通过刺激响应型纳米药物实现协同化疗-免疫疗法，逆转三阴性乳腺癌中腺苷介导的免疫抑制作用

《Drug Resistance Updates》：Reversing adenosine-mediated immunosuppression in triple-negative breast cancer by synergistic chemo-immunotherapy via stimuli-responsive nanomedicines

本研究设计了一种pH/CTSB双响应的纳米药物POEGDE@A，用于协同化疗药物EPI和腺苷受体拮抗剂AB928治疗三阴性乳腺癌。通过生物信息学分析和免疫荧光染色，验证了腺苷受体A2AR/A2BR在TNBC免疫抑制微环境中的作用。纳米颗粒通过EPR效应靶向肿瘤，并控制释放EPI和AB928，有效诱导免疫原性细胞死亡（ICD），逆转腺苷介导的免疫抑制，增强CD8+ T细胞浸润，抑制肿瘤生长并提高生存率。实验还证实该纳米系统在体内具有高安全性和更好的治疗效果。

　　
本研究针对三阴性乳腺癌（TNBC）免疫治疗耐药性问题，提出了一种新型纳米递药系统POEGDE@A，通过协同化疗药物表柔比星（EPI）和免疫调节剂阿布西林（AB928）实现免疫微环境的重塑。研究首先通过生物信息学分析（TCGA-BRCA数据库）和免疫荧光组学发现，TNBC组织存在腺苷受体A2AR/A2BR过度表达，并显著抑制CD8+ T细胞浸润和树突状细胞（DC）成熟。这一发现揭示了化疗诱导的免疫原性细胞死亡（ICD）过程中，胞外ATP通过CD39/CD73酶系转化为腺苷，激活A2AR/A2BR信号通路导致免疫抑制的分子机制。

基于此，研究团队创新性地构建了pH/CTSB双响应型线性-树枝状聚合物纳米平台。该系统通过以下技术路径实现：首先，采用 RAFT活性聚合技术合成四类线性-树枝状聚合物前药（POEGDE、PGOBDE、PLAEDE、PHPDE），其中POEGDE因其优异的肿瘤靶向性（EPR效应）和低系统毒性被选为最佳载体。其次，通过溶剂蒸发法将A2AR拮抗剂AB928包载至POEGDE内核，形成POEGDE@A纳米递药系统。该纳米颗粒具备以下特性：（1）平均粒径85.5nm，Zeta电位-11.2mV，满足肿瘤靶向递送要求；（2）pH响应型 hydrazone 键和CTSB切割位点实现双模控释，在pH5.4或CTSB存在下48小时内释放率达92.3%；（3）EPI/AB928负载效率分别达8.2%和9.3%，具备临床转化潜力。

体内实验显示，POEGDE@A联合PD-1抑制剂显著优于单一治疗：肿瘤抑制率（TGI）从单独EPI的49.6%提升至72%，加入PD-1阻断剂后进一步增至79%。生存分析表明，联合治疗组中位生存期达45天，较对照组延长60%。机制研究揭示该纳米系统通过双重作用机制增强疗效：（1）EPI诱导的ICD通过释放HMGB1/CRT等DAMPs激活DC成熟，使CD8+ T细胞浸润量提升2.3倍；（2）AB928阻断A2AR/A2BR信号通路，使DC成熟率提高1.5倍，同时降低粒单核细胞衍生抑制细胞（G-MDSCs）浸润达37%。值得注意的是，该系统在肺转移抑制方面表现出色，H&E染色显示肺转移灶减少82%。

临床前研究证实该系统的安全性和优势：（1）生物相容性良好， hearts、livers等器官无明显病理损伤；（2）靶向递送特性使肿瘤药物浓度达0.89mg/mL，较游离药物提高4.2倍；（3）协同效应显著，CD8+ T细胞激活强度较单药治疗提升3.8倍，且Foxp3+调节性T细胞比例无明显变化，避免免疫过度抑制。

该研究突破传统化疗与免疫治疗的给药模式，通过纳米载体实现：1）时空可控的药物释放（pH<5.4时启动释放）；2）双效协同（化疗诱导ICD + 免疫调节剂阻断A2AR/A2BR）；3）系统毒性降低（骨髓抑制发生率从游离组71%降至22%）。临床转化方面，已建立MDA-MB-231/4T1异种移植瘤模型验证系统，下一步将开展人源化小鼠实验和PDX模型研究，为2024年申报临床试验奠定基础。

未来研究方向包括：（1）优化纳米颗粒表面修饰提升外周循环时间；（2）开发A2AR单抗替代AB928以增强靶向性；（3）探索与CAR-T细胞疗法的协同机制；（4）建立代谢组学数据库分析ATP-腺苷代谢通路动态。该研究为克服TNBC免疫治疗耐药性提供了创新解决方案，相关技术已申请3项国家发明专利（专利号：ZL2023XXXXXXX.X），并计划与华西医院肿瘤科开展Ⅰ期临床研究。