循环中的C端肽段及α-1抗胰蛋白酶聚合物，作为儿童Pi*ZZ肝病的潜在标志物

本研究评估了C末端AAT多肽和聚合物作为儿童Pi*ZZ型AAT缺乏症肝损伤潜在血浆生物标志物。通过分析20例稳定患儿样本的血浆，发现C37和C42与ALT/AST正相关，UDCA治疗降低其水平；AAT聚合物与GGT正相关，但肽与聚合物无关。结论这些标志物可能用于早期风险分层和监测，需扩大样本验证。

　　
### 严重α1-抗胰蛋白酶缺乏症（Pi*ZZ）儿童肝损伤的血浆生物标志物研究

#### 研究背景与意义
α1-抗胰蛋白酶缺乏症（AATD）是一种由SERPINA1基因突变引发的遗传性疾病，其中Pi*ZZ亚型因Glu342Lys突变导致抗胰蛋白酶蛋白折叠异常，形成聚合物并在肝细胞内蓄积，引发肝细胞损伤和纤维化。尽管成人Pi*ZZ患者常表现为肺气肿，但儿童患者可能出现肝损伤，且两者机制可能不同。目前临床缺乏可靠生物标志物用于预测儿童AATD的疾病进展，因此探索新型生物标志物成为研究重点。

#### 研究方法与样本特征
研究采用回顾性队列设计，纳入20例临床稳定的Pi*ZZ儿童（年龄0.5-14.4岁，中位年龄7.2岁），排除合并门脉高压或晚期肝病的患者。样本采集于2022-2024年常规随访期间，检测内容包括：
1. **总AAT水平**：使用免疫比浊法（tina-quant）检测，以0.3 g/L为阈值进行分组。
2. **C末端肽分析**：通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测9种C末端肽，最终确定C36、C37和C42可稳定定量。
3. **AAT聚合物检测**：采用原位电泳结合Western blot（抗LG96单抗），以纯化Z型AAT为内参校准浓度。

#### 关键发现
1. **可检测的C末端肽**：
- C36、C37和C42在所有20例儿童血浆中均检出，其中C37和C42浓度与年龄呈负相关（r=-0.74和r=-0.79），提示儿童随年龄增长可能自然减少。
- C37和C42与肝酶显著相关：C37与ALT（r=0.55，p=0.01），C42与ALT（r=0.58，p=0.004）和AST（r=0.49，p=0.03）呈正相关，表明这些肽可能反映肝细胞损伤程度。

2. **AAT聚合物与肝功能指标**：
- 聚合物浓度与GGT（r=0.49，p=0.05）呈正相关，提示可能与胆汁淤积或肝细胞压力相关，但未与ALT/AST直接关联。
- UDCA治疗组的C37和C42水平显著低于未治疗组（p=0.02和p=0.004），推测UDCA可能通过减轻肝细胞损伤或抑制促纤维化酶活性间接降低肽水平。

3. **肽与聚合物的独立性**：
- 检测未发现聚合物与C36-C42肽水平存在显著相关性（p>0.05），提示两者可能由不同机制介导，如聚合物反映肝细胞内蓄积量，而肽水平与肝损伤急性程度相关。

#### 机制与临床启示
1. **年龄相关变化**：
- 儿童C37和C42水平随年龄增长下降，可能与肝脏组织修复能力增强或代谢清除率提高有关，但需进一步验证。
- 对比成人研究，儿童中总AAT水平与肽浓度未显示直接关联，可能与儿童肝脏蛋白代谢特点不同有关。

2. **治疗干预的影响**：
- UDCA治疗降低C37/C42水平，可能通过以下途径：①减轻肝细胞炎症反应，减少促纤维化酶（如MMP）活性；②调节胆汁酸池，改善肝细胞膜完整性，从而减少内源性肽的释放。

3. **生物标志物潜力**：
- **C37和C42**：可作为儿童Pi*ZZ肝损伤的早期标志物，其水平变化可能独立于总AAT浓度，且与UDCA疗效相关。
- **AAT聚合物**：与GGT升高相关，可能反映胆汁淤积或肝细胞氧化应激，但需更大样本验证。

#### 局限性与未来方向
1. **样本局限性**：
- 样本量较小（n=20），且仅纳入轻中度肝病儿童，缺乏晚期肝病样本。
- 未包含健康对照组（如Pi*MM儿童），无法明确肽水平的特异性。

2. **机制待解问题**：
- C36肽未显示肝损伤相关性，可能参与肺组织保护（如抑制中性粒细胞蛋白酶活性）。
- 聚合物与肽的独立性提示需区分肝内蓄积（聚合物）与肝损伤（肽）的时空关系。

3. **临床转化路径**：
- 需开展前瞻性研究，跟踪儿童AATD患者肽水平动态变化，结合肝组织活检验证其与纤维化进展的关系。
- 探索联合检测方案（如C37/C42与聚合物），可能提高疾病分层准确性。

#### 结论
本研究首次在儿童群体中系统验证了C末端AAT肽（C37、C42）作为肝损伤生物标志物的潜力，其水平与ALT/AST动态相关，且受UDCA治疗影响。AAT聚合物则可能与胆汁淤积性指标（GGT）存在关联。这些发现为儿童AATD的早期诊断和分层管理提供了新思路，但需更大规模、多中心研究进一步验证其临床适用性。