利奎里蒂吉宁（Liquiritigenin）通过调节SphK1/S1P/SPNS2信号通路来减轻酒精引起的肝脏炎症

《International Immunopharmacology》：Liquiritigenin attenuates alcohol-induced liver inflammation by regulating the SphK1/S1P/SPNS2 signaling pathway

本研究探讨接骨木苷（LQ）通过抑制SphK1/S1P/SPNS2信号通路改善酒精性肝炎（AH）的机制。通过动物模型和体外实验，发现LQ显著减轻肝脏炎症和损伤，抑制该通路关键分子，为AH治疗提供新策略。

　　
该研究聚焦于酒精性肝炎（AH）的防治机制探索，重点考察了中药成分利枯草苷（LQ）通过调控 sphingolipid 代谢通路发挥抗炎保肝作用的可能性。研究采用动物模型与细胞实验相结合的方法，构建了C57BL/6小鼠酒精性肝损伤模型和HepG2细胞体外损伤模型，通过多维度检测手段揭示了LQ干预 AH的关键分子机制。

在病理机制层面，研究揭示了酒精性肝损伤的核心病理特征：长期酒精摄入导致肝细胞脂质堆积、线粒体功能障碍和脂质代谢紊乱。特别值得关注的是，sphingolipid代谢通路异常在AH进程中发挥关键作用。研究团队通过前期工作证实酒精暴露会显著激活SphK1（鞘氨醇激酶1）导致S1P（鞘氨醇-1-磷酸）异常积累，并通过SPNS2（鞘氨醇-1-磷酸转运蛋白2）介导的S1P外排机制激活下游NF-κB/STAT3炎症通路，最终引发肝细胞炎症反应和肝纤维化进程。

在实验设计方面，研究创新性地采用体内-体外双模型验证机制。动物实验通过不同剂量LQ干预酒精性肝炎小鼠模型，发现中高剂量组能有效改善小鼠体重下降趋势（图1D），显著降低肝指数（图1C），同时检测到血清ALT、AST等肝功能指标明显优于模型组。细胞实验则通过HepG2细胞酒精损伤模型，证实LQ能剂量依赖性地抑制细胞内S1P水平（图3B），并验证其与SPNS2的分子相互作用。

研究突破性发现LQ可通过三重机制抑制炎症反应：首先通过抑制SphK1活性减少S1P生成，阻断SPNS2介导的S1P外排，从而降低细胞外S1P浓度；其次通过阻断S1P与其G蛋白偶联受体（S1PR1-5）的结合，抑制NF-κB和STAT3的核转位；最后通过调节炎症小体信号通路（如NLRP3）减少促炎因子（TNF-α、IL-6等）释放。转录组学分析进一步验证了该通路中SPNS2、S1PR1等关键基因的表达下调，而SphK1相关基因表达上调的趋势被逆转。

在机制解析方面，研究首次系统阐明SphK1/S1P/SPNS2通路的级联激活机制：酒精诱导的肝细胞内鞘氨醇（sphingosine）浓度异常升高激活SphK1，催化生成大量S1P。S1P通过SPNS2介导的外排机制进入细胞外，与S1PR1受体结合后激活下游炎症信号通路。LQ通过抑制SphK1活性减少S1P合成，同时竞争性结合SPNS2降低S1P外排效率，双重作用使细胞内外S1P浓度均显著降低（图4）。这种双重调控机制有效阻断了NF-κB和STAT3的磷酸化激活，导致促炎因子TNF-α、IL-6表达量下降达60-70%（图5C）。

在临床转化价值方面，研究证实LQ的保肝效果具有剂量依赖性和时效性特征：低剂量（50mg/kg）主要改善肝细胞氧化损伤（GSH水平提升35%），中高剂量（100-200mg/kg）则通过抑制炎症通路发挥更显著的治疗效果。值得注意的是，LQ对肝纤维化标志物（如TGF-β1、Collagen I）的抑制作用强于传统护肝药物，这可能与同时调节脂质代谢和炎症信号通路有关。

该研究为中药现代化研究提供了重要范式：通过分子对接技术筛选出LQ与SPNS2蛋白的特异性结合位点（图6A），结合结构生物学分析揭示了LQ通过氢键和疏水作用增强SPNS2的膜通透性，促进S1P内吞回收的分子机制。这种基于天然产物的结构导向研究，为开发新型抗炎药物提供了理论依据。

在应用前景方面，研究建议将LQ作为酒精性肝病综合治疗的新靶点。特别在早期AH阶段，LQ可能通过调节肠道菌群-肝轴轴（研究团队前期工作已证实酒精摄入可导致特定菌群失调，如拟杆菌门/厚壁菌门比例失衡）间接改善肝损伤。临床前研究显示，LQ联合戒酒治疗可使AH小鼠的肝组织再生效率提升40%（图7D），提示联合疗法的潜力。

研究同时指出了当前存在的局限性：主要依赖体外细胞实验和动物模型，尚未开展临床试验验证；对SPNS2介导的具体外排机制（如囊泡运输还是直接扩散）尚未完全阐明；未明确区分酒精急性损伤与慢性纤维化不同阶段的干预策略差异。这些研究空白为后续工作指明了方向，建议后续开展离体肝灌流实验和SPNS2敲除小鼠模型研究，以全面验证机制。

该成果对肝脏疾病防治具有双重意义：理论层面揭示了sphingolipid代谢通路在AH中的核心作用，补充了炎症微环境中S1P信号调控的现有理论；实践层面证实LQ作为天然黄酮类化合物的临床应用价值，其98%的纯度（研究采购标准）和可调控的剂量效应关系为开发新型护肝药物奠定了基础。研究团队建立的SPNS2-S1P-G蛋白偶联受体信号网络模型，已被推荐为后续相关研究的参考框架。