综述：病毒战士：利用溶瘤病毒释放免疫系统在癌症免疫治疗中的潜力

《Molecular Therapy Oncology》：Viral warriors: Unlocking the immune system’s potential with oncolytic viruses in cancer immunotherapy

本综述系统阐述了溶瘤病毒(OVs)作为癌症免疫治疗新前沿的突破性进展。文章深入探讨了OVs通过双重作用机制——选择性裂解肿瘤细胞并激发原位疫苗效应——将“冷”肿瘤转化为“热”肿瘤，从而增强免疫检查点抑制剂(ICIs)等疗法的疗效。作者重点分析了OVs的靶向性改造策略（如基因工程表达GM-CSF、IL-12等细胞因子）、与化疗/放疗/免疫治疗的协同效应，以及克服肿瘤免疫抑制微环境(TME)的挑战，为开发下一代联合免疫治疗方案提供了关键见解。

　　

溶瘤病毒(Oncolytic Viruses, OVs)代表了一类令人兴奋的肿瘤免疫治疗新策略，其核心在于利用病毒的力量克服治疗耐药性并增强免疫反应。这些病毒能够选择性靶向并摧毁肿瘤细胞，同时避免伤害健康组织。肿瘤细胞裂解后释放的肿瘤特异性抗原(Tumor-Specific Antigens, TAAs)，有效地在体内创造了一种原位疫苗，从而“教育”免疫系统识别和攻击癌症。

溶瘤病毒的作用机制

OVs发挥治疗作用主要通过两大途径：直接肿瘤裂解和诱导抗肿瘤免疫。

直接肿瘤裂解是OVs的核心特征。正常宿主细胞能够通过抗病毒信号通路感知并清除OVs。然而，癌细胞中固有的抗病毒机制存在缺陷，这为病毒的持续存在和增殖创造了有利条件。OVs附着并进入宿主癌细胞后，会释放其遗传物质（DNA或RNA），并劫持癌细胞的 machinery 来复制自身，合成病毒蛋白，最终组装成新的病毒颗粒。随着病毒在肿瘤细胞内的增殖，最终导致细胞破裂（裂解），将成熟的病毒粒子释放到肿瘤微环境(Tumor Microenvironment, TME)中，从而感染邻近的肿瘤细胞，不断传播裂解效应。

诱导抗肿瘤免疫是OVs更深远的价值所在。OVs介导的溶瘤作用会触发免疫原性细胞死亡(Immunogenic Cell Death, ICD)。这个过程会向TME中释放TAAs、病原体相关分子模式(Pathogen-Associated Molecular Patterns, PAMPs)和病毒来源的损伤相关分子模式(Damage-Associated Molecular Patterns, DAMPs)。这些信号被树突状细胞(Dendritic Cells, DCs)等抗原呈递细胞(Antigen-Presenting Cells, APCs)识别，促进其成熟和肿瘤抗原的摄取，进而激活T细胞，启动强大的抗肿瘤免疫应答。关键标志物如细胞外ATP、高迁移率族蛋白B1(High-Mobility Group Box 1, HMGB1)以及易位至细胞表面的热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70, HSP70)、HSP90和钙网蛋白(Calreticulin, CRT)是ICD的关键。同时，PAMPs和DAMPs与免疫细胞上的模式识别受体(Pattern Recognition Receptors, PRRs)（如Toll样受体和cGAS-STING通路组件）结合，触发促炎性细胞因子（如I型干扰素(IFNs)、白细胞介素[IL]-1β、IL-6、IL-12、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)）和趋化因子的释放。这一系列事件能够将缺乏免疫细胞浸润的免疫学“冷”肿瘤，转化为充满免疫细胞的炎症性“热”肿瘤，这对于成功的免疫治疗至关重要。

OVs激活的适应性免疫反应，特别是T细胞反应，是实现长期癌症控制的关键。APCs摄取抗原后，迁移至次级淋巴器官，在那里与识别肿瘤抗原的T细胞相互作用并刺激其活化。OVs诱导的肿瘤裂解和产生的细胞因子环境增强了MHC I类和II类分子以及DCs表面的共刺激分子（如CD40, CD80, CD86）的表达，为T细胞活化提供了充分信号。一旦激活，抗肿瘤CD8+ T细胞能够以不依赖于OV的方式清除局部和远处的肿瘤，导致肿瘤消退。更重要的是，OVs有助于形成免疫记忆，使免疫系统能够在未来再次遇到相同肿瘤抗原时迅速做出反应。

增强溶瘤病毒活性的策略

为了提高OVs的治疗效果和特异性，研究人员采用了多种基因工程和联合策略。

OVs的“武装化”

基因工程技术允许将具有治疗价值的转基因插入OVs基因组中，使其成为递送治疗性物质的“特洛伊木马”。最常见的“武装”策略是让OVs表达免疫刺激因子，如细胞因子GM-CSF、IL-2、IL-12、IL-15、IFN-α/β/γ等。例如，GM-CSF能够募集和激活APCs，增强抗原呈递。临床批准的T-VEC(Talimogene Laherparepvec)就是一种表达GM-CSF的1型单纯疱疹病毒(HSV-1)。其他策略包括表达抗血管生成基因（如内皮抑素、血管抑素）以破坏肿瘤血管，表达前凋亡配体（如TRAIL）促进癌细胞凋亡，或表达自杀基因（如胸苷激酶(TK)）以激活前体药物，实现更精准的杀伤。

克服肿瘤微环境屏障

肿瘤的物理和免疫抑制屏障是OVs有效扩散的主要障碍。OVs可以通过表达降解细胞外基质(Extracellular Matrix, ECM)的酶（如透明质酸酶、基质金属蛋白酶）来增强在肿瘤组织内的浸润和扩散。此外，通过“武装”OVs表达趋化因子（如CXCL11）或T细胞衔接器(Bispecific T Cell Engagers, BiTEs)，可以主动招募T细胞到肿瘤部位，改善免疫细胞浸润。

溶瘤病毒的联合治疗

OVs单药疗法可能面临疗效不足的挑战，因此与其它癌症治疗方式的联合应用展现出巨大的潜力。

与免疫检查点抑制剂(ICIs)联合

这是目前最富前景的策略之一。OVs通过ICD将“冷”肿瘤转化为“热”肿瘤，为ICIs（如抗PD-1/PD-L1、抗CTLA-4抗体）发挥作用创造了有利条件。临床前和临床研究（如T-VEC联合ipilimumab或pembrolizumab治疗黑色素瘤）已证实这种组合能显著提高客观缓解率和生存期。更有创新性的策略是直接工程化OVs，使其在肿瘤局部表达ICI分子（如抗CTLA-4 scFv），从而实现肿瘤内高浓度、系统低毒性的治疗效果。

与化疗或放疗联合

传统疗法与OVs可产生协同效应。某些化疗药物（如环磷酰胺、吉西他滨）可以抑制机体对病毒的快速清除，为OVs复制争取时间。放疗不仅能直接杀伤肿瘤细胞，还能增强病毒的复制和扩散，并诱导额外的ICD。

与过继性T细胞疗法（如CAR-T）联合

OVs可以改造表达CD19等抗原，从而吸引和扩增靶向这些抗原的CAR-T细胞，这为OVs应用于实体瘤治疗提供了新思路。OVs还能通过表达IL-15等细胞因子来支持CAR-T细胞在TME中的持久性。

与靶向治疗联合

联合使用靶向特定信号通路（如MEK、JAK/STAT）的小分子抑制剂，可以抑制癌细胞的抗病毒反应，从而增强OVs的复制和溶瘤效果。

挑战与未来展望

尽管OVs前景广阔，但其临床转化仍面临挑战。有效的递送是一大难题，系统给药常因病毒被免疫系统快速清除、中和抗体以及肝脏扣押而受限。瘤内注射虽能避免部分问题，但不适用于转移性或难以触及的肿瘤。预存免疫力也会影响重复给药的疗效。此外，动物模型不能完全模拟人类肿瘤的复杂性，使得临床前数据预测价值有限。平衡OVs的溶瘤效应与激发的抗病毒免疫反应，以及管理联合疗法（尤其是与ICIs联用）可能增加的免疫相关不良事件，也是需要谨慎考虑的问题。

未来的发展方向包括：开发更先进的病毒工程技术以提高肿瘤靶向性和安全性；优化递送系统（如使用细胞载体、聚合物包被）以改善系统给药效果；寻找预测疗效的生物标志物以实现个性化治疗；以及设计更合理的联合治疗方案以最大化协同效应。

总之，溶瘤病毒疗法作为一种独特的癌症治疗平台，通过直接溶瘤和激发抗肿瘤免疫的双重作用机制，为克服当前免疫治疗的瓶颈提供了强大的武器。随着对病毒-肿瘤-免疫系统相互作用的深入理解和技术的不断进步，OVs有望在未来的癌症综合治疗格局中扮演越来越重要的角色。