miR-106b-5p通过靶向抑癌基因RBL2促进胃癌进展的机制研究

《Scientific Reports》：MiR-106b-5p promotes gastric cancer progression by directly targeting the tumor suppressor RBL2

本研究揭示了miR-106b-5p通过直接靶向抑癌基因RBL2促进胃癌恶性进展的新机制。研究人员通过体外功能实验、动物模型及临床样本验证，发现miR-106b-5p/RBL2轴可调控胃癌细胞增殖、迁移/侵袭及凋亡过程，为胃癌靶向治疗提供了新的理论依据。

　　

在全球癌症负担排名中，胃癌（Gastric Cancer, GC）长期位居发病率第五和死亡率第五的严峻位置。据2022年统计数据显示，全球每年新增病例约96万例，其中中国占比高达37%，胃癌防治已成为我国公共卫生领域的重大挑战。尽管诊疗手段不断进步，晚期胃癌患者的五年生存率仍低于30%，这凸显了探索胃癌发生发展分子机制的紧迫性。

近年来，微RNA（microRNA, miRNA）在肿瘤调控中的作用备受关注。这些长约22个核苷酸的非编码RNA分子，能够通过靶向信使RNA（mRNA）调控基因表达，在肿瘤增殖、侵袭、转移等过程中扮演重要角色。其中，miR-106b-5p被发现在多种癌症中呈现致癌特性，但其在胃癌中的具体作用机制尚未完全阐明。与此同时，视网膜母细胞瘤样蛋白2（Retinoblastoma-like protein 2, RBL2）作为细胞周期关键调控因子，其与miR-106b-5p的调控关系在胃癌中仍属未知领域。

为解开这一科学谜题，山西医科大学附属肿瘤医院的研究团队在《Scientific Reports》发表了最新研究成果。研究人员通过整合生物信息学分析、临床样本验证、细胞实验和动物实验等多层次证据，系统揭示了miR-106b-5p/RBL2轴在胃癌进展中的关键作用。

研究采用的主要技术方法包括：利用癌症基因组数据库（UALCAN）进行生物信息学分析；收集40对胃癌组织及癌旁组织样本进行qRT-PCR验证；通过细胞转染技术构建miR-106b-5p过表达/抑制模型；采用CCK-8法、克隆形成实验、Transwell实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭和凋亡能力；运用双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系；建立裸鼠移植瘤模型进行体内功能验证。

miR-106b-5p在胃癌中高表达

数据库分析和临床样本检测均显示，miR-106b-5p在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织。生存分析提示，miR-106b-5p高表达患者呈现总体生存期缩短的趋势。在细胞水平，胃癌细胞系（HGC-27、AGS、MKN-28）中miR-106b-5p的表达也明显高于正常胃黏膜细胞GES-1。

miR-106b-5p促进胃癌细胞恶性表型

研究人员在AGS和HGC-27细胞中分别转染miR-106b-5p模拟物（mimic）和抑制剂（inhibitor），成功构建调控模型。功能实验表明，miR-106b-5p过表达可显著促进细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并抑制细胞凋亡；而抑制miR-106b-5p则产生相反效果。

RBL2是miR-106b-5p的直接靶标

通过整合TargetScan、miRWalk等五个数据库的预测结果，研究人员发现RBL2是miR-106b-5p的潜在靶基因。实验验证显示，miR-106b-5p过表达可降低RBL2的mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验进一步证实，miR-106b-5p可直接结合RBL2的3'非翻译区（3'UTR），且该结合具有序列特异性。

RBL2抑制胃癌细胞恶性行为

为明确RBL2的肿瘤抑制功能，研究人员构建了RBL2过表达质粒。实验结果表明，RBL2过表达可显著抑制胃癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并促进细胞凋亡。

RBL2逆转miR-106b-5p的致癌效应

挽救实验显示，在miR-106b-5p过表达的胃癌细胞中共同过表达RBL2，可部分逆转miR-106b-5p促癌效应。免疫组化分析发现，在miR-106b-5p高表达的胃癌组织中，RBL2蛋白水平显著降低。Western blotting结果进一步表明，RBL2过表达可逆转miR-106b-5p对E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Vimentin、Caspase-3、Bcl-2等蛋白表达的调控作用。

miR-106b-5p/RBL2轴促进体内肿瘤生长

动物实验结果表明，过表达miR-106b-5p可显著促进移植瘤的生长，而RBL2过表达则抑制肿瘤生长，进一步验证了该轴在体内的生物学功能。

本研究首次系统阐明了miR-106b-5p通过直接靶向RBL2促进胃癌进展的分子机制。该发现不仅深化了对胃癌表观遗传调控网络的认识，也为开发基于miR-106b-5p/RBL2轴的靶向治疗策略提供了实验依据。未来研究可进一步探索该轴下游信号通路（如p53/Rb通路）的调控机制，以及其与现有化疗方案的协同效应，为胃癌精准治疗开辟新的方向。