海胆素作为单胺能系统的多模式调节剂：具有抗抑郁样作用的临床前证据

《European Journal of Pharmacology》：ECHINATIN AS A MULTIMODAL MODULATOR OF MONOAMINERGIC SYSTEM: PRECLINICAL EVIDENCE FOR ANTIDEPRESSANT-LIKE ACTIVITY

氧化应激诱导的视网膜色素上皮细胞凋亡和铁死亡可通过NRF2-ferroptosis信号通路被Oxyresveratrol抑制，并在小鼠AMD模型中得到验证。

　　

庄志春|陈永源|卢伟阳|苏世智|廖婷瑜|杨顺发|谢毅贤

台湾台中中山医科大学医学院

摘要

年龄相关性黄斑变性（AMD）是一种慢性视网膜疾病，当视网膜中心逐渐积累氧化损伤时发生。氧白藜芦醇（OxyR）是一种天然存在的芪类化合物，存在于许多植物中，据报道具有抗炎和抗氧化活性。为了填补这一研究空白，我们探讨了OxyR对视网膜色素上皮细胞在氧化应激下的影响，并在AMD小鼠模型中进一步分析了OxyR作用的分子机制。在本研究中，我们发现OxyR有效抑制了由碘酸钠（NaIO₃）诱导的人类ARPE-19细胞的凋亡和铁死亡（ferroptosis）。OxyR对NaIO₃诱导的ARPE-19细胞的这种保护作用伴随着NRF2、KEAP1以及几种与铁死亡相关的蛋白质表达水平的变化。此外，OxyR处理结合NRF2沉默、铁死亡抑制剂（ferrostatin-1）的使用或ROS的减少，能够增强ARPE-19细胞对NaIO₃诱导的损伤的保护作用。一致地，口服OxyR可以恢复NaIO₃处理小鼠视网膜色素上皮层的厚度减少，并减弱NRF2的上调。这些结果表明，OxyR通过靶向NRF2-铁死亡信号通路来缓解NaIO₃诱导的ARPE19细胞死亡。我们的发现为使用OxyR控制AMD提供了潜在途径。

引言

年龄相关性黄斑变性（AMD）是一种影响黄斑（视网膜中心）的进行性损伤，是发达国家中导致中心视力丧失的主要原因之一（Gao等人，2024年）。除了年龄因素外，该眼病的潜在风险还包括吸烟、遗传背景和代谢失衡（Huang等人，2025年；Kasem等人，2025年）。尽管AMD的发病机制尚未完全明了，但已注意到视网膜色素上皮（RPE）的功能障碍，RPE是一层位于感光细胞和布鲁赫膜之间的色素细胞，负责维持视网膜的稳态（Garcia-Garcia等人，2022年）。RPE的损伤通常由失控的氧化应激引起，这会触发视网膜下区域的慢性炎症，而补体系统是其中的一个重要组成部分（Armento等人，2021年）。因此，减轻RPE的氧化损伤可能有助于AMD的管理。

铁死亡是一种程序性细胞死亡，其特征包括铁积累、活性氧（ROS）升高和脂质过氧化（Stockwell，2022年）。如果不受控制，高水平的氧化脂质会导致细胞膜破坏，并与多种疾病有关（Brown等人，2024年）。最近的证据表明，铁死亡与许多视网膜疾病的发病和进展密切相关，如AMD、糖尿病视网膜病变、视网膜脱离和视网膜母细胞瘤（Yang等人，2024年）。因此，这些眼科疾病可能适合通过调节铁死亡来治疗。

氧白藜芦醇（OxyR）是一种天然存在的芪类化合物，存在于葡萄、花生和桑葚等多种植物中（Likhitwitayawuid，2021年）。这种多酚化合物在其芳香环上多了一个羟基，使其比其母体化合物白藜芦醇具有更好的水溶性（Chao等人，2008年）。除了在抑制炎症和氧化方面的显著作用外，OxyR在临床前实验中还表现出多种药理活性，包括抗癌、抗肥胖、抗微生物、神经保护和肝脏保护（Zhao等人，2024年）。在本研究中，我们旨在测试OxyR对氧化应激下RPE细胞的影响，并在AMD小鼠模型中进一步探讨OxyR的作用机制。我们的结果可能为使用这种天然化合物控制AMD的进展提供潜在途径。

试剂和细胞培养

碘酸钠（NaIO₃）和N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）购自Thermo Fisher Scientific（美国马萨诸塞州Tewksbury），并溶解在蒸馏水中。氧白藜芦醇（OxyR；91211）、二甲基亚砜（DMSO；D8418）、3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯四唑溴化物（MTT；88417）和铁死亡抑制剂（Fer-1；SML0583）购自Sigma（美国密苏里州圣路易斯）。人类RPE细胞系（ARPE-19）来自台湾新竹的生物资源收集与研究中心

OxyR防止NaIO₃诱导的视网膜色素上皮细胞死亡

为了测试OxyR补充剂（图1A）在控制AMD进展方面的潜力，我们首先研究了OxyR对由氧化毒性物质碘酸钠（NaIO₃）诱导的人类视网膜色素上皮细胞系（ARPE-19）损伤的影响。当ARPE-19细胞与不同浓度的OxyR共培养24或48小时时，细胞活力基本保持不变（图1B），表明OxyR处理没有明显的细胞毒性。

讨论

AMD是一种常见的眼科疾病，严重影响老年人的中心视力。尽管目前有许多治疗策略，但有效且经济高效地管理AMD仍然是一个挑战（Kumbhar等人，2024年）。因此，迫切需要替代治疗方案来控制这种疾病负担。现在普遍认为，草药或天然化合物可能有助于预防AMD（Wang等人，2024年）。在本研究中，我们

CRediT作者贡献声明

庄志春：撰写原始稿件、项目管理、实验设计、数据整理。陈永源：指导、方法学设计、资金获取。苏世智：项目管理、实验设计、数据分析。卢伟阳：概念提出、撰写及审稿编辑。廖婷瑜：指导、方法学设计、概念提出。杨顺发：撰写及审稿编辑、资源协调、项目管理、概念提出。谢毅贤：撰写原始稿件

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可应合理要求向通讯作者索取

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

资助

本研究得到了中山医科大学医院的研究资助（CSH-2024-C-036）。

利益冲突声明

? 作者声明没有已知的利益冲突或个人关系可能影响本文所述的工作。