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为破解结直肠癌肝转移（CRLM）免疫治疗耐药难题，研究团队整合单细胞RNA-seq与空间转录组，首次发现FOLR2肿瘤相关巨噬细胞（TAM）通过CXCL13-CXCR5轴招募耗竭CD8 T细胞并塑造“免疫排斥”微环境；靶向阻断该轴可恢复T细胞毒性，显著延长小鼠生存。成果发表于《Virchows Archiv》，为CRLM联合免疫治疗提供新靶点。
研究背景
结直肠癌（colorectal cancer, CRC）位居全球恶性肿瘤死亡率第二，约50%患者最终发生肝转移（colorectal liver metastasis, CRLM）。尽管免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors, ICIs）在微卫星高度不稳定（MSI-H）CRC中疗效显著，但CRLM中MSI-H比例不足5%，绝大多数为微卫星稳定（MSS）型，对ICIs几乎“无动于衷”。肿瘤微环境（tumor microenvironment, TME）为何“冷若冰霜”？哪些细胞在幕后操控免疫逃逸？空间位置信息是否决定命运？这些悬而未决的问题让临床医生束手无策。
为回答上述疑问，来自复旦大学附属中山医院的研究团队设计了一项“单细胞+空间”双管齐下的研究，系统解析CRLM免疫逃逸的时空密码。论文2025年6月在线发表于《Virchows Archiv》。
关键技术方法
研究纳入24例未经治疗的CRLM患者手术标本，采集原发灶、肝转移灶及邻近正常组织，构建单细胞RNA测序（scRNA-seq）文库；随后对其中6例进行10× Visium空间转录组测序；联合使用CellChat、Monocle3及多重免疫荧光（mIF）验证。
研究结果
CRLM单细胞景观揭示FOLR2 TAM扩增
通过scRNA-seq捕获92 847个细胞，聚类得到髓系、淋巴系、基质及肿瘤细胞。与正常肝相比，肝转移灶中FOLR2 TAM比例升高3.2倍，且高表达CXCL13。
FOLR2 TAM空间定位与CD8 T细胞互作
空间转录组显示FOLR2 TAM富集于肿瘤边缘“免疫排斥”区，与CD8 T细胞呈显著共定位（Moran’s I=0.71）。CellChat预测CXCL13-CXCR5为最强互作轴。
CXCL13-CXCR5轴阻断恢复T细胞功能
构建CRLM小鼠模型，抗CXCL13单抗联合PD-1抑制剂使肝转移负荷下降68%，CD8 T细胞IFN-γ比例提高2.4倍，中位生存期由29天延长至48天。
结论与讨论
该研究首次从单细胞与空间维度证实FOLR2 TAM通过CXCL13-CXCR5轴招募并“锁死”CD8 T细胞，构筑CRLM“免疫排斥”堤坝；靶向干预该轴可将“冷”肿瘤转为“热”肿瘤，为MSS-CRLM患者提供可临床转化的联合策略。
