RELM-β通过GIPC1/OR1N1/CLIC4互作调控缺氧性肺动脉高压的新机制

《Cardiovascular Drugs and Therapy》：RELM-β Augmented Hypoxia-Induced Pulmonary Hypertension Through Interacting with GIPC1, OR1N1 and CLIC4

本研究针对缺氧性肺动脉高压（PH）中血管重塑机制不清的难题，通过体内外实验揭示RELM-β通过结合膜蛋白GIPC1、OR1N1和CLIC4，分别激活FAK/survivin和NF-κB/HIF-1α通路，促进肺动脉平滑肌细胞（PASMC）与内皮细胞（PAEC）增殖，从而加剧缺氧性PH。该发现为靶向血管重塑的PH治疗提供了新靶点。

　　

在慢性阻塞性肺病、间质性肺病等高海拔或呼吸系统疾病中，长期缺氧可引发肺动脉高压（Pulmonary Hypertension, PH），其特征是肺血管阻力持续升高，最终导致右心衰竭甚至死亡。当前临床药物主要针对肺血管收缩，但对血管结构重塑这一核心病理环节缺乏有效干预手段，因此探索血管重塑的分子机制成为突破治疗瓶颈的关键。

Resistin样分子β（RELM-β）作为缺氧诱导因子同源物，在PH患者肺组织中高表达，且能促进血管细胞增殖，但其在缺氧性PH中的具体作用机制尚不明确。为此，研究团队通过构建小鼠缺氧模型，结合分子互作筛选与基因编辑技术，系统揭示了RELM-β通过调控多个膜蛋白复合物驱动PH血管重塑的新机制。

本研究主要采用以下关键技术：

1. 1.
   小鼠缺氧性PH模型构建及血流动力学检测（右心室收缩压RVSP、右心室肥厚指数RVHI）；
2. 2.
   亲和纯化-质谱（AP-MS）与免疫共沉淀（Co-IP）鉴定RELM-β互作蛋白；
3. 3.
   条件性基因敲除（CKO）小鼠（GIPC1^CKO、CLIC4^CKO）验证靶点功能；
4. 4.
   细胞功能实验（CCK-8、流式细胞术、EdU/TUNEL染色）评估增殖与凋亡；
5. 5.
   分子通路分析（qPCR、Western blot）探究FAK、NF-κB、HIF-1α等信号分子。

RELM-β加剧缺氧性肺动脉高压

通过给缺氧小鼠外源注射人重组RELM-β蛋白，发现其显著加重肺小动脉中膜厚度（%MT）、右心室肥厚（RVHI）和右心室收缩压（RVSP），并增强肺血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖活性，证实RELM-β是缺氧性PH的促进因子。

GIPC1、OR1N1和CLIC4是RELM-β的关键互作蛋白

利用AP-MS技术筛选出RELM-β可直接结合GIPC1、OR1N1和CLIC4，Co-IP实验进一步验证了这些相互作用。在PH模型小鼠肺组织中，三者的mRNA表达均显著上调，且RELM-β处理进一步强化这一趋势。

GIPC1/OR1N1通过FAK通路调控PASMC增殖

在PASMC中过表达RELM-β可上调GIPC1、OR1N1和FAK的mRNA表达，而沉默GIPC1或OR1N1能抑制FAK表达及细胞增殖，并逆转RELM-β介导的抗凋亡效应和S期细胞比例增加。缺氧环境下同样依赖该通路激活细胞增殖。

CLIC4通过NF-κB/HIF-1α通路促进PAEC增殖

在PAEC中，RELM-β通过CLIC4激活NF-κB和HIF-1α信号，增强细胞存活与血管生成能力。抑制CLIC4或下游信号分子可显著阻断RELM-β或缺氧引起的PAEC过度增殖。

基因敲除验证GIPC1和CLIC4的体内功能

GIPC1^CKO和CLIC4^CKO小鼠在缺氧及RELM-β处理下，肺血管重塑和右心功能指标均显著改善，证实GIPC1和CLIC4是RELM-β促PH作用的关键介质。

本研究首次阐明RELM-β通过协同激活GIPC1/OR1N1-FAK和CLIC4-NF-κB/HIF-1α两条信号轴，分别驱动PASMC和PAEC增殖，最终加剧缺氧性PH的血管重塑。该发现不仅深化了对PH发病机制的理解，更为开发靶向血管重塑的疗法提供了新策略。论文发表于《Cardiovascular Drugs and Therapy》，为肺动脉高压的精准治疗开辟了新方向。