对循环肿瘤细胞中MRP2表达与乳腺癌分子特征之间相关性的回顾性分析

《Medicine》：Retrospective analysis of the correlation between MRP2 expression in circulating tumor cells and molecular characteristics of breast cancer

乳腺癌中MRP2蛋白表达与循环肿瘤细胞关联性研究显示，高表达MRP2的CTCs与PR阴性及三阴性乳腺癌（TNBC）显著相关，而低表达组则多表现为ER/PR阳性及管状癌。该发现为乳腺癌治疗抵抗机制及预后评估提供了新依据。

　　
乳腺癌中MRP2蛋白表达与分子特征关联性研究解读

乳腺癌作为全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其治疗耐药性和分子异质性一直是临床研究的热点。近年来，液体活检技术在肿瘤监测中的应用日益广泛，其中循环肿瘤细胞（CTCs）的分析为评估肿瘤生物学行为提供了新视角。本研究聚焦于MRP2蛋白在CTCs中的表达特征及其与乳腺癌分子分型的关联，通过多维度分析揭示了重要临床关联，为个体化治疗提供新依据。

一、研究背景与意义
乳腺癌的分子分型（如Luminal A/B、HER-2过表达、三阴性乳腺癌TNBC）直接影响治疗反应和预后。尽管组织活检是诊断金标准，但存在无法连续监测的局限性。CTCs作为肿瘤细胞进入血液循环的实体，携带肿瘤的关键生物学信息，其检测已成为液体活检的核心内容。MRP2蛋白作为药物转运蛋白家族成员，在化疗耐药机制中发挥重要作用，但其表达水平与乳腺癌分子分型的动态关联尚未完全明确。

二、研究方法与样本特征
研究纳入2022年9月至2024年3月期间就诊的51例乳腺癌患者，排除3例无MRP2表达样本后，最终分析48例。患者年龄分布以中老年为主（89.6%≥40岁），女性占比97.9%。按TNM分期，75%为早期（II期以下），25%为进展期（III期以上）。分子分型显示，70.8%为激素受体阳性（ER+/PR+），22.9%为三阴性乳腺癌（TNBC），其余为HER-2阳性或特殊类型癌。

检测技术采用CanPatrol平台结合多色mRNA原位杂交，可同时识别上皮标志物（EpCAM、CK8/18/19）和间质标志物（vimentin、twist），通过荧光标记实现CTCs的精准分型。特别设计的探针组合（含MRP2特异性探针）确保了检测的灵敏性和特异性。

三、核心研究发现
1. MRP2表达与分子分型的显著关联
- 低表达组（≤75% CTCs阳性）呈现典型激素受体阳性特征：100% ER+、PR+，且均为Luminal亚型（包括Luminal A 12例、Luminal B 5例+17例Her-2阴性）
- 高表达组（>75% CTCs阳性）显示PR-比例达45.9%，且TNBC占比29.7%，显著高于低表达组（P<0.05）

2. 跨组学特征的协同作用
- 多变量分析显示，PR状态与MRP2表达水平独立相关（OR=0.901，P=0.046）
- TNBC亚型患者中，82.4%呈现高MRP2表达，而Luminal亚型仅34.8%出现高表达
- 治疗方案与MRP2表达存在潜在关联：接受新辅助化疗（NAC）的33.3%患者属于高表达组，而接受单纯内分泌治疗的16.7%患者中仅9.1%为高表达

3. CTCs表型与MRP2表达的异质性
- 上皮型CTCs（占比最大）中高表达率达15%，显著高于混合型（10%）和间质型（0%）
- 检测到特殊现象：PR-组中38.6%的CTCs呈现混合表型（上皮+间质特征）
- 间质型CTCs（占比20.8%）中，57.1%属于低表达组，提示间质转化可能抑制MRP2表达

四、生物学机制探讨
1. 耐药机制解析
- MRP2蛋白通过主动转运机制降低化疗药物（如顺铂）胞内浓度，其在CTCs中的高表达可能反映肿瘤细胞对铂类药物的原始耐药性
- 三阴性乳腺癌（TNBC）的EMT（上皮-间质转化）程度较高，可能促进MRP2在CTCs中的异常表达
- 激素受体阳性肿瘤中，PR阳性状态可能通过调节MRP2基因表达抑制其活性

2. 检测技术优势
- 多色探针技术实现：上皮表型（红色）、混合表型（红绿）、间质表型（绿色）的精准分型
- 荧光强度分级系统（0-2低表达、3-9中表达、≥10高表达）具有临床可操作性
- 与传统组织活检相比，CTCs检测可提前6-12个月发现耐药信号

五、临床转化价值
1. 预测治疗反应
- 高MRP2表达提示对化疗方案（特别是含铂方案）可能存在固有耐药性
- 激素受体阳性患者中，MRP2低表达组（81.8%）对内分泌治疗应答率显著高于高表达组（45.9%）

2. 早期预警指标
-研究发现，进展期（III期）患者中高MRP2表达占比达64.2%，而早期患者（I-II期）仅34.8%
- 间质型CTCs的出现与治疗抵抗存在时间关联（新辅助化疗组间质型CTCs占比37.5%，显著高于单纯化疗组21.4%）

3. 分子分型验证
- Luminal亚型患者中，低MRP2表达占比达100%，而TNBC亚型中高表达占比达82.4%
- 首次证实PR阴性状态与MRP2高表达存在显著相关性（P=0.046）

六、研究局限性及改进方向
1. 技术层面
- CanPatrol平台对<5×10^4/μL的CTCs捕获效率有限（约30%）
- 荧光信号定量可能存在主观误差，建议结合qPCR进行验证

2. 样本特征
- 样本来源单一（深圳某医院），未来需扩大至多中心研究
- 样本量较小（n=48），需通过机器学习算法优化数据分析

3. 临床应用挑战
- 尚未建立MRP2表达与临床终点的直接关联（如DFS、OS）
- 需要结合其他耐药标志物（如ABCG2、LRP1）进行多维度评估

七、未来研究方向
1. 检测技术优化
- 开发基于CRISPR的MRP2特异性检测方法
- 探索无创液态活检（如尿液ctDNA）与血液CTCs的联合检测

2. 机制研究深化
- 构建人源化小鼠模型观察MRP2表达动态
- 建立三维类器官模型模拟肿瘤微环境

3. 临床转化路径
- 开发基于MRP2表达水平的化疗方案筛选工具
- 探索MRP2抑制剂（如MDC-4212）联合靶向治疗的应用前景

本研究首次系统揭示MRP2在CTCs中的表达模式与乳腺癌分子分型的动态关联，为建立液体活检预测模型提供了重要生物学标记。特别发现PR阴性状态与MRP2高表达存在强相关性，提示PR检测可能作为辅助筛选工具。建议后续研究重点关注：
- 不同化疗方案对MRP2表达水平的影响
- MRP2表达动态变化与肿瘤进展的时序关系
- 多组学整合分析（转录组+表观组+代谢组）

该成果已通过Shenzhen People's Hospital伦理委员会审查（编号LL-KY-2024078-01），相关检测方法已申请国家发明专利（申请号：CN2024XXXXXXX）。研究团队正在与跨国药企合作开发基于MRP2的ctDNA检测试剂盒，预计2026年完成初步临床试验。