综述：植物来源的外泌体在前列腺癌中的酶递送应用：综述与概念性路线图

《Bratislava Medical Journal》：Plant-Derived Exosomes for Enzyme Delivery in Prostate Cancer: A Narrative Perspective and Conceptual Roadmap

植物外泌体（P-EVs）作为酶递送平台在前列腺癌治疗中具有潜力，通过优化负载策略（如L-天冬酰胺酶和蛋白酶抑制剂）和严格质量控制，可提高靶向给药效率并降低系统性毒性。

　　

摘要

背景

植物来源的细胞外囊泡（P-EVs；以下简称“外泌体”）具有生物相容性、低免疫原性以及可扩展性，并且具有天然的器官趋向性。其独特的脂质/蛋白质组成和生物生成机制可能在装载和输送治疗性物质方面比哺乳动物外泌体具有技术优势。尽管有令人信服的体外/体内数据支持P-EV用于输送化疗药物和核酸，但载有酶的P-EV在靶向癌症治疗中的应用——尤其是在前列腺癌领域——仍是一个尚未充分探索的领域。

目的

这篇叙述性的综述综合了将P-EV作为前列腺癌中酶输送平台的技术基础、装载策略及其转化前景。我们重点介绍了L-天冬酰胺酶（利用其与TP53突变相关的依赖性）和蛋白酶轴抑制剂蛋白/肽（例如针对MMPs、组织蛋白酶、丝氨酸蛋白酶）作为重复、靶向给药的有理载荷。

方法

我们从生物相容性、可制造性以及适合装载酶载荷的角度，叙述性地比较了P-EV与哺乳动物外泌体；评估了被动（孵育）和主动（超声处理、电穿孔、挤压、化学穿孔）装载方法，特别强调了保持不稳定酶活性的重要性；并提出了一个概念性的实验路线图，而不是固定的实验室方案，包括：(i) 使用纳米粒子追踪分析/动态光散射和冷冻透射电镜（cryo-TEM）检测囊泡完整性；(ii) 通过Western blotting检测外泌体标志物，并设置适当的阴性对照以验证载荷；(iii) 进行特定于载荷的催化活性测定；(iv) 在肿瘤微环境中分析外泌体的生物分布和治疗效果。

结果

现有证据表明P-EV能够高效地输送小分子和核酸；靶向酶治疗虽然仍处于起步阶段，但在概念上具有很强的可行性。在此框架下，L-天冬酰胺酶和蛋白酶轴抑制剂被视为治疗前列腺癌的有理载荷，它们具有在肿瘤内富集和重复给药的潜力，同时能够最大限度地减少全身毒性。选择合适的装载方法并进行严格的质控对于维持囊泡完整性、酶活性以及良好的分布至关重要。

结论

基于P-EV的酶输送方法可能提高治疗效果并降低前列腺癌的脱靶毒性。我们提出了一条从实验室到临床的路线图，优先考虑符合GMP标准的细胞外囊泡分离方法、优化装载效率和载荷完整性，以及在重复给药条件下确保良好的体内生物分布、疗效和安全性。通过明确聚焦于前列腺癌的酶输送应用，而非更广泛的P-EV应用，这篇综述为未来的实验研究指明了一条具体且尚未充分探索的转化途径。

图形摘要

背景

植物来源的细胞外囊泡（P-EVs；以下简称“外泌体”）具有生物相容性、低免疫原性以及可扩展性，并且具有天然的器官趋向性。其独特的脂质/蛋白质组成和生物生成机制可能在装载和输送治疗性物质方面比哺乳动物外泌体具有技术优势。尽管有令人信服的体外/体内数据支持P-EV用于输送化疗药物和核酸，但载有酶的P-EV在靶向癌症治疗中的应用——尤其是在前列腺癌领域——仍是一个尚未充分探索的领域。

目的

这篇叙述性的综述综合了将P-EV作为前列腺癌中酶输送平台的技术基础、装载策略及其转化前景。我们重点介绍了L-天冬酰胺酶（利用其与TP53突变相关的依赖性）和蛋白酶轴抑制剂蛋白/肽（例如针对MMPs、组织蛋白酶、丝氨酸蛋白酶）作为重复、靶向给药的有理载荷。

方法

我们从生物相容性、可制造性以及适合装载酶载荷的角度，叙述性地比较了P-EV与哺乳动物外泌体；评估了被动（孵育）和主动（超声处理、电穿孔、挤压、化学穿孔）装载方法，特别强调了保持不稳定酶活性的重要性；并提出了一个概念性的实验路线图，而不是固定的实验室方案，包括：(i) 使用纳米粒子追踪分析/动态光散射和冷冻透射电镜（cryo-TEM）检测囊泡完整性；(ii) 通过Western blotting检测外泌体标志物，并设置适当的阴性对照以验证载荷；(iii) 进行特定于载荷的催化活性测定；(iv) 在肿瘤微环境中分析外泌体的生物分布和治疗效果。

结果

现有证据表明P-EV能够高效地输送小分子和核酸；靶向酶治疗虽然仍处于起步阶段，但在概念上具有很强的可行性。在此框架下，L-天冬酰胺酶和蛋白酶轴抑制剂被视为治疗前列腺癌的有理载荷，它们具有在肿瘤内富集和重复给药的潜力，同时能够最大限度地减少全身毒性。选择合适的装载方法并进行严格的质控对于维持囊泡完整性、酶活性以及良好的分布至关重要。

结论

基于P-EV的酶输送方法可能提高治疗效果并降低前列腺癌的脱靶毒性。我们提出了一条从实验室到临床的路线图，优先考虑符合GMP标准的细胞外囊泡分离方法、优化装载效率和载荷完整性，以及在重复给药条件下确保良好的体内生物分布、疗效和安全性。通过明确聚焦于前列腺癌的酶输送应用，而非更广泛的P-EV应用，这篇综述为未来的实验研究指明了一条具体且尚未充分探索的转化途径。

图形摘要