早发性卵巢功能不全患者外周B细胞亚群改变揭示免疫失调新机制

《npj Aging》：Peripheral B cell alteration in patients with premature ovarian insufficiency

本研究针对早发性卵巢功能不全(POI)的免疫发病机制，首次系统揭示了POI患者外周B细胞亚群的显著改变：总CD19+B细胞比例升高而记忆B细胞(MBCs)和浆母细胞减少，特别是CD19+CD24hiCD27+和CD19+CD24hiCD38hi调节性B细胞(Bregs)数量减少导致IL-10分泌下降。这些改变与FSH升高、AMH和AFC降低显著相关，为POI的免疫治疗提供了新靶点。

　　

在全球不孕症发生率持续攀升的背景下，早发性卵巢功能不全(Premature Ovarian Insufficiency, POI)作为一种严重影响女性生殖健康的疾病日益受到关注。POI以40岁前卵巢功能衰竭为特征，伴随卵泡刺激素(FSH)升高和雌激素(E2)缺乏，不仅导致生育能力下降，还增加心血管疾病和骨质疏松等长期健康风险。尽管自身免疫失调被认为与5-30%的POI病例相关，但以往研究多聚焦于T细胞免疫异常，对B细胞在POI中的作用知之甚少。

为揭示B细胞在POI免疫发病机制中的作用，山东大学生殖医学研究中心联合多家医院开展了一项病例对照研究。该研究纳入66例POI患者和78例卵巢功能正常对照者，通过流式细胞术系统分析了外周血B细胞亚群分布特征。研究发现POI患者存在显著的B细胞失调，表现为总CD19⁺B细胞比例升高，而记忆B细胞和浆母细胞显著减少。尤为重要的是，研究人员首次发现POI患者中具有免疫调节功能的B细胞亚群——CD19⁺CD24^hiCD27⁺和CD19⁺CD24^hiCD38^hi调节性B细胞(Bregs)数量明显减少，且其分泌的白细胞介素-10(IL-10)能力下降。

研究采用的关键技术方法包括：从144名参与者（66例POI患者和78例对照）外周血分离单个核细胞(PBMCs)，通过流式细胞术分析B细胞亚群表面标志物(CD19、CD24、CD27、CD38等)，使用CD40L/CpG刺激B细胞并检测IL-10产量，建立Bregs与自体CD4⁺T细胞共培养体系评估免疫抑制功能，以及Spearman相关性分析B细胞亚群与卵巢储备指标(FSH、AMH、AFC)的关系。

基线特征

研究人群平均年龄32岁，两组在年龄、BMI、初潮年龄等基线特征无差异。POI组FSH和LH水平显著升高，E2、AMH和AFC显著降低，符合POI诊断标准。

POI患者B细胞亚群的改变

流式细胞分析显示，POI患者总CD19⁺B细胞比例显著高于对照组[7.94% vs 4.65%]。进一步分析发现，类别转换记忆B细胞[19.00% vs 24.00%]、非类别转换记忆B细胞[10.10% vs 11.90%]和浆母细胞[0.93% vs 1.26%]比例均显著降低，而初始B细胞和过渡期B细胞无显著变化。

POI患者Bregs比例降低但抑制功能完整

POI患者IL-10阳性B10细胞比例显著降低[0.26% vs 0.43%]。CD19⁺CD24^hiCD27⁺ Bregs[6.00% vs 13.65%]和CD19⁺CD24^hiCD38^hi Bregs[2.24% vs 3.55%]比例均显著减少。然而，Bregs与自体CD4⁺T细胞共培养实验显示，POI患者Bregs对IFN-γ和TNF-α产生的抑制能力与对照组无显著差异。

B细胞亚群与POI卵巢储备的相关性

相关性分析显示，总CD19⁺B细胞比例与FSH水平正相关，与AMH和AFC负相关。CD19⁺CD24^hiCD27⁺ Bregs比例与FSH负相关，与E2、AMH和AFC正相关。CD19⁺CD24^hiCD38^hi Bregs比例也与AMH正相关，表明B细胞失调与卵巢储备功能下降密切相关。

研究结论指出，POI患者存在显著的外周B细胞亚群失调，特别是Bregs数量减少可能导致免疫抑制功能不足，与T细胞免疫异常共同促成POI的免疫发病机制。这些发现为理解POI的免疫学基础提供了新视角，B细胞亚群可能成为POI诊断的生物标志物和治疗靶点。尽管研究存在样本量有限、未能明确B细胞异常与POI的因果关系等局限性，但为开发针对B细胞的免疫调节疗法奠定了重要基础，为POI的精准治疗提供了新思路。该研究发表于《npj Aging》期刊，对深入理解生殖衰老的免疫机制具有重要科学价值。