从Paris fargesii的根茎中提取的氧化型和羟基化型penogenin皂苷及其止血活性

《Phytochemistry》：Oxidized- and hydroxylated-pennogenin saponins from the rhizomes of Paris fargesii and their hemostatic activity

本研究从止血活性植物Paris fargesii的根茎中分离出24种pennogenin型皂苷，其中9种为新化合物（parisfargosides F-N）。通过HR-ESI-MS、NMR及化学方法确定结构，发现parisfargosides F具有罕见的C5-C8过氧桥结构，G-I则含α,β-不饱和酮基团。所有化合物均进行止血活性测试，化合物24的EC50值最低（50.1 μM），显示显著血小板聚集诱导活性。研究系统揭示了该植物中止血成分的结构多样性及活性规律。

　　

余玲玲|焦丽珍|李彦熙|李旭红|凌珊珊|肖龙高|刘瑞琪|倪伟|闫欢|季云恒|刘海阳

中国科学院昆明植物研究所植物化学与天然药物国家重点实验室及云南特色植物提取实验室，中国昆明650201

摘要

从Paris fargesii的根茎总皂苷中分离出了9种先前未描述的氧化型和羟基化型的pennogenin皂苷（命名为parisfargosides F-N（1–9）），以及15种已报道的类似物，这些化合物具有止血活性。通过广泛的光谱分析（包括HR-ESI-MS、1D和2D NMR）和化学方法阐明了它们的结构。Parisfargoside F（1）具有一个罕见的苷元，在C-5和C-8之间含有过氧化物桥；而parisfargosides G-I（2–4）在B环中包含一个α,β-不饱和酮基团。此外，还评估了所有分离物的止血活性。结果表明，6种皂苷（5、18、20–22和24）具有诱导血小板聚集的作用，其中皂苷24的活性尤为显著，其EC₅₀值为50.1 μM。同时，本文还讨论了这些分离物的结构-活性关系。这些发现揭示了P. fargesii中的止血成分。

引言

Paris属属于玄参科（APG IV分类系统），包含26个物种，主要分布在欧洲和东亚的热带及温带地区（Ji, 2020）。在传统医学中，该属植物具有厚根茎的物种被用作某些专利制剂的关键原料，尤其是止血药“Gongxuening胶囊”（Niu等人，2021）。现代药理学研究表明，具有螺甾烷结构的pennogenin皂苷是促进体内止血的主要活性成分（Fu等人，2008；Cong等人，2012）。

Paris fargesii Franch.于1898年首次被鉴定为Paris属的一个新物种（Li, 1998；Ji, 2020）。它是中国特有的物种，主要分布于四川、重庆、湖北、湖南、贵州和云南等地（Ji, 2020）。其根茎长期以来被用作中药（中文称为“Chonglou”），用于治疗出血、胃炎、腮腺炎、蛇虫咬伤和脓肿（Ji, 2020）。先前的研究表明，P. fargesii的主要成分是甾体皂苷，其中一些皂苷具有细胞毒性（Yu等人，2022a；Yu等人，2022b；Zhao等人，2011；Jin等人，2021）。然而，该植物中pennogenin皂苷的结构多样性及其止血活性尚未得到系统研究。本文详细描述了这些化合物的分离、结构鉴定及其结构-活性关系。

结果与讨论

化合物1以无定形固体形式获得。通过正离子HR-ESI-MS测得其分子式为C₃₉H₅₈O₁₅，质量峰值为m/z 789.3675 [M + Na]⁺（C₃₉H₅₈O₁₅Na⁺的计算值为789.3668），¹³C NMR数据显示有11个不饱和度。化合物1的¹H NMR谱图（表1）显示了4个特征性的甾体甲基质子峰，分别位于δ_H 0.67（d，J = 6.0 Hz，Me-27）、1.06（s，Me-18）、1.18（d，J = 7.2 Hz，Me-21）和1.27（s，Me-19）；以及3个烯烃质子峰，位于δ_H 6.38（d，J =

结论

通过对P. fargesii根茎的系统性植物化学研究，共分离出了24种pennogenin皂苷，其中包括9种新发现的化合物。其中，parisfargoside F（1）的苷元在C-5和C-8之间含有过氧化物桥；而parisfargosides G-I（2–4）在B环中包含一个α,β-不饱和酮基团。通过测定血小板最大聚集率评估了所有分离物的止血活性。化合物24的止血活性尤为显著

一般实验方法

光学旋转值使用JASCO P-1020偏振仪（Jasco Corp., 日本）测量。紫外光谱使用Shimadzu UV-2401 PC分光光度计获得。傅里叶变换红外（FTIR）光谱使用Bruker Vertex 70（Bruker Corp., 德国）仪器并以KBr片材为检测介质记录。高分辨质谱（HR-ESI-MS）数据使用Agilent 1290 UPLC/6530 Q-TOF质谱仪（Agilent Corp., 美国）获得。柱层析（CC）使用硅胶（200-300目、300-400目，青岛海洋化工有限公司）进行。

作者贡献声明

李彦熙：研究工作。李旭红：研究工作。余玲玲：撰写初稿、研究工作、数据管理。焦丽珍：研究工作。肖龙高：数据管理。刘瑞琪：研究工作。凌珊珊：研究工作。季云恒：资源获取。刘海阳：撰写、审稿与编辑、项目监督、资金申请。倪伟：项目管理。闫欢：研究工作

未引用参考文献

Agrawal, 2003.

数据获取

数据可应要求提供。

利益冲突声明

? 作者声明没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。

致谢

本工作得到了云南省人才振兴计划“顶级团队”项目（202305AT350001）、国家自然科学基金（U1802287和32170408）、云南省特色植物筛选与研发服务平台项目（2022YKZY001）、云南省工业技术领军人才****（YNWR-CYJS-2019-011）以及云南省技术创新人才培养项目（202305AD160009）的资助。