M1巨噬细胞外泌体通过降低ALKBH5介导的KLF6去甲基化作用，上调KLF6的表达，从而抑制肺腺癌的生长

《Molecular and Cellular Biochemistry》：M1 macrophage exosomes inhibit lung adenocarcinoma growth by up-regulating KLF6 via the reduction of ALKBH5-mediated KLF6 demethylation

M1巨噬细胞外泌体通过携带KLF6抑制肺腺癌进展，其机制涉及ALKBH5介导的KLF6 m6A去甲基化调控。体外实验显示外泌体可抑制肿瘤细胞增殖迁移，而ALKBH5通过去甲基化削弱KLF6稳定性，抵消外泌体抑癌作用，体内实验验证了该机制。

　　

摘要

研究表明，M1型巨噬细胞外泌体（M1-Exos）在调节肺腺癌（LUAD）的进展中起着重要作用。Krüppel样因子6（KLF6）是一种广泛表达的核转录调节因子，参与多种关键的细胞过程，并具有肿瘤抑制功能。本研究旨在探讨KLF6在LUAD中的作用，以及M1-Exos是否通过KLF6发挥其功能。通过qRT-PCR和Western blotting检测mRNA和蛋白质的水平。从M1型巨噬细胞中分离出外泌体，并与LUAD细胞系共培养以进行功能分析。体外分析采用了5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine）检测、流式细胞术和Transwell实验。通过甲基化RNA免疫沉淀实验分析N6-甲基腺苷（m6A）的修饰谱型，并通过RNA免疫沉淀实验确定其相互作用。建立了小鼠模型以进行体内分析。M1型巨噬细胞外泌体抑制了LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力。进一步分析表明，KLF6被包装在M1型巨噬细胞外泌体中，并能够转移到LUAD细胞中。从功能上看，KLF6的缺失会增强M1型巨噬细胞外泌体的作用，从而导致LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强。机制上，烷基化修复同源蛋白5（ALKBH5）作为一种RNA m6A去甲基化酶，可以减少KLF6的m6A修饰，从而破坏KLF6的稳定性，降低其在M1型巨噬细胞和LUAD细胞中的表达。重要的是，ALKB5还逆转了M1-Exos对LUAD细胞的抗癌作用。此外，ALKB5也阻碍了M1-Exos介导的LUAD肿瘤生长的体内抑制作用。综上所述，M1型巨噬细胞外泌体通过减少ALKB5介导的KLF6去甲基化来抑制LUAD的生长。

图形摘要

ALKB5的减少通过降低KLF6的甲基化程度来增加M1型巨噬细胞中KLF6的表达；KLF6被包装在M1型巨噬细胞外泌体中，并可通过外泌体转移到LUAD细胞中，从而抑制LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭。