外泌体介导的硼替佐米在多发性骨髓瘤细胞中的细胞毒性调节：酮替芬治疗对氧化还原平衡和细胞周期停滞的影响

《Medical Oncology》：Exosome-mediated modulation of bortezomib cytotoxicity in multiple myeloma cells: involvement of redox balance and cell cycle arrest through ketotifen treatment

Ketotifen通过抑制外泌体生成和调节氧化应激及细胞周期增强硼替佐米疗效，为克服多发性骨髓瘤药物抵抗提供新策略。

　　

摘要

多发性骨髓瘤（MM）是一种以恶性浆细胞不受控制地增殖为特征的难治性恶性肿瘤，其耐药性日益严重，甚至对博来霉素（Bortezomib）等蛋白酶体抑制剂也产生抗性。最新研究表明，肿瘤来源的外泌体在介导多发性骨髓瘤的耐药性、免疫逃逸和应激适应中起着重要作用。通过抑制外泌体的分泌，可能增强博来霉素的细胞毒性作用，因为这会削弱细胞的应激反应。研究人员使用RPMI 8226细胞进行了实验，分别单独使用博来霉素、酮替芬（Ketotifen）或两者联合使用。细胞存活率通过MTT实验进行评估；利用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯和碘化丙啶染色技术，通过流式细胞术分析了细胞内的活性氧物种及细胞周期进展。外泌体通过动态光散射和流式细胞术进行分离和鉴定；总外泌体蛋白含量通过BCA测定法进行定量。ALIX和MUNC13-4基因的表达水平通过定量逆转录聚合酶链反应（quantitative reverse transcriptase PCR）进行检测。实验结果显示，1 μM浓度的酮替芬具有最低的毒性，并且与博来霉素联合使用可提高细胞存活率；酮替芬显著降低了ALIX的表达和总外泌体蛋白含量，同时不影响MUNC13-4的表达。它还减轻了博来霉素诱导的活性氧积累并改变了细胞周期动态。博来霉素处理后的细胞产生的外泌体比联合治疗组的外泌体更具细胞毒性，而联合治疗的上清液则导致了更严重的细胞死亡。酮替芬能够抑制多发性骨髓瘤细胞中外泌体的生成，并调节其氧化应激和细胞周期反应，从而可能增强博来霉素的疗效。这些发现为进一步研究酮替芬作为调节多发性骨髓瘤中外泌体介导的耐药性的辅助策略提供了依据。

多发性骨髓瘤（MM）是一种以恶性浆细胞不受控制地增殖为特征的难治性恶性肿瘤，其耐药性日益严重，即使是对博来霉素等蛋白酶体抑制剂也产生抗性。最新研究表明，肿瘤来源的外泌体在介导多发性骨髓瘤的耐药性、免疫逃逸和应激适应中起着重要作用。通过抑制外泌体的分泌，可能增强博来霉素的细胞毒性作用，因为这会削弱细胞的应激反应。研究人员使用RPMI 8226细胞进行了实验，分别单独使用博来霉素、酮替芬或两者联合使用。细胞存活率通过MTT实验进行评估；利用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯和碘化丙啶染色技术，通过流式细胞术分析了细胞内的活性氧物种及细胞周期进展。外泌体通过动态光散射和流式细胞术进行分离和鉴定；总外泌体蛋白含量通过BCA测定法进行定量。ALIX和MUNC13-4基因的表达水平通过定量逆转录聚合酶链反应（quantitative reverse transcriptase PCR）进行检测。实验结果显示，1 μM浓度的酮替芬具有最低的毒性，并且与博来霉素联合使用可提高细胞存活率；酮替芬显著降低了ALIX的表达和总外泌体蛋白含量，同时不影响MUNC13-4的表达。它还减轻了博来霉素诱导的活性氧积累并改变了细胞周期动态。博来霉素处理后的细胞产生的外泌体比联合治疗组的外泌体更具细胞毒性，而联合治疗的上清液则导致了更严重的细胞死亡。酮替芬能够抑制多发性骨髓瘤细胞中外泌体的生成，并调节其氧化应激和细胞周期反应，从而可能增强博来霉素的疗效。这些发现为进一步研究酮替芬作为调节多发性骨髓瘤中外泌体介导的耐药性的辅助策略提供了依据。