外用驱虫剂中IR3535的测定：一种新的HPLC-DAD分析方法及合规性评估

快速高效液相色谱法（HPLC-DAD）开发及IR3535质量监控研究。摘要：本研究建立了一种符合ICH Q2(R2)标准的快速HPLC-DAD方法，用于IR3535的定量分析，2.8分钟短保留时间显著提升检测效率。方法验证显示线性R2=0.996，精密度RSD<2%，准确度回收率98.2%-101.4%。对6种市售昆虫 repellent 检测发现仅2种符合ANVISA规格（15%-20%含量）。该方法的稳健性和灵敏度（LOQ 0.01 mg/mL）为质量控制和市场监督提供可靠工具。

　　
### 中文解读：IR3535在 topical insect repellent 中的质量控制和高效分析方法研究

#### 研究背景与意义
随着气候变化导致的热带和亚热带地区扩大，蚊虫繁殖环境显著增加，登革热、寨卡病毒等由蚊虫传播的疾病防控需求日益迫切。传统驱蚊剂如DEET因潜在毒性及皮肤刺激问题受到质疑，而IR3535作为新型合成驱蚊成分，因低毒性和安全性被广泛推荐用于儿童产品。然而，市售产品的质量参差不齐，可能存在有效成分含量不足或超标等问题，直接影响防蚊效果和消费者健康。本研究旨在开发一种高效、可靠的分析方法，以规范IR3535驱蚊剂产品的质量控制。

#### 核心发现
1. **方法创新性**
研究团队建立了基于高效液相色谱-二极管阵列检测（HPLC-DAD）的分析方法，具有以下显著优势：
- **分析速度提升40%**：传统方法需4.78分钟，而本方法仅需2.8分钟，显著提高检测效率。
- **高灵敏度与准确性**：定量限（LOQ）低至0.01 mg/mL，检测限（LOD）为0.003 mg/mL，满足痕量分析需求；线性系数R2达0.996，验证了方法的可靠性。
- **适用性广**：成功应用于不同剂型（乳液、凝胶、喷雾）的检测，解决了复杂基质中目标成分提取的难题。

2. **市售产品质量评估**
对6款商业产品进行检测，结果显示：
- **仅2款合规**：其中1款乳液（L1）和1款凝胶（G1）含量在±10%的允许范围内，而其他4款（包括3款乳液和2款喷雾）均存在显著偏差，部分产品含量低至标称值的12%-15%。
- **剂型差异显著**：喷雾剂（S1、S2）和乳液（L3）的IR3535含量严重不足，可能与生产工艺或储存条件有关。例如，标称20%的喷雾剂实际含量仅为7.6%-8.4%，远低于安全阈值。

3. **质量控制漏洞的启示**
研究指出，当前市售产品普遍存在以下问题：
- **配方不透明**：部分喷雾剂（如S2）未公开具体辅料，导致成分难以溯源。
- **生产监管缺失**：多数产品未达到ANVISA规定的含量波动≤10%标准，需强化生产过程中的质量控制。
- **检测方法局限**：现有文献中使用的气相色谱法（GC-FID）或近红外光谱法（NIR）存在灵敏度不足或设备成本高等缺陷，本研究的HPLC-DAD方法更具普适性。

#### 技术突破与验证
1. **方法优化过程**
研究团队通过系统筛选，确定了最佳色谱条件：
- **色谱柱**：Avantor ACE C8柱（5 μm粒径），避免传统C18柱基线不稳问题。
- **流动相**：乙腈-水（50:50，v/v），pH调节至中性以减少干扰峰。
- **检测波长**：210 nm，精准捕获IR3535的紫外吸收特征峰。

2. **方法验证关键参数**
- **线性范围**：0.02-0.14 mg/mL，R2=0.996，符合ICH标准。
- **精密度**：重复性RSD<2%，中间精密度RSD<1%，确保数据稳定性。
- **准确度**：加标回收率98.2%-101.4%，验证方法可靠性。
- **选择性**：通过基质干扰实验证明，在复杂配方中仍能准确分离IR3535峰。

3. **方法鲁棒性测试**
研究模拟实际检测中的环境波动，发现：
- 检测波长偏差±1 nm、柱温波动±1°C、流速变化±0.1 mL/min时，IR3535峰保留时间稳定在2.8±0.2分钟，含量测定误差<2%。
- 该鲁棒性设计可适应实验室与生产现场的不同条件，降低人员操作差异对结果的影响。

#### 实际应用价值
1. **监管层面**
研究结果直接支持ANVISA（巴西国家卫生监督局）的监管需求：
- 提供快速筛查工具（2.8分钟/样本），适用于大规模市场监管。
- 明确指出约67%的市售产品存在含量缺陷，为政策制定提供依据（如强制要求标签标注实际含量）。

2. **企业生产改进**
- **工艺优化**：针对喷雾剂（S1、S2）和乳液（L3）的提取效率低问题，建议采用超声辅助提取结合有机溶剂优化（如50:50丙醇-水体系）。
- **质量控制**：需建立从原料采购到成品包装的全流程监控，例如使用IR3535纯度≥99.7%的原料，并定期进行留样检测。

3. **消费者安全警示**
- 标注含量不达标的产品（如L3乳液含量仅7.6%，不足标称值的38%）可能显著降低防蚊效果，增加蚊媒疾病传播风险。
- 建议消费者优先选择通过ANVISA认证的产品，并注意查看检测报告中的具体含量数据。

#### 未来研究方向
1. **降解机制研究**
针对含量不足的产品，需探究IR3535在储存或使用过程中降解的化学途径（如水解、氧化），为改进包装工艺提供理论支持。

2. **多组分同步分析**
当前方法仅针对IR3535，未来可结合质谱（MS）联用技术，同时检测DEET、避蚊胺等常见驱蚊成分，建立多维质量评估体系。

3. **基层检测能力建设**
推广HPLC-DAD方法的便携化设备（如微流控芯片-紫外检测系统），使偏远地区也能快速筛查产品合规性。

#### 结论
本研究成功开发了一种高效、经济的IR3535分析方法，解决了传统方法在复杂基质中提取效率低、检测速度慢等问题。通过系统验证，该方法在准确性（回收率98.2%-101.4%）、灵敏度（LOD=0.003 mg/mL）和适用性（兼容乳液、凝胶、喷雾剂型）方面均达到国际标准。市场调研显示，约67%的市售产品存在含量缺陷，亟需建立强制性的全流程质量监控体系。建议将该方法纳入ANVISA的官方检测规范，并通过公众教育提升消费者对产品合规性的认知，共同构建安全的驱蚊产品市场环境。