长链非编码RNA（LncRNA）CERS6-AS1通过IGF2BP1/LIN28B轴调节机制，促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力

《Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics》：LncRNA CERS6 - AS1 mediates the IGF2BP1/LIN28B axis to promote proliferation, migration and invasion in ovarian cancer

本研究揭示CERS6-AS1通过IGF2BP1结合稳定LIN28B mRNA，促进卵巢癌增殖、迁移和侵袭，为治疗靶点提供依据。

　　

贾航|孙慧文|高成珍|朱艳|杨丽娟|李燕

江苏省盐城市盐城第一人民医院徐州医学院盐城临床学院妇产科，邮编224001，中华人民共和国

摘要

卵巢癌仍然是女性健康面临的重要临床挑战，因此阐明其潜在的分子机制至关重要。长链非编码RNA（lncRNA）CERS6-AS1和LIN28B结合蛋白在卵巢癌的发展中起着关键作用。我们使用qPCR技术评估了卵巢癌组织和细胞系中CERS6-AS1和LIN28B的表达水平，并通过免疫组化（IHC）分析了蛋白质水平。生存率通过Kaplan-Meier曲线进行评估。通过RNA干扰（shRNA）沉默LIN28B或CERS6-AS1，然后通过细胞克隆、划痕实验和Transwell实验研究了其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。RNA pull-down和RIP实验证实了CERS6-AS1与IGF2BP1的结合，并增强了LIN28B mRNA的稳定性。最后，进行了LIN28B过表达以进行功能恢复实验。在临床卵巢癌样本及其来源的细胞系中均观察到CERS6-AS1和LIN28B的表达升高。敲低LIN28B可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。分子研究表明，CERS6-AS1通过IGF2BP1结合来稳定LIN28B。此外，CERS6-AS1的缺失同样会减弱恶性表型，而这些效应可以通过LIN28B的过表达得到恢复。总体而言，CERS6-AS1调控的IGF2BP1/LIN28B信号通路通过促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭来推动卵巢癌的发展，这一通路具有成为潜在治疗靶点的前景。

引言

卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其特征是卵巢细胞异常增殖导致肿瘤形成[1,2]。卵巢上皮癌是最常见的发病类型[3]。早期症状往往不明显，如腹部胀气和消化不良，容易被忽视。因此，大多数患者在晚期才被诊断出来，这使得卵巢癌成为妇科恶性肿瘤中死亡率最高的疾病[4]。卵巢癌的风险因素包括基因突变、未生育（无子女）和绝经延迟。诊断通常依赖于超声和CT/MRI等影像技术，以及CA125等肿瘤标志物[5,6]。主要治疗方法是手术——早期病例进行全面分期，晚期病例则切除肿瘤——并结合铂类化疗和针对BRCA突变患者的PARP抑制剂[7,8]。卵巢癌的发生和发展涉及高度复杂的多因素分子机制[9,10]。

长链非编码RNA CERS6-AS1与CERS6基因相关[11,12]。它参与细胞分化、增殖、凋亡和血管生成[13]。lncRNA CERS6-AS1的异常表达与卵巢癌的进展显著相关[14]。研究表明，lncRNA CERS6-AS1在卵巢癌中具有致癌作用[15,16]。然而，其在卵巢癌中的具体功能和分子机制仍不完全清楚。基于我们对现有临床数据和文献的分析，我们认为CERS6-AS1可能成为卵巢癌检测和疾病监测的有希望的生物标志物。

IGF2BP1在卵巢癌中高表达，在晚期、高风险病例中尤为明显，这与患者生存率降低和临床预后不良密切相关[17,18]。IGF2BP1通过阻止MYC和MYCN mRNA的降解，促进MYC、MYCN及其他致癌因子的表达，从而增强肿瘤细胞的增殖、存活和转移[19]。Mettl3介导的m6A甲基化可提高mRNA的稳定性，有助于IGF2BP1识别靶标转录本并上调癌基因表达[20]。生物信息学分析表明，lncRNA CERS6-AS1与IGF2BP1相互作用，而IGF2BP1又与LIN28B相互作用[21]。

LIN28（包括LIN28A和LIN28B）是一种重要的RNA结合蛋白，通过多种机制参与卵巢癌的恶性进展[22,23]。LIN28A和LIN28B在癌组织中异常激活，而在相应的正常组织中几乎不存在[24,25]。这些蛋白质作为癌基因，促进恶性转化、促进转移、调节炎症并维持肿瘤干细胞[26,27]。临床研究已将LIN28确定为卵巢癌发展的关键因素。

我们假设lncRNA CERS6-AS1介导IGF2BP1/LIN28B通路，促进卵巢癌的增殖、迁移和侵袭。阐明CERS6-AS1–IGF2BP1–LIN28B通路内的调控相互作用可能提供新的机制见解，并为卵巢癌的管理提供潜在的治疗策略。

材料与试剂

从接受手术治疗的患者中收集了55对临床样本，包括卵巢癌组织和相邻的正常组织。所有样本在收集后立即用液氮快速冷冻，并储存在-80°C以备后续的分子生物学和病理学分析。本研究获得了盐城第一人民医院伦理委员会的批准。我们已将患者信息表添加在表1中。

IOSE-80和

卵巢癌中lncRNA CERS6-AS1和LIN28B的表达及其与临床的相关性

已有研究表明，lncRNA CERS6-AS1和LIN28B在卵巢癌中的表达升高[30,31]。我们使用qPCR检测了55例卵巢癌患者的LIN28B表达情况。与正常组相比，lncRNA CERS6-AS1和LIN28B的表达水平显著增加（图1A）。同时表达CERS6-AS1和LIN28B水平升高的患者生存率较低，而这些标志物表达水平较低的患者生存率较高

讨论与结论

卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤，通常表现为非特异性的早期症状和侵袭性强的转移行为，导致晚期才被发现。因此，迫切需要探索其分子机制以改进诊断和治疗[34]。我们证实了LIN28B在促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭中的致癌作用，这与先前关于LIN28B参与多种恶性过程的报告一致

伦理批准

本研究获得了盐城第一人民医院伦理委员会的批准。

资助

本研究得到了盐城市科学技术计划项目（项目编号：YCBE202318）的支持。

CRediT作者贡献声明

贾航：数据可视化、资源获取、方法学设计、实验实施。 孙慧文：数据验证、数据管理。 高成珍：论文撰写、审稿与编辑、实验设计。 朱艳：软件使用、数据分析。 杨丽娟：论文撰写、审稿与编辑、初稿撰写。 李燕：项目监督、项目管理、概念构思。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

不适用。