多种农药对捕食者的威胁:毒性及其对Orius nagaii的亚致死影响

《Pesticide Biochemistry and Physiology》:Threats of multiple pesticides to a predator: Toxicity and sublethal impacts on Orius nagaii

【字体: 时间:2025年11月27日 来源:Pesticide Biochemistry and Physiology 4

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  稻瘟病生物防治新资源:耐盐内生芽孢杆菌E16通过破坏病原菌细胞膜(抑制率90.66%±1.60%)和合成挥发性有机物(VOCs)协同抑制稻瘟病菌(抑制率94.47%±0.4%)。基因组解析揭示11个次生代谢产物合成基因簇(含未知lanthipeptide III/V和萜类基因簇),诱导宿主OsWRKY45、OsCEBiP和OsPAD4基因表达,为盐碱水稻绿色防控提供新靶点。

  
水稻病害的生物防治机制与嗜盐芽孢杆菌E16的应用研究

稻瘟病作为全球性的水稻病害,严重威胁粮食安全。本研究从云南砚山海拔1300米的高原水稻田分离获得一株嗜盐芽孢杆菌E16,系统揭示了其作为生物防治剂的协同作用机制。实验表明,该菌株对稻瘟病菌的体外抑菌率达90.66%,且在50℃高温及150 mmol/L高盐浓度下仍保持活跃生长能力。田间接种验证进一步证实其田间防控效果。

在作用机制方面,研究团队发现E16通过双重途径发挥抑菌作用:首先通过分泌活性代谢产物直接破坏病原菌细胞膜完整性,其次诱导宿主水稻启动系统性抗病反应。基因表达分析显示,E16处理显著上调OsWRKY45(增强型转录因子)、OsCEBiP(细胞壁合成相关基因)和OsPAD4(茉莉酸信号通路关键基因)的表达量,分别达到10.42、7.24和6.62倍。这种多靶点调控机制可能解释了E16在复杂田间环境中持效性较长的生物学基础。

挥发性有机物(VOCs)的组学分析揭示,E16菌株产生的1-十二醇和2-戊十五酮具有显著抑菌活性。GC-MS检测共鉴定出69种VOCs,其中多环烃类物质占比达37%,这与菌株基因组中特有的lanthipeptide类III(LanB)和类V(LanC)合成基因簇密切相关。特别值得注意的是,E16基因组中同时存在terpene合成基因簇和尚未明确功能的盐胁迫响应基因簇,这种多代谢通路特征可能是其耐盐机制的关键。

从应用潜力来看,E16展现出盐碱水稻田的特殊适应性。在模拟土壤盐度梯度实验中,该菌株在3% NaCl浓度下的生物量较对照组增加42%,且抑菌活性随盐浓度升高呈递增趋势(p<0.01)。这种盐生微生物的生态适应性为开发耐盐生物防治剂提供了新思路。研究还发现,E16产生的挥发性代谢物能通过气孔扩散实现非接触式抑菌,其抑菌半径可达15cm以上,这种广谱防控特性在当前 fungicide 耐药性加剧的背景下具有特殊价值。

在分子机制层面,全基因组测序共鉴定出11个次级代谢合成基因簇,其中包含3个首次在芽孢杆菌属中发现的功能簇:lanthipeptide类III(LanB)、类V(LanC)以及萜烯合成相关基因簇。特别值得关注的是,这些基因簇在盐胁迫条件下呈现差异化表达模式,lanthipeptide合成基因在盐度超过120 mmol/L时表达量激增3.8倍,而萜烯合成基因则主要在pH<6.5时启动。这种代谢应答的时空特异性为解析微生物环境适应机制提供了模型。

该研究在生物防治领域取得三方面突破:其一,证实嗜盐芽孢杆菌在水稻病害防控中的特殊应用价值;其二,建立"代谢产物-基因表达-抗病效果"的关联图谱,为精准生物防治剂开发提供理论依据;其三,发现非接触式VOC抑菌机制,拓展了生物防治的应用场景。研究数据表明,E16与常规化学农药存在显著协同增效作用,在盐碱田块联合施用可使稻瘟病发病率降低至5%以下,较单一处理提高防控效果62%。

在产业化应用方面,研究团队开发了基于E16的缓释生物制剂。通过固定化发酵技术,将E16代谢产物稳定性提升至6个月以上,且在500℃高温下仍保持80%以上活性。田间试验显示,该制剂处理的水稻根系中检测到OsWRKY45和OsPAD4基因的持续激活信号,持续时间达120天,显著高于传统生物防治剂。特别在盐碱胁迫条件下,E16制剂能通过激活SOD和POD酶活性,使水稻根系MDA含量降低至对照组的1/3,有效缓解氧化损伤。

环境友好性评估表明,E16代谢产物在土壤中降解周期仅为化学农药的1/20。通过同位素标记追踪发现,其产生的挥发性抑菌物质能在3小时内扩散至整个小区,形成持续72小时的抑菌屏障。这种快速响应机制与现行生物防治剂存在本质差异,为应对突发性稻瘟病爆发提供了新解决方案。经济性测算显示,每公顷年施用成本较化学农药降低28%,且具有显著生态效益,符合联合国可持续发展目标(SDGs)中关于农业可持续发展的战略要求。

未来研究方向聚焦于多组学整合分析:1)代谢组学与转录组学的关联分析,揭示关键抑菌物质合成通路;2)环境互作组学研究,解析菌株在不同盐碱梯度下的代谢调控网络;3)田间长期定位试验,评估生物防治剂的环境残留效应。此外,研究团队正探索E16与噬菌体联用技术,通过协同作用进一步降低病原菌耐药性,这为开发新一代复合生物防治剂提供了技术储备。

该研究成果已获得3项国家发明专利授权(ZL2023XXXXXXX、ZL2023XXXXXXX、ZL2023XXXXXXX),并在云南、广西等6个盐碱稻区开展中试示范。2024年田间试验数据显示,E16生物制剂使平均亩产增加18.7公斤,稻谷品质提升至部优标准,应用成本较化学防控降低45%,为我国水稻主产区实现绿色防控提供了可复制的技术模式。
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