乳腺癌分子特征与循环肿瘤细胞中上皮-间质转化的相关性分析：基于临床病例

《Medicine》：Correlation analysis of breast cancer molecular characteristics and epithelial–mesenchymal transition in circulating tumor cells: Based on clinical cases

乳腺癌患者循环肿瘤细胞（CTC）的E-CTC、H-CTC和M-CTC数量及其EMT比率与临床特征的关系。采用CanPatrol技术检测48例患者，发现M-CTC数量与性别（P=0.008）和年龄（P=0.004）显著相关，EMT比率与Ki-67表达正相关（P=0.035），且TNBC患者EMT比率更高（P=0.048）。

　　
乳腺癌作为全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其复杂的生物学行为和转移机制一直是研究热点。近年来，循环肿瘤细胞（CTCs）作为液体活检的重要标志物，在评估肿瘤进展和预后方面展现出独特价值。本研究通过系统分析48例乳腺癌患者的CTC亚型与EMT状态的关联，揭示了性别、年龄、分子分型与CTC表型转变的潜在关联，为精准医疗提供了新的视角。

研究团队采用CanPatrol技术分离CTC，并通过多色mRNA原位杂交技术将其分为三类：上皮型CTC（E-CTC）、混合型CTC（H-CTC）和间质型CTC（M-CTC）。值得注意的是，间质型CTC在男性患者中的占比显著高于女性（100% vs 10.6%），且在年龄小于40岁的群体中检出率提高近三倍（50% vs 7.1%）。这种性别与年龄的差异性可能与乳腺癌发病的激素依赖性和年龄相关的免疫衰老有关。

在分子分型方面，三阴性乳腺癌（TNBC）患者表现出最高的EMT转化率（72.3%），显著高于其他亚型（luminal A/B和HER2阳性）。Ki-67作为增殖标志物，其表达水平与EMT转化率呈正相关（P=0.035），提示高增殖活性可能加速肿瘤细胞向侵袭性表型转变。特别值得关注的是，三阴性亚型的EMT转化率是非三阴性组的2.1倍，这与该亚型对传统内分泌治疗的抵抗性相吻合，可能解释其高转移风险。

临床病理特征分析显示，M-CTC的阳性率在不同临床分期中差异显著。虽然间质型CTC在早期和晚期患者中的绝对数量均较少，但其存在与肿瘤进展呈动态关联。例如，在淋巴结转移组中M-CTC检出率（18.7%）显著高于无转移组（9.4%），且三阴性组出现M-CTC的概率是非三阴性组的3.5倍。

研究创新性地将CTC表型分类与分子分型结合分析。传统认为混合型CTC（H-CTC）可能具有中间表型特征，但本实验发现HER2阳性患者中H-CTC的占比高达100%，提示该亚型可能存在独特的EMT调控机制。相比之下，三阴性组H-CTC比例仅35.7%，显示不同分子亚型在CTC表型分布上的显著差异。

在技术方法层面，研究团队采用的多重mRNA原位杂交技术实现了对CTC表型的精准分类。通过荧光信号双通道检测，系统可区分E-CTC（红色荧光）、H-CTC（红绿双荧光）和M-CTC（绿色荧光）。该技术对微小CTC（单个细胞水平）的识别灵敏度达到0.1%，且能同时检测5种以上分子标志物，为后续临床转化提供了可靠的技术支撑。

研究局限性方面，样本量相对较小（n=48）且单一中心数据可能影响结论的普适性。此外，CTC检测通常取血后4小时内完成，但肿瘤生物学特性可能随时间动态变化，这提示未来研究需建立长期监测体系。在方法论上，尽管CanPatrol技术被证实对非小细胞肺癌CTC检测具有97.5%灵敏度，但其对低表达EpCAM的M-CTC捕获效率仍存在提升空间。

临床转化潜力方面，研究首次明确三阴性乳腺癌患者存在显著的EMT表型特征。临床实践中，EMT转化率与Ki-67表达的正向关联（r=0.31）为联合靶向治疗提供了理论依据。例如，针对Wnt/β-catenin通路抑制剂与抗EMT治疗（如TGF-β受体拮抗剂）的协同应用，可能在改善三阴性乳腺癌预后方面取得突破。此外，发现男性患者中M-CTC的异常高表达（100% vs 女性组10.6%），提示性别特异性诊疗策略的必要性。

未来研究方向应着重于：（1）建立标准化CTC表型分类体系，解决当前检测方法间存在的技术差异；（2）开展多中心、前瞻性队列研究，验证EMT转化率作为预后生物标志物的临床价值；（3）结合单细胞测序技术，解析不同CTC亚型在肿瘤微环境中的功能异质性。此外，探索EMT转化率与化疗耐药性的关联，开发基于动态CTC监测的个体化治疗决策模型，将成为转化医学的重要突破口。

该研究不仅深化了对乳腺癌转移机制的理解，更在生物标志物开发方面取得突破性进展。通过整合CTC表型特征与分子分型信息，为精准识别高危患者群体、优化治疗方案提供了新的理论依据。特别在乳腺癌治疗领域，三阴性亚型的EMT转化率与Ki-67的强相关性，提示未来可开发基于EMT状态的动态监测体系，实现治疗方案的实时调整，这对改善该亚型患者的生存率具有重大临床意义。