《Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases》：Molecular detection of hemoplasmas and genetic diversity of
Anaplasma marginale in a dairy water buffalo (
Bubalus bubalis) farm from southeastern Brazil
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本研究分析了东南部巴西水牛血液样本及蜱虫、虱子中的嗜血菌和Anaplasma marginale分子流行病学及遗传多样性，发现高感染率，并揭示可能的抗性机制。
卡罗琳·托斯特斯·塞卡托（Caroline Tostes Secato）|路易斯·里卡多·贡萨维斯（Luiz Ricardo Gon?alves）|伊纳尔达·安赫莉卡·德·索扎·拉莫斯（Inalda Angélica de Souza Ramos）|雷南·布雷西亚尼尼·多·阿马拉尔（Renan Bressianini do Amaral）|安娜·克劳迪娅·鲍梅尔·蒙格鲁埃尔（Anna Claudia Baumel Mongruel）|蒂亚戈·梅里吉·达·席尔瓦（Thiago Merighi da Silva）|罗桑杰拉·扎卡里亚斯·马查多（Rosangela Zacarias Machado）|马科斯·罗热里奥·安德烈（Marcos Rogério André）
巴西圣保罗州立大学（UNESP）农业与兽医科学学院（FCAV）农业微生物学研究生项目，贾博蒂卡巴尔（Jaboticabal），SP，14884-900
摘要
巴西拥有亚洲以外最大的水牛（Bubalus bubalis）种群。随着水牛养殖业逐渐成为一项重要的经济活动，并且近年来发展迅速，有必要研究牛和水牛之间共有的病原体，因为这些动物在大多数地区会共同放牧。本研究的目的是调查巴西东南部水牛及相关体外寄生虫中Anaplasma marginale的分子存在情况及其遗传多样性。从81份水牛血液样本、165只Rhipicephalus microplus蜱虫和92只Haematopinus tuberculatus虱子中提取了DNA。通过基于16S rRNA基因的PCR检测，25.9%（21/81）的水牛血液样本对‘Ca. M. haemobos’呈阳性，50.6%（41/81）对M. wenyonii呈阳性，23%（28.4%）对这两种血孢子虫均呈阳性。针对msp1β基因的A. marginale qPCR检测显示，46.9%的水牛血液样本、1.08%的虱子样本和49.1%的蜱虫样本呈阳性。在研究区域内，水牛及其相关蜱虫中发现了高水平的A. marginale遗传多样性，包括10个新菌株和3个先前报道过的菌株。Anaplasma marginale E基因型最为普遍。遗传多样性指数表明，A. marginale msp1α的短序列重复序列（SSRs）在该地区具有高度多样性，但与其他地区的差异较小。同时感染M. wenyonii、‘Ca. M. haemobos’和A. marginale的水牛未出现贫血症状，这可能表明这些动物对这些病原体具有抵抗力。
章节摘录
引言
水牛（Bubalus bubalis）最初于19世纪中叶引入巴西，目的是作为咖啡种植园的役畜。然而，直到20世纪70年代，水牛养殖业才开始扩展并确立为一种经济活动[1]。目前巴西的水牛数量超过160万头，其中大部分分布在北部地区，构成了亚洲以外最大的水牛种群[2]、[3]。水牛养殖业
伦理方面
本研究已获得圣保罗州立大学“朱利奥·德·梅斯基塔·菲略”（UNESP）贾博蒂卡巴尔校区动物使用伦理委员会批准（协议编号003891/23）。
采样物种和研究区域
水牛血液样本采集自巴西东南部米纳斯吉拉斯州帕索斯市（20° 43′ 08″ S / 46° 36′ 36″ W）的一家奶牛场[43]、[44]。这些水牛与奶牛共同饲养，仅用围栏隔开。水牛既用于肉用也用于
体外寄生虫的形态鉴定
从40头水牛中收集到165只Rhipicephalus microplus蜱虫（92只雌性、25只雄性、48只若虫和1只幼虫，占49.4%），从35头水牛中收集到92只Haematopinus tuberculatus虱子（占43.2%）。
内源性PCR对照
所有81份水牛血液样本、165只蜱虫样本和62只虱子样本在针对哺乳动物内源性gapdh、16S rRNA和cox-1基因的cPCR检测中均呈阳性。
血孢子虫的检测与分子特征分析
基于16S rRNA基因的cPCR检测用于识别‘Ca. M. haemobos
讨论
尽管与牛相比，水牛似乎对蜱传血孢子虫（Ehrlichia minasensis、Babesia bovis和Babesia bigemina）具有更强的抵抗力[44]，但本研究发现这些动物中血孢子虫和A. marginale的感染率较高。
在采样的水牛中发现了较高的血孢子虫感染率。在土耳其和埃及的水牛中，血孢子虫的感染率较低[34]、[42]。在东北部采样的水牛中
结论
在巴西东南部一家奶牛场采样的水牛显示出较高的血孢子虫和A. marginale感染率。在研究区域内，水牛及其相关蜱虫中发现了高水平的A. marginale遗传多样性，包括10个新菌株和3个先前报道过的菌株。在本研究中，A. marginale E基因型最为普遍。遗传多样性指数表明，A. marginale msp1α的短序列重复序列在该地区具有高度多样性，但与其他地区的差异较小。作者贡献声明
雷南·布雷西亚尼尼·多·阿马拉尔（Renan Bressianini do Amaral）：撰写、审稿与编辑、软件使用、方法学设计。伊纳尔达·安赫莉卡·德·索扎·拉莫斯（Inalda Angélica de Souza Ramos）：撰写、审稿与编辑、方法学设计。路易斯·里卡多·贡萨维斯（Luiz Ricardo Gon?alves）：撰写、审稿与编辑、软件使用、方法学设计、研究实施。卡罗琳·托斯特斯·塞卡托（Caroline Tostes Secato）：撰写、审稿与编辑、初稿撰写、数据可视化、验证、软件使用、方法学设计、研究实施、数据分析。马科斯·罗热里奥·安德烈（Marcos Rogério André）：撰写、审稿与编辑、结果验证、研究监督。致谢
我们感谢圣保罗州研究基金会（FAPESP）、巴西高等教育人员发展协调委员会（CAPES）（资助代码001）以及巴西国家科学技术发展委员会（CNPq）的支持。
伦理方面
本研究已获得圣保罗州立大学“朱利奥·德·梅斯基塔·菲略”（UNESP）贾博蒂卡巴尔校区动物使用伦理委员会批准（协议编号003891/23）。
