于其他温度组，表明长期储存后红细胞对高温更为敏感。

时间相关差异的MCF

在1-10°C的理想储存条件下，红细胞在35天储存期内保持稳定的渗透抵抗力，MCF值无显著变化。然而，在25°C和35°C条件下，随着储存时间延长，红细胞脆性逐渐增加，特别是在第28天后变化更为明显。

不同储存时间和温度条件下的MCF比较

双因素方差分析显示，储存35天并在35°C孵育的样本MCF值显著高于其他所有实验条件，表明时间和温度的叠加效应对红细胞质量产生最严重影响。

讨论部分指出，温度是影响红细胞质量的关键因素。高温会加速红细胞代谢过程，导致营养物质快速消耗和代谢废物积累，进而影响细胞膜完整性。研究结果支持当前血库标准，即1-10°C是维持红细胞稳定性的理想温度范围。同时，研究证实CPDA-1抗凝剂保存的犬全血35天储存期是合理的，但需严格避免高温暴露。

该研究的重要意义在于为兽医输血医学提供了实验依据，明确了犬全血在储存和运输过程中的温度敏感性。研究发现，短暂暴露于10-25°C环境不会显著影响红细胞质量，但超过28天的储存血液应避免25°C以上高温。这些结论对制定犬血库管理规范、优化血液运输条件具有重要指导价值，有助于提高兽医临床输血治疗的安全性和有效性。