芳基烃受体与单核细胞型急性髓系白血病（AML）以及先天免疫防御机制有关，这种防御机制可通过使用芳基烃受体抑制剂（AHR inhibitor）来逆转

本研究探讨急性髓系白血病（AML）中芳烃受体（AHR）通路对免疫微环境的影响。发现AHR高表达与HLA-E上调、NK细胞功能抑制及化疗耐药相关。通过单细胞RNA测序和体外实验验证，AHR抑制剂IK-364可增强NK细胞杀伤并降低HLA-E表达，提示靶向AHR可能改善AML预后。

　　
本研究聚焦于急性髓系白血病（AML）中芳烃受体（AHR）通路对免疫微环境的调控机制，探讨靶向AHR可能增强自然杀伤（NK）细胞疗法在AML治疗中的应用价值。研究通过多组学技术、临床队列分析和功能实验，揭示了AHR与免疫逃逸的关联，并验证了AHR抑制剂对NK细胞功能的影响。

### 研究背景与科学问题
AML是一种高度异质性的血液恶性肿瘤，其发病机制涉及基因组异常、白血病细胞分化阻滞以及免疫微环境失衡的复杂网络。近年来，AHR通路因其调控细胞分化、免疫应答和化疗耐药的作用备受关注。然而，AHR如何通过免疫微环境介导白血病免疫逃逸尚不明确，成为本研究的核心科学问题。

### 研究方法与创新性
研究采用多维度整合分析方法，结合临床队列、分子分型、单细胞测序和功能实验，系统解析AHR在AML免疫逃逸中的调控网络：

1. **临床队列构建**：纳入69例新诊断AML患者，基于骨髓NK细胞百分比划分高/低组，结合临床数据（年龄、ELN风险、FAB分型）进行多因素分析。
2. **分子分型技术**：应用Bulk RNA-seq和Single-cell RNA-seq结合细胞状态聚类（Seurat+Harmony），建立AHR高/低表达分型体系，揭示AHR与白血病分化状态的关联。
3. **功能验证体系**：开发AHR特异性抑制剂IK-364（IC50=5nM），通过体外细胞实验（MOLM-14细胞系）和体内模拟（患者白血病细胞预处理）验证AHR通路的关键作用。
4. **机制解析策略**：采用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除AHR及其下游效应分子（如STAT1、IRF1），结合Western blot和荧光标记追踪蛋白表达动态。

### 关键发现与机制解析
#### 1. AHR表达与预后的临床关联
- **NK细胞比例与生存率负相关**：骨髓NK细胞百分比＞8.8%的群体，中位生存期（OS）较＜8.8%组缩短（HR=2.78, p=0.006）。
- **AHR表达分层**：通过Beat AML数据库（560例）确定AHR高/低组，发现AHR高表达与HLA-E上调（r=0.69, p=0.002）、MHC-I类/II类分子增强表达显著相关（FDR<0.05）。

#### 2. AHR调控免疫逃逸的分子网络
- **AHR-IFN-γ-STAT1-HLA-E信号轴**：通过体外实验证实，IFN-γ刺激可24小时内诱导AHR表达（p<0.0001），而敲除IFNGR1可阻断AHR上调。STAT1和IRF1作为核心转录因子，通过正反馈调控促进AHR表达和HLA-E转录。
- **单细胞证据**：单细胞测序显示，AHR高表达患者外周血NK细胞成熟度降低（CD56dim+NKp30+比例下降42%），且NKG2D配体（MICA/B）和FAS配体表达受限，导致激活信号减弱。

#### 3. AHR抑制剂的功能验证
- **体外增强NK细胞杀伤**：预处理MOLM-14细胞（3μM IK-364，48h）后，NK细胞特异性杀伤率提升2.3倍（p<0.001），且该效应可被NKG2A单抗（阻断CD94/NKG2A通路）完全逆转。
- **蛋白表达动态**：流式细胞术显示，AHR抑制剂显著降低患者白血病细胞HLA-E表达（gMFI从82.4±15.6降至54.3±12.8, p=0.003），同时下调STAT1（FDR=0.012）和IRF1（FDR=0.016）的磷酸化水平。

#### 4. 机制补充实验
- **基因编辑验证**：CRISPR敲除AHR后，HLA-E表达未显著变化（p=0.12），证实AHR对HLA-E的调控依赖上游IFN-γ信号。
- **代谢关联分析**：AHR高表达组患者的色氨酸代谢中间产物（kynurenine）水平升高3.2倍（p=0.001），提示AHR可能通过kynurenine-AHR轴影响免疫应答。

### 临床转化价值
研究提出“双靶向”治疗策略：
1. **AHR抑制剂单药应用**：在体外模型中，3μM IK-364即可显著增强NK细胞杀伤活性（E:T=10:1时杀伤率提升47%），且未观察到细胞毒性（Annexin V染色阴性）。
2. **联合NK细胞疗法**：AHR抑制剂与NK细胞过继治疗联用，可产生协同效应。例如，在M4/M5型AML患者中，联合治疗使NK细胞杀伤效率从12.7%提升至34.5%（p=0.002）。

### 研究局限与未来方向
1. **样本量限制**：单细胞测序仅纳入5例AHR高/低样本，需扩大队列验证。
2. **空间异质性未解**：现有数据无法区分骨髓与外周血的AHR表达差异，需开展空间转录组学研究。
3. **耐药机制探索**：发现AHR高表达与Venetoclax耐药相关（HR=3.2, p=0.004），提示可能通过调控BCL2家族蛋白（如BCL2/BCL-XL）介导耐药。

### 总结
本研究首次系统揭示AHR通过“免疫冷”微环境调控AML免疫逃逸的分子机制，证实AHR抑制剂可打破肿瘤-免疫平衡。该发现为AML治疗提供了新思路：通过AHR靶向药物改善NK细胞功能，或与CAR-T、过继NK细胞治疗形成协同。未来研究需重点验证AHR-IFN-γ-STAT1轴在骨髓微环境中的动态变化，以及开发新型AHR抑制剂（如IK-364衍生物）的临床转化潜力。