多性状苏云金芽孢杆菌菌株中cry、vip3A和chi36基因的毒性、蛋白质谱分析及PCR检测，这些菌株针对Helicoverpa armigera Hubner和Meloidogyne incognita Kofold和White

《International Journal of Tropical Insect Science》：Toxicity, protein profiling and PCR detection of cry, vip3A and chi36 gene in multi-trait Bacillus thuringiensis strains against Helicoverpa armigera Hubner and Meloidogyne incognita Kofold and White

Bt菌株对枯萎叶蛾和根结线虫的防治效果及基因分析研究

　　

摘要

豆荚蛀虫Helicoverpa armigera Hubner和根结线虫Meloidogyne incognita Kofold & White都是多食性害虫，不仅危害豆科作物，还危害蔬菜、纤维作物、油料作物和小米。在16种Bacillus thuringiensis（Bt）菌株中，有3种菌株对H. armigera的幼虫杀灭率超过了95%。Probit分析表明，Bt菌株IIPR Bt11 (F10.IIPR)表现最佳，其次是IIPR Bt15 (H9T33.IIPR)。IIPR Bt11(F10.IIPR)的LC₅₀值为0.45 × 10⁶ cfu/ml，蛋白质浓度为0.05728 mg/ml。通过PCR扩增证实IIPR Bt11 (F10.IIPR)中含有< />、< />、< />和基因。对5种Bt菌株进行SDS-PAGE蛋白分析后，也确认了IIPR Bt11 (F10.IIPR)中存在< />（135 kDa）和< />（71 kDa）基因。扫描电子显微镜分析显示IIPR Bt11 (F10.IIPR)中含有双锥形和立方体状的晶体蛋白。通过对IIPR Bt11、IIPR Bt14和IIPR Bt15的基因进行系统发育分析，并结合49个几丁质酶基因的数据，发现这3个菌株的基因属于外几丁质酶类。进一步进行的Bt几丁质酶生物活性测试显示，IIPR Bt15 (H9T33.IIPR)的杀卵活性最高（86.67%），其次是IIPR Bt11 (F10.IIPR)（79.33%）和IIPR Bt14 (H7d.IIPR）（76.00%）。因此，IIPR Bt11 (F10.IIPR)和IIPR Bt15 (H9T33.IIPR)这两种Bt菌株具有作为生物农药用于防治豆荚蛀虫Helicoverpa armigera和根结线虫Meloidogyne incognita的潜力。