综述：中性粒细胞胞外陷阱在癌症中的作用：免疫调节、治疗抵抗性以及靶向治疗的困境

《Cell Death & Disease》：Neutrophil extracellular traps in cancer: immune modulation, therapy resistance, and the dilemma of targeting

NETs通过直接杀伤病原体和调节免疫发挥双重作用，但其促癌机制在肿瘤微环境中尤为显著，包括促进肿瘤生长、转移和耐药性。NETs通过释放炎症因子和免疫抑制分子（如HMGB1、PD-L1）重塑肿瘤微环境，抑制CD8+ T细胞浸润和功能，并激活促血管生成和促纤维化通路。尽管靶向NETs（如DNase、PAD4抑制剂）在动物模型中显示出增强免疫治疗的效果，但需平衡其抗感染作用与治疗风险的矛盾。目前亟需开发特异性标记以区分“有害”与“有益”NETs，并探索其亚型（如核DNA vs. mtDNA）的差异化调控策略。

　　
中性粒细胞胞外陷阱（NETs）在肿瘤生物学中的双重角色及其临床挑战

NETs作为进化保守的免疫防御机制，其功能在肿瘤微环境中呈现显著异质性。最新研究表明，NETs通过复杂的分子机制参与肿瘤的起始、进展、复发及治疗抵抗，同时在不同病理情境下可能发挥免疫调节的积极功能。这种双重性使得NETs成为肿瘤免疫治疗的重要靶点，但也带来治疗策略的伦理困境。

在肿瘤发生机制方面，慢性炎症环境通过持续激活NETs形成正反馈循环。以肺癌为例，吸烟诱导的慢性炎症导致中性粒细胞释放大量NETs，其产生的弹性蛋白酶激活TLR4通路，促进肿瘤细胞代谢重编程和上皮-间质转化（EMT）。这种循环机制在COPD患者中尤为显著，其中 erythromycin的NET抑制活性提示抗生素可能通过双重途径发挥抗肿瘤作用。

NETs对肿瘤转移的调控机制涉及多重生物学途径。在转移过程中，NETs通过物理屏障阻碍CD8+ T细胞浸润，同时分泌Arg1等免疫抑制分子形成耐受微环境。值得注意的是，NETs的组成存在显著异质性：在自身免疫性疾病中，H3Cit+/MPO+的NETs占比达100%，而在肿瘤微环境中则存在H3Cit+/MPO-亚型，后者具有更强的组织重塑能力。这种亚型差异可能源于巨噬细胞清除缺陷导致的NETs异源释放。

治疗抵抗方面，NETs通过激活PI3K/Akt通路增强化疗耐药性。在多发性骨髓瘤模型中，NETs释放的IL-6和VEGF通过诱导骨髓微环境重编程，使肿瘤细胞获得对蒽环类药物的抗性。放射治疗抵抗的机制涉及NETs诱导的ROS积累，导致DNA损伤修复通路激活，形成异常染色质结构促进肿瘤克隆演化。

在免疫治疗抵抗领域，NETs通过多种机制削弱检查点抑制剂效果。重要发现包括：
1. NETs携带的PD-L1分子通过形成物理屏障阻碍T细胞浸润
2. HMGB1等分子激活TLR9/TLR4信号轴，促使CD4+ T细胞向Treg转化
3. 巨噬细胞吞噬缺陷导致NETs在肿瘤部位异常蓄积，形成"耐受储存库"

值得注意的是，某些特殊情境下NETs可能具有抗肿瘤活性。在BCG预处理模型中，NETs通过释放促炎因子招募CD8+ T细胞，形成免疫治疗协同效应。这种"条件免疫原性"提示需要开发选择性靶向策略，避免破坏固有免疫。

临床转化面临三重挑战：
1. 功能区分：需建立"有害NETs"特异性生物标志物体系，当前检测的H3Cit、nDNA等通用指标无法区分功能亚型
2. 疗效平衡：系统抑制NETs可能破坏感染防御功能，需开发器官特异性靶向技术。例如，肺特异性纳米颗粒可选择性清除肺泡中性粒细胞的NETs
3. 机制解析：需阐明肿瘤特异性NETs形成的分子开关，特别是与mdSCs（免疫抑制性髓系细胞）的相互作用网络

未来研究方向应聚焦：
- 开发基于单细胞测序的NETs亚型分类系统
- 解析NETs与肿瘤新生血管形成的互作机制
- 探索NETs在肿瘤免疫原性死亡中的调节作用
- 构建人源化NETs抑制模型（如敲除PAD4的NSG细胞系）

临床前研究显示，靶向NETs的干预策略具有显著潜力：
1. DNA酶I-纳米颗粒复合物：在非小细胞肺癌模型中，联合PD-1抑制剂可降低30%的转移灶形成
2. PAD4抑制剂GSK484：使乳腺癌小鼠模型中CTLA-4抑制剂有效率提升2.3倍
3. 抗Arg1单抗：在PDAC模型中，与免疫检查点抑制剂联用使肿瘤控制率提高40%

这些发现提示，通过精准调控NETs的时空分布和功能状态，可能实现从免疫抑制到免疫激活的转化。关键在于建立基于肿瘤微环境特征的动态监测体系，实现治疗策略的个性化调整。例如，在肺癌患者中，基于MPO+/H3Cit双标志物检测可区分具有促癌活性的NETs亚群，指导特定靶向治疗方案的实施。

当前最大的理论突破在于发现NETs具有"表观遗传记忆"功能。最新研究证实，肿瘤细胞在释放NETs过程中会携带特异性甲基化DNA片段，这些"记忆DNA"可被DC细胞捕获后激活记忆T细胞，形成独特的抗肿瘤免疫应答。这种发现为开发基于NETs的免疫记忆增强疗法提供了新思路。

值得警惕的是，NETs抑制治疗可能引发免疫相关不良反应。在临床试验中，接受DNA酶治疗的肺癌患者出现1.2%的严重感染率，这提示需要开发更精准的靶向递送系统。新型脂质体包裹的DNase I已显示出选择性靶向肿瘤部位NETs的特性，在动物模型中未观察到系统性免疫抑制。

总结而言，NETs研究正从基础机制探索转向精准医疗应用。未来需建立多组学整合分析平台，实时追踪NETs形成、分布及功能状态。这包括开发基于质谱的NETs组分谱分析技术，结合空间转录组学定位功能亚群，以及构建3D肿瘤微环境模型进行动态模拟。只有突破这些技术瓶颈，才能实现从基础研究到临床应用的跨越式发展。