HIV-1 Tat对FDFT1抑制作用的影响、胆固醇水平的变化以及KSHV在BCBL1细胞中的复制情况

《Current HIV Research》：Impact of HIV-1 Tat on FDFT1 Suppression, Changes in Cholesterol Level, and KSHV Replication in BCBL1 Cells

本研究探讨HIV-1转录激活蛋白Tat通过调控FDFT1影响细胞胆固醇水平，进而激活KSHV潜伏病毒复制的分子机制。通过转染过表达Tat的BCBL-1细胞，结合RT-qPCR和胆固醇测定分析，发现Tat抑制FDFT1表达并上调ORF50，同时FDFT1过表达或敲低导致KSHV ORF73和潜伏性重激活相关基因表达变化，证实胆固醇代谢调控在KSHV复制中的关键作用。

　　

摘要

引言：本研究探讨了人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的转录激活因子（Tat）蛋白如何激活卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）的复制周期的分子机制。

方法：首先使用过表达HIV-1 Tat的慢病毒感染BCBL-1细胞。通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测法恩斯酰二磷酸法恩斯酰转移酶1（FDFT1）、HIV-1 Tat、KSHV开放阅读框73（ORF73）和KSHV开放阅读框50（ORF50）的相对mRNA表达水平。使用总胆固醇测定试剂盒检测细胞内的胆固醇含量。用12-十四酰基佛波醇-13-乙酸酯（TPA）处理的BCBL-1细胞作为KSHV裂解复制的阳性对照。随后，在感染过表达FDFT1的慢病毒或进行FDFT1-RNAi敲低处理的BCBL-1细胞中，重新评估HIV-1 Tat、FDFT1、KSHV ORF73和KSHV ORF50的相对mRNA表达水平，并测定细胞内的胆固醇含量。

结果：研究发现，HIV-1 Tat在BCBL-1细胞中下调FDFT1的表达并上调KSHV ORF50的表达。FDFT1过表达会上调KSHV潜伏相关基因ORF73的表达，而FDFT1的敲低则会上调与KSHV裂解再激活相关的基因的表达。感染过表达Tat的HIV-1慢病毒以及调节FDFT1的表达均显著改变了BCBL-1细胞内的胆固醇含量。

结论：HIV-1 Tat对FDFT1的下调作用会调节细胞内的胆固醇水平，并与BCBL-1细胞中的KSHV复制过程相关。

关键词： HIV-1, Tat蛋白, KSHV, 复制周期, FDFT1, 细胞胆固醇含量