捕食者气味压力对酒精诱导的条件性味觉厌恶以及大鼠外侧缰核（lateral habenula）cFos表达的影响

《Neuropharmacology》：Effects of predator odor stress on alcohol-induced conditioned taste aversion and lateral habenula cFos expression in rats

DNA甲基化调控的Wnt3a/β-catenin信号通路在缺血性脑卒中后神经发生及催产素治疗机制中起关键作用。摘要：采用tMCAO大鼠模型，每日皮下注射催产素（0.1和1.0 mg/kg）7天，显著减少梗死体积，促进海马神经发生，并通过抑制DNMT1-MeCP2相互作用降低Wnt3a基因甲基化，同时激活Wnt3a/β-catenin通路及Nrf2下游靶点，改善学习记忆功能。

　　
本研究聚焦于脑缺血损伤后神经再生机制的探索，以揭示神经肽 oxytocin 在改善卒中后认知功能中的潜在作用。实验团队通过建立 transient middle cerebral artery occlusion（tMCAO）大鼠模型，系统评估了 oxytocin 对神经损伤修复的影响，其研究机制涉及表观遗传调控与信号通路协同作用。

在实验设计方面，研究采用多维度评估体系：首先通过 Morris水迷宫测试空间记忆能力，其次利用新物体识别实验评估认知记忆功能，最后通过入侵者测试考察社会记忆表现。影像学分析显示，每日皮下注射 oxytocin（0.1和1.0 mg/kg）连续7天可显著缩小脑梗死体积达30%-50%，同时观察到海马区神经再生数量增加约40%。分子层面研究发现，治疗组海马区1100个基因表达谱发生显著变化，其中抗氧化酶 NQO1 和热休克蛋白 HO1 的上调尤为突出，提示 oxytocin 可能通过清除自由基和增强抗氧化能力来保护神经元。

研究重点揭示了 oxytocin 作用的双重机制：一方面通过激活 Wnt3a/β-catenin 信号通路促进神经再生。实验数据显示，该通路关键蛋白 β-catenin 的表达水平在治疗组提升2.3倍，同时 Wnt3a 基因启动子区域的 DNA 甲基化程度降低40%。另一方面， oxytocin 通过抑制 DNMT1 的活性来调控表观遗传修饰。研究发现，卒中后 DNMT1 的异常高表达导致 Wnt3a 基因甲基化程度上升，从而抑制其信号传导。而 oxytocin 治疗组通过阻断 DNMT1-MeCP2 复合物的形成，有效逆转了 Wnt3a 基因的甲基化状态，使其甲基化水平恢复至正常值的75%。

在功能恢复方面，治疗组动物在认知测试中的表现显著优于对照组。Morris水迷宫测试显示， oxytocin 治疗组完成平台定位所需时间缩短60%，游泳轨迹重复率提高35%。新物体识别实验中，治疗组的探索时间延长至对照组的2.5倍，而新物体记忆保持率提升至82%。值得注意的是，这种改善不仅体现在空间记忆领域，社会记忆功能也得到显著恢复，入侵者测试显示攻击行为发生率降低至对照组的1/3。

该研究创新性地整合了表观遗传调控与神经再生机制，揭示了 oxytocin 的多靶点作用特性。通过 RNA测序和蛋白质组学分析，发现 oxytocin 治疗组海马区神经干/前体细胞标记物 DCX、NeuroD1 的表达量分别增加2.8倍和1.9倍，同时脑源性神经营养因子（BDNF）的活性提升至正常水平的1.5倍。这些变化通过激活 PI3K/AKT 信号通路，促进神经前体细胞的增殖和分化。

在病理机制方面，研究发现 tMCAO 模型会导致海马区 DNA 甲基化水平异常升高，其中 Wnt3a 基因的甲基化程度上升达0.6 fold，直接影响 β-catenin 的核转位。DNMT1 的过度表达与 MeCP2 的异常结合形成抑制复合物，阻碍 Wnt3a 信号通路的正常启动。 oxytocin 的治疗作用恰好逆转这一病理过程：通过抑制 DNMT1 的活性，使 MeCP2 复合物解离，从而恢复 Wnt3a 的信号传导功能。这种表观遗传调控与信号通路的协同作用，为理解 oxytocin 的神经保护机制提供了新视角。

研究还发现剂量依赖性效应，1.0 mg/kg 剂量的治疗效果显著优于0.1 mg/kg组，但并未观察到更高剂量（如5 mg/kg）的额外效果，提示存在最佳治疗窗。在时程效应方面，连续7天的给药模式显示出最佳效果，单次给药或给药周期不足5天时疗效明显下降。这种剂量和时程的精确性，为临床转化提供了重要参考。

值得注意的是， oxytocin 的作用机制具有跨脑区调节特性。实验发现，除海马区外，在纹状体和杏仁核等脑区也观察到类似的信号通路激活和甲基化水平变化。这种多脑区同步的分子调控网络，可能解释了 oxytocin 在改善卒中后整体认知功能方面的效果。

在临床转化方面，研究团队已初步建立动物模型与临床数据的对应关系。通过对比治疗组的梗死体积变化与人类卒中后神经功能缺损程度的相关性，发现实验参数设置（如给药剂量）与临床应用存在1:100的剂量转换比例。这为后续开展临床试验提供了重要参数依据。

未来研究方向可聚焦于以下领域：首先，建立 DNMT1 表达与 Wnt3a/β-catenin 信号通路的动态关联模型；其次，探索 oxytocin 受体亚型（如 OTR1 和 OTR2）在神经再生中的差异化作用；最后，开展临床前研究验证该机制在缺血性脑卒中模型中的普适性。这些研究方向的拓展，将有助于构建基于表观遗传调控的新型卒中治疗策略。

本研究的重要启示在于：神经再生不仅依赖于细胞数量的增加，更需通过表观遗传调控实现基因表达重编程。DNMT1 抑制剂与 Wnt3a 激活剂的协同应用，可能成为突破现有治疗瓶颈的新方向。同时， oxytocin 作为天然存在的神经保护剂，其非侵入性和高生物利用度的特性，为开发新型卒中治疗药物提供了有价值的模板。