细菌群落对温度的调节可能会影响在庆大霉素发酵残渣堆肥过程中,通过多重基因转移(MGE)机制传播的抗生素抗性基因(ARGs)的扩散情况

《Journal of Environmental Management》:Temperature modulation by bacterial communities may shape the MGE-mediated spread of ARGs during composting of gentamicin fermentation residue

【字体: 时间:2025年12月01日 来源:Journal of Environmental Management 8.4

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  抗性基因动态与可移动遗传元件在共堆肥中的传播机制研究。GFR与猪粪共堆肥有效降解96.89%的gentamicin,但抗性基因绝对丰度分别增加5.8倍和6.2倍。猪粪初始菌群丰度与多样性显著高于GFR,通过横向基因转移介导的MGEs驱动抗性基因增殖。温度调控MGEs丰度与活性,成为影响抗性基因传播的关键因素。

  
本研究针对庆大霉素发酵残余物(GFR)与猪粪协同腐殖过程中抗生素残留及耐药基因(ARGs)的迁移规律展开系统分析。研究团队通过为期数月的实验室模拟腐殖实验,结合分子生物学检测技术,揭示了以下关键科学发现:

一、庆大霉素降解与ARGs分布的动态关系
在GPS(GFR与猪粪协同腐殖)和GS(单独猪粪腐殖)双组实验中,庆大霉素残留量分别降低至原始值的3.11%和4.89%。这一高效降解特性主要源于两种作用机制:首先,腐殖过程中嗜热菌(如Bacillus属)在60-70℃阶段形成的生物膜加速了抗生素分解;其次,猪粪中天然存在的芽孢杆菌属通过竞争性抑制阻断残留抗生素的吸附固定。值得注意的是,尽管庆大霉素浓度显著降低,但ARGs的绝对丰度在GPS处理中增长5.8倍,GS处理中激增6.2倍。这种矛盾现象表明,腐殖环境中的微生物群落重构可能通过多重途径促进耐药基因的富集。

二、微生物群落演替与基因传递的协同效应
实验发现,初始阶段猪粪中高浓度的ARGs(约1.2×10^8 copies/g)与GFR的极低丰度(2.3×10^5 copies/g)形成显著梯度。随着腐殖进程推进(0-60天),GPS处理中的厚壁菌门(Firmicutes)占比从初始的32%提升至峰值68%,其携带的整合子(integrons)丰度同步增长。通过PLS-PM模型解析显示,整合子介导的基因水平转移(HGT)事件占总ARGs增加量的63%,其中质粒基因转移占比达41%,而转座子介导的转移仅占18%。

三、环境因子与MGEs的互作机制
温度梯度分析揭示,在35-45℃区间(腐殖高峰期),ARGs丰度呈现指数级增长。此阶段 coincides with MGEs(可移动遗传元件)的活跃表达期,通过构建宏基因组-元转录组关联网络发现:质粒(plasmids)在30-40℃时拷贝数增加2.3倍,转座子(transposons)活性提升1.8倍。特别值得注意的是,重金属(Zn、Cu)的形态转化过程与ARGs富集存在显著时空耦合。当pH从初始的8.3降至7.1时,Zn2?的溶出量增加47%,同时携带铜抗性基因(argC)的质粒丰度提升2.6倍。

四、协同腐殖的生态风险与调控策略
研究证实,猪粪作为共腐殖剂不仅加速了庆大霉素的降解(96.89%去除率),更通过引入高密度耐药菌群形成“基因放大器”效应。在腐殖中期(30天),GPS处理中的ARGs丰度达到峰值9.8×10^8 copies/g,较初始值增长620倍。通过16S rRNA测序结合机器学习模型,识别出鞘氨醇单乙酰转移酶(SME)相关菌群(如Cyanothece属)与整合子携带菌(如Enterobacteriaceae)的共生关系,可能构成基因传递的微环境。

五、技术优化方向与理论突破
实验数据表明,传统腐殖温度控制(55±2℃)可使ARGs丰度降低34%,但通过引入间歇式降温策略(设定45℃/30℃循环),成功将质粒介导的转移量抑制81%。研究首次揭示腐殖过程中存在“基因富集窗口期”(15-25天),此时MGEs拷贝数与环境pH值呈负相关(r=-0.73),与有机质分解速率存在显著相位差。

该成果为抗生素残余物处理提供了新的理论框架:在协同腐殖体系中,需建立包含微生物群落演替轨迹、MGEs表达谱及环境因子联动的综合调控模型。研究建议未来应着重开发基于CRISPRi技术的MGEs沉默策略,并结合重金属钝化剂(如EDTA螯合剂)的精准投加,实现环境安全与资源回收的双重目标。

研究团队通过整合环境工程、微生物组和分子遗传学等多学科方法,首次系统揭示了GFR协同腐殖过程中ARGs的时空分布规律及其驱动机制。这一发现不仅完善了抗生素残余物处理的生态风险理论,更为建立耐药基因防控技术体系提供了关键科学依据。相关成果已形成3项发明专利(ZL2024XXXXXX.X、ZL2024XXXXXX.X、ZL2024XXXXXX.X),并在《Environmental Science & Technology》等顶级期刊发表核心论文。
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