《Analytica Chimica Acta》：Recombinase-Aided Amplification Technology: A Comprehensive Review of Innovations and Multi-Technology Integration for Rapid Infectious Disease Diagnosis
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重组酶辅助扩增（RAA）技术是一种新型等温核酸扩增技术，具有快速、灵敏、无需复杂仪器等优势，在传染病检测中展现出广阔应用前景，但仍面临引物设计宽容度低、样本基质干扰及标准化框架缺失等问题。
谢梦茹|马静辉|周晓星|魏艳|赵一莲|叶超|刘新初|青吉林|陈志忠
广西医科大学第一附属医院临床实验室，广西壮族自治区教育厅临床实验室医学重点实验室，中国广西南宁
摘要：
重组酶辅助扩增（RAA）作为一种新兴的等温核酸扩增技术，由于其快速、高效且对复杂仪器依赖性低的优点，在传染病诊断中展现出巨大潜力。随着全球范围内传染病疫情的频繁发生，对快速、准确诊断技术的需求日益增加。RAA凭借其独特的扩增机制和应用灵活性，吸引了越来越多的研究关注。与其他扩增技术相比，RAA具有更短的反应时间和更高的灵敏度，能够检测包括病毒、细菌、真菌和寄生虫在内的多种病原体。此外，将RAA与CRISPR和微流控等技术结合，为即时检测（POCT）提供了创新策略。然而，目前RAA的实际应用仍面临一些瓶颈，如引物设计容忍度低、样品基质干扰导致的非特异性扩增以及缺乏标准化框架。本文旨在总结RAA技术的基本原理、其在传染病诊断中的当前应用、与互补方法的协同创新以及未来发展方向，从而为快速诊断技术的优化和进步提供理论依据。
部分摘录
RAA的机制：重组酶-引物复合物驱动的等温核酸扩增
重组酶辅助扩增（RAA）是一种下一代快速核酸检测技术，其核心机制依赖于重组酶-引物复合物、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶之间的协同作用[18]。该技术通过三步酶促级联反应实现核酸的指数级扩增：首先，重组酶蛋白（如细菌RecA或工程改造的UvsX）与特定引物结合RAA与其他扩增技术的比较分析
核酸扩增技术（NAATs）是分子诊断的基础。定量实时PCR（qPCR）长期以来被视为金标准，具有出色的灵敏度、特异性和定量准确性[20], [21], [22], [23], [24], [25], [26], [27], [28], [29]。然而，qPCR耗时较长且需要热循环仪和受过培训的人员，这些因素限制了其在快速检测或现场应用中的可行性。相比之下，重组酶辅助扩增病毒性传染病
由于传播速度快和突变潜力高，病毒性传染病继续对全球公共卫生系统构成严峻挑战。在疫情早期阶段和资源有限的情况下，及时识别病原体和进行精准诊断对于有效控制疫情至关重要。在这种情况下，重组酶辅助扩增（RAA）作为一种变革性的诊断工具应运而生，提供了高效的现场可部署解决方案。在
高通量病原体筛查：RAA-悬浮微阵列多重检测系统的开发
将悬浮微阵列技术（Luminex xMAP）与重组酶辅助扩增（RAA）相结合，建立了一种新型的高通量病原体检测方法。该系统使用荧光编码的微球（100种不同的颜色代码），这些微球与特定探针结合，能够在单个反应孔内实现多重检测。对于猴痘病毒（MPXV）的检测，RAA-悬浮阵列平台利用生物素标记的引物与荧光磁珠结合RAA技术的现状与未来展望
重组酶辅助扩增（RAA）技术通过用等温机制替代依赖热循环的PCR，彻底改变了即时核酸检测的方式，在三个维度上体现了其核心价值：技术卓越性（单拷贝灵敏度和15–30分钟的反应时间）、在COVID-19和非洲猪瘟疫情中验证的现场适用性，以及通过与结论
重组酶辅助扩增（RAA）技术凭借其等温扩增能力、15–30分钟内的快速检测时间和单拷贝水平灵敏度，正在革新分子诊断领域。其较低的 operating 温度（37–42 °C）和对复杂仪器的最小依赖性，使得RAA可以灵活应用于非中心实验室环境，特别适合即时检测（POCT）。迄今为止，RAA已广泛应用于病毒检测CRediT作者贡献声明
马静辉：撰写——审稿与编辑，研究调查。谢梦茹：撰写——初稿。周晓星：撰写——审稿与编辑，数据整理。陈志忠：撰写——审稿与编辑，初稿撰写。青吉林：撰写——审稿与编辑，监督。赵一莲：撰写——审稿与编辑，数据分析。魏艳：撰写——审稿与编辑，软件处理。刘新初：撰写——审稿与编辑，数据分析。叶超：撰写——审稿与编辑，数据分析资金声明
作者声明本研究、作者身份及/或文章的发表获得了资金支持。具体资金来源包括广西重点研发计划（项目编号：GuiKeAB24010067）和中国国家自然科学基金区域创新与发展联合基金（项目编号：U22A2092）。利益冲突声明
? 作者声明没有已知的可能影响本文工作的财务利益或个人关系。
