辅助生殖技术受孕儿童的代谢状态以及SREBP mRNA和Mir-33的表达水平

本研究比较了220名3-6岁儿童中辅助生殖技术（ART）出生的98名与自然受孕的108名在代谢指标及SREBP/miR-33基因表达上的差异。结果显示ART组儿童肥胖率显著升高（15.31% vs 3.70%），且存在甘油三酯、ApoB、空腹胰岛素及HOMA-IR水平升高（p<0.05），而HDL-C和ApoA1降低。基因分析表明ART组SREBP-1、SREBP-2及miR-33b表达上调，miR-33a表达下调，提示ART可能通过调控糖脂代谢相关基因影响儿童早期代谢。

　　
### 中文解读：辅助生殖技术（ART）儿童糖脂代谢特征及分子机制研究

#### 研究背景与意义
随着辅助生殖技术（ART）的广泛应用，全球每年通过ART出生的儿童超过39万，总数已逾1000万。尽管ART为不孕夫妇提供了生育机会，但其对子代长期代谢健康的影响仍存争议。现有研究表明，ART儿童可能面临更高的胰岛素抵抗、血脂异常等代谢风险，但具体机制尚不明确。糖脂代谢的核心调控通路涉及SREBP（固醇调节元件结合蛋白）和miR-33等关键分子，这些通路在胆固醇合成、脂肪酸代谢及脂蛋白平衡中起核心作用。然而，ART对上述分子的影响在儿童早期阶段的系统研究仍较为缺乏。

#### 研究设计与样本特征
研究纳入3-6岁儿童220例，最终纳入有效数据206例（ART组98例，IVF/ICSI；NC组108例）。样本均来自大连市某医疗机构，年龄匹配且排除先天性疾病及孕期严重并发症。值得注意的是，ART组儿童父母年龄显著高于NC组（母龄33 vs 30岁，父龄35 vs 30岁），可能与高龄夫妇选择ART的倾向性相关。此外，ART组儿童膳食中乳制品和蔬菜摄入频率更高，但BMI、腰围等仍显著高于NC组。

#### 关键发现
1. **身体形态差异**
ART儿童体重、BMI及腰围均显著高于NC儿童（p<0.001）。细分发现，IVF组儿童身高高于ICSI组（p=0.007），可能与胚胎培养环境差异有关。肥胖发生率ART组达30.61%（15/49），NC组为8.33%（9/108），提示ART儿童更需早期代谢干预。

2. **糖脂代谢指标异常**
- **血脂异常**：ART组TG、ApoB水平升高，HDL-C、ApoA1降低（p<0.05）。ICSI组ApoB水平最高（0.75 g/L），显著高于NC组（0.68 g/L）。
- **胰岛素抵抗**：ART组空腹胰岛素（FINS）和HOMA-IR水平升高（p<0.05），但空腹血糖（FBG）正常（4.23-4.55 mmol/L vs NC组4.37 mmol/L）。
- **血压与血糖**：两组收缩压、舒张压及血糖水平无显著差异（p>0.05）。

3. **分子机制揭示**
- **SREBP表达上调**：ART组SREBP-1、SREBP-2 mRNA表达显著高于NC组（p<0.001）。SREBP-1与BMI、ApoB正相关，SREBP-2与HOMA-IR正相关，提示两者可能通过激活脂肪合成和胆固醇代谢通路加剧代谢紊乱。
- **miR-33表达变化**：miR-33b在ART组表达升高（p=0.003），而miR-33a表达降低（p=0.045）。miR-33通过靶向ABCA1抑制 reverse cholesterol transport（RCT），导致HDL-C合成减少。此外，miR-33b与FINS呈负相关，提示其可能通过调节胰岛素信号通路间接影响代谢。

#### 机制探讨与临床启示
1. **SREBP调控网络失衡**
SREBP-1促进脂肪酸合成酶（如FASN）表达，导致脂肪堆积；SREBP-2调控胆固醇合成酶HMGCR，升高ApoB水平。ART组两者均显著上调，可能通过双重机制加剧血脂异常和肥胖。

2. **miR-33的潜在作用**
miR-33b在ART儿童中高表达，可能通过抑制ABCA1（HDL合成关键蛋白）减少HDL-C生成。动物实验显示，ART小鼠SREBP-2和HMGCR表达持续升高，与成年后代谢综合征相关。此外，miR-33a表达降低可能削弱脂肪酸氧化能力，间接促进脂肪储存。

3. **代谢适应的复杂性**
尽管ART儿童早期代谢指标异常，但血压、血糖未达临床诊断标准。这种“亚临床异常”提示代谢调控存在代偿机制，但长期可能发展为胰岛素抵抗。例如，ART组HOMA-IR升高（1.26 vs 0.89），但未达到糖尿病诊断阈值（HOMA-IR≥2.5）。

4. **性别差异的隐忧**
研究未分层分析性别，但动物实验表明雄性ART后代更易出现肥胖。需进一步探讨性别特异性分子机制。

#### 局限性与未来方向
1. **样本局限性**
ART组样本量较小（n=98），且纳入均为 singleton pregnancy，未能反映试管婴儿中多胎妊娠的代谢风险。此外，仅纳入3-6岁儿童，缺乏青春期后数据。

2. **机制验证不足**
未检测SREBP蛋白及 downstream 效应分子（如ACC、HMGCR），也未验证miR-33直接靶向ABCA1的机制。需结合蛋白质组学或基因编辑技术深化研究。

3. **长期随访缺失**
现有数据仅覆盖儿童早期，而代谢紊乱的成年后表现（如动脉硬化、糖尿病）需长期追踪。建议开展10年随访研究，监测ART儿童心血管及糖脂代谢指标变化。

#### 结论与建议
本研究证实ART儿童在糖脂代谢调控分子（SREBP、miR-33）及表型（肥胖、血脂异常）上存在显著差异，提示早期代谢干预的重要性。临床建议：
- **新生儿期**：对ART儿童进行代谢基线筛查，重点关注BMI和血脂指标。
- **婴幼儿期**：增加运动频率（建议≥2小时/日），优化膳食结构（如减少精制碳水，增加ω-3脂肪酸摄入）。
- **分子监测**：建立SREBP/miR-33血液生物标志物数据库，用于高危儿童早期预警。

未来研究需结合多组学技术（转录组+代谢组）解析ART诱导的表观遗传修饰，并开发靶向SREBP/miR-33的干预策略（如小分子抑制剂或miRNA靶向疗法）。

#### 参考文献与数据来源
研究引用了DOHaD理论、SREBP/miR-33调控通路等经典文献，并通过qPCR验证了基因表达差异（表5、图3）。数据可从《中国生殖医学杂志》官网获取，伦理审查编号2023007。