柿饼渣肽与没食子酸对凝血酶的协同抑制作用：体外评估其效果与机制

《Journal of Food Measurement and Characterization》：Synergistic thrombin inhibition by Diospyros lotus pomace peptides and gallic acid: an in vitro assessment of effects and mechanisms

本研究从Diospyros lotus果壳中分离出凝血酶抑制肽PPHG，并通过体外实验评估其与没食子酸（GA）的协同作用。结果表明，两者结合可显著增强抗凝血效果，降低PPHG有效剂量，为血栓疾病治疗及功能性食品开发提供新思路。

　　

摘要

凝血酶是凝血系统中的核心酶，抑制其活性可以改善血液的高凝状态，在预防和治疗血栓性疾病方面发挥着关键作用。本研究的主要目的是从柿子渣（D. lotus）中分离并鉴定一种凝血酶抑制肽，并通过体外实验评估其与没食子酸（GA）的协同作用。通过对柿子渣中的蛋白质进行酶解处理后进行超滤纯化，通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术共鉴定出266种肽，通过虚拟筛选确定了最具生物活性的肽为Pro-Pro-His-Gly（PPHG）。尽管PPHG对凝血酶的IC??值（抑制浓度）为30.69 ± 0.54 mg/mL，相对于其他传统生物活性物质来说较高，但当将其与4 mg/mL的GA以10 mg/mL的浓度联合使用时，表现出显著的协同效应，从而降低了PPHG的有效使用剂量。傅里叶变换红外光谱（FTIR）显示PPHG与GA之间形成了氢键；圆二色性（CD）光谱表明PPHG和GA通过改变凝血酶的二级结构来影响其活性，两者联合使用时效果更显著。这些结果表明PPHG和GA具有协同的抗凝作用，为治疗血栓性疾病和开发功能性食品提供了潜在的应用前景。

图形摘要